| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-30页 |
| ·木聚糖酶研究进展 | 第10-21页 |
| ·木聚糖简介 | 第10-12页 |
| ·木聚糖酶简介 | 第12-13页 |
| ·木聚糖酶的分类及来源 | 第13-14页 |
| ·木聚糖酶的酶学特性 | 第14-17页 |
| ·木聚糖酶的基因工程 | 第17-21页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第21-23页 |
| ·木聚糖酶在造纸方面的应用 | 第21页 |
| ·木聚糖酶在食品加工行业中的应用 | 第21-22页 |
| ·木聚糖酶在畜牧行业中的应用 | 第22页 |
| ·木聚糖酶在其他行业中的应用 | 第22-23页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第23-27页 |
| ·巴斯德毕赤酵母简介 | 第23页 |
| ·巴斯德毕赤酵母宿主菌分类 | 第23-25页 |
| ·巴斯德毕赤酵母载体的特点 | 第25-26页 |
| ·巴斯德毕赤酵母高效表达的影响因素 | 第26-27页 |
| ·本论文研究的目的与意义 | 第27-28页 |
| ·本实验主要研究内容及方案设计 | 第28-30页 |
| ·主要研究内容 | 第28-29页 |
| ·实验方案设计 | 第29-30页 |
| 第二章 重组木聚糖酶基因xynB的合成 | 第30-47页 |
| ·实验材料 | 第30-36页 |
| ·菌株和质粒 | 第30页 |
| ·合成基因引物的设计和序列测定 | 第30页 |
| ·主要试剂盒与主要用酶 | 第30-31页 |
| ·培养基 | 第31-32页 |
| ·主要仪器 | 第32-33页 |
| ·主要试剂 | 第33-35页 |
| ·数据库及分析软件 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-44页 |
| ·木聚糖酶基因xynB的密码子优化 | 第36页 |
| ·引物设计 | 第36-40页 |
| ·PCR反应体系 | 第40-41页 |
| ·木聚糖酶基因片段的回收 | 第41-42页 |
| ·木聚糖酶基因片段克隆与分析 | 第42-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-47页 |
| ·木聚糖酶基因的合成 | 第44-45页 |
| ·基因以及蛋白序列的对比 | 第45-46页 |
| ·结果分析 | 第46-47页 |
| 第三章 木聚糖酶基因在毕赤酵母中异源表达 | 第47-56页 |
| ·实验材料 | 第47-48页 |
| ·菌株和质粒 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47-48页 |
| ·主要试剂和药品 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-52页 |
| ·重组木聚糖酶基因表达载体的构建 | 第48页 |
| ·表达载体与毕赤酵母GS115电击转化 | 第48-50页 |
| ·电击转化后重组酵母阳性克隆子的获得 | 第50-52页 |
| ·重组木聚糖酶基因在毕赤酵母中的诱导表达及产物鉴定 | 第52-54页 |
| ·重组酵母菌的富集和诱导表达 | 第52-53页 |
| ·重组木聚糖酶的纯化 | 第53页 |
| ·重组木聚糖酶蛋白的SDS-PAGE电泳鉴定 | 第53-54页 |
| ·重组木聚糖酶的去糖基化 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-56页 |
| 第四章 重组木聚糖酶酶学特性的研究 | 第56-64页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第56页 |
| ·主要试剂的配制 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-59页 |
| ·重组木聚糖酶的蛋白含量及比活测定 | 第57-58页 |
| ·重组木聚糖酶的米氏常数的测定 | 第58页 |
| ·重组木聚糖酶的最适温度及其温度稳定性的测量 | 第58页 |
| ·重组木聚糖酶的最适pH及其pH稳定性的测量 | 第58-59页 |
| ·金属离子及部分化合物对重组木聚糖酶酶学活性的影响 | 第59页 |
| ·结果分析 | 第59-63页 |
| ·重组木聚糖酶的蛋白含量及比活 | 第59页 |
| ·重组木聚糖酶米氏常数 | 第59-60页 |
| ·重组木聚糖酶的最适温度及温度稳定性 | 第60-61页 |
| ·重组木聚糖酶的最适pH和pH稳定性 | 第61-62页 |
| ·重组木聚糖酶的金属离子耐受力 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| 第五章 总结与展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |