| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 符号与缩略语说明 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1 保护性耕作研究背景及意义 | 第13-16页 |
| ·保护性耕作的定义 | 第13页 |
| ·保护性耕作在国外的起源与背景 | 第13-14页 |
| ·保护性耕作在国内发展情况 | 第14-15页 |
| ·保护性耕作的优缺点 | 第15页 |
| ·保护性耕作对土壤微生物多样性的影响 | 第15-16页 |
| 2 土壤微生物多样性的研究进展 | 第16-22页 |
| ·土壤微生物多样性 | 第16-17页 |
| ·土壤微生物多样性研究方法 | 第17-22页 |
| 3 纤维素降解基因研究进展 | 第22-27页 |
| ·纤维素酶 | 第22-24页 |
| ·纤维素降解基因 | 第24-27页 |
| 第二章 保护性耕作土壤理化性质和几种酶活的测定和比较 | 第27-39页 |
| 1 材料与方法 | 第27-31页 |
| ·试验区概况 | 第27页 |
| ·长期试验设计及样品采集 | 第27-28页 |
| ·土壤理化性质测定 | 第28页 |
| ·常规稀释涂布平板法计数 | 第28页 |
| ·土壤蔗糖酶的测定 | 第28-29页 |
| ·土壤过氧化氢酶的测定 | 第29-30页 |
| ·土壤纤维素酶的活性 | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-36页 |
| ·土壤理化性质 | 第31-32页 |
| ·土壤微生物计数 | 第32-33页 |
| ·土壤中蔗糖酶的活性 | 第33-34页 |
| ·土壤中过氧化氢酶的活性 | 第34-35页 |
| ·土壤中纤维素酶的活性 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-37页 |
| 4 小结 | 第37-39页 |
| 第三章 保护性耕作土壤中细菌和真菌群落多样性的研究 | 第39-57页 |
| 1 材料与方法 | 第39-44页 |
| ·取样地点与方法 | 第39页 |
| ·土壤样品的理化性质及生物学特性 | 第39页 |
| ·菌株、培养基与试剂 | 第39页 |
| ·土壤总DNA的提取及纯化 | 第39-40页 |
| ·土壤细菌多样性的PCR-DGGE分析 | 第40-41页 |
| ·土壤真菌多样性的PCR-DGGE分析 | 第41-42页 |
| ·大肠杆菌DH5a普通感受态细胞的制备 | 第42-43页 |
| ·PCR产物的TA克隆 | 第43页 |
| ·普通感受态细胞酶连产物转化 | 第43-44页 |
| 2 实验结果及分析 | 第44-55页 |
| ·土壤总DNA提取与纯化 | 第44页 |
| ·土壤细菌多样性的PCR-DGGE分析 | 第44-50页 |
| ·土壤真菌多样性的PCR-DGGE分析 | 第50-55页 |
| 3 讨论 | 第55-56页 |
| 4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第四章 保护性耕作土壤中纤维素降解基因cbhI基因多样性的研究 | 第57-71页 |
| 1 试验材料与方法 | 第57-62页 |
| ·功能基因cbhI的PCR扩增 | 第57-58页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第58页 |
| ·PCR产物的TA克隆 | 第58页 |
| ·普通感受态细胞酶连产物的转化 | 第58页 |
| ·克隆文库的构建与保存 | 第58页 |
| ·转化子的PCR扩增验证 | 第58-60页 |
| ·cbhI基因文库的RFLP分析 | 第60-61页 |
| ·cbhI基因文库统计分析 | 第61-62页 |
| 2 结果分析 | 第62-68页 |
| ·土壤cbhI基因的PCR扩增 | 第62-63页 |
| ·cbhI基因文库酶切类型统计分析 | 第63-65页 |
| ·cbhI基因文库库容分析 | 第65页 |
| ·cbhI基因文库多样性指数分析 | 第65-66页 |
| ·cbhI基因文库库容分析 | 第66页 |
| ·cbhI基因文库相似度比较 | 第66-67页 |
| ·cbhI基因测序分析和cbhI基因系统发育分析 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-69页 |
| 4 小结 | 第69-71页 |
| 全文总结 | 第71-73页 |
| 创新点 | 第73-75页 |
| 附录 文中所用的培养基和试剂配方 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
