摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
第一部分 天然免疫系统在甲型H1N1流感死亡病例中的作用及相关机制研究 | 第14-48页 |
1. 引言 | 第14-16页 |
2. 实验材料及方法 | 第16-31页 |
·实验材料 | 第16-17页 |
·研究对象 | 第16页 |
·实验用主要试剂 | 第16-17页 |
·主要仪器设备 | 第17页 |
·研究设计 | 第17-18页 |
·实验方法 | 第18-31页 |
·病例肺组织处理和病毒及细菌等病原体检测 | 第19-24页 |
·定量RT-PCR检测 | 第24-27页 |
·免疫组织化学染色 | 第27-30页 |
·细胞因子/趋化因子免疫组化染色特异性验证 | 第30页 |
·组织细胞凋亡染色 | 第30-31页 |
·统计学分析 | 第31页 |
3. 研究结果 | 第31-42页 |
·病例人口学特征 | 第31-32页 |
·不同病程肺组织病毒载量 | 第32-33页 |
·肺组织细胞因子/趋化因子水平 | 第33-35页 |
·病毒载量与细胞因子/趋化因子mRNA水平相关性 | 第35-36页 |
·细胞因子/趋化因子免疫组化阳性对照制备 | 第36-37页 |
·肺组织细胞因子/趋化因子分布 | 第37-39页 |
·肺组织凋亡和与凋亡相关Caspase-3表达分布 | 第39-41页 |
·凋亡相关基因mRNA水平 | 第41-42页 |
4. 讨论 | 第42-48页 |
第二部分 奥司他韦对甲型H1N1流感死亡病例的影响及初步机制研究 | 第48-72页 |
1. 引言 | 第48-49页 |
2. 材料与方法 | 第49-58页 |
·研究设计 | 第49-50页 |
·实验材料 | 第50-51页 |
·实验用主要试剂 | 第50-51页 |
·细胞及病毒 | 第51页 |
·主要仪器设备 | 第51页 |
·实验方法 | 第51-58页 |
·病毒的繁殖 | 第52页 |
·病毒滴度滴定 | 第52-53页 |
·病毒血凝滴度滴定 | 第52页 |
·病毒TCID50滴定 | 第52-53页 |
·病毒感染实验 | 第53-54页 |
·细胞凋亡的检测 | 第54页 |
·TUNEL检测凋亡 | 第54页 |
·THP-1悬浮细胞凋亡检测 | 第54页 |
·感染细胞中病毒载量检测 | 第54-57页 |
·病毒感染细胞RNA提取 | 第54-55页 |
·体外转录B2-MG RNA制备 | 第55-56页 |
·定量RT-PCR检测病毒载量 | 第56-57页 |
·感染细胞上清病毒TCID50滴定 | 第57页 |
·流式蛋白定量技术(CBA)检测细胞因子 | 第57-58页 |
·标准品的制备 | 第57页 |
·捕获磁珠(CaptureBeads)的准备 | 第57-58页 |
·检测磁珠(DetectionBeads)的准备 | 第58页 |
·洗涤及流式细胞仪检测 | 第58页 |
·统计学方法 | 第58页 |
3. 实验结果 | 第58-68页 |
·奥司他韦治疗组和无抗病毒药物治疗组2009 pdmH1N1感染死亡病例特征 | 第58-59页 |
·奥司他韦的应用与死亡病例肺组织中的病毒载量相关性 | 第59-60页 |
·奥司他韦的应用与死亡病例肺组织中的细胞因子水平相关性 | 第60-61页 |
·奥司他韦的应用与死亡病例肺组织中的凋亡相关基因表达水平 | 第61-62页 |
·H1N1流感病毒感染THP-1和A-549细胞复制动力学比较 | 第62-63页 |
·奥司他韦抑制病毒的进入和释放 | 第63-65页 |
·奥司他韦增强细胞凋亡 | 第65-67页 |
·奥司他韦对感染细胞细胞因子水平影响 | 第67-68页 |
4. 讨论 | 第68-72页 |
参考文献 | 第72-86页 |
综述 | 第86-100页 |
参考文献 | 第93-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
博士生期间科研成果 | 第101-104页 |
发表论文清单 | 第101-103页 |
参与国际会议的报告及获奖情况 | 第103-104页 |
英文缩略词对照表 | 第104-106页 |
附录 | 第106-113页 |