摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-24页 |
·Env 介导的 HIV-1―细胞膜融合机制 | 第10-11页 |
·HIV-1 gp41 结构 | 第11-14页 |
·细胞外功能区 | 第11-13页 |
·跨膜区(Transmembrane domain,TM) | 第13页 |
·细胞质区(Cytoplasm domain,CP) | 第13-14页 |
·HIV-1 融合抑制剂的发展 | 第14-17页 |
·晶体结构及小分子融合抑制剂的发展 | 第14页 |
·多肽类融合抑制剂的发展 | 第14-17页 |
·HIV-1 融合抑制剂活性评价和筛选方法 | 第17-22页 |
·抗 HIV-1 细胞-细胞融合测试 | 第17-22页 |
·荧光共振能转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET)测试方法 | 第22页 |
·本课题研究内容及选题意义 | 第22-24页 |
第二章 基于荧光素酶报告基因的细胞-细胞融合测试 | 第24-51页 |
·实验材料和方法 | 第24-28页 |
·细胞培养及活性检测材料 | 第24页 |
·细胞-细胞融合常规测试方法 | 第24-25页 |
·Temperature-arrested State Prime Wash Assays 实验方法 | 第25页 |
·无 FBS 存在条件下的活性测试方法 | 第25-26页 |
·测试样品的配制 | 第26页 |
·活性数据处理 | 第26-27页 |
·多肽合成 | 第27-28页 |
·多肽纯化的方法 | 第28页 |
·多肽溶液浓度的测定 | 第28页 |
·荧光素酶细胞-细胞融合原理 | 第28-29页 |
·荧光素酶细胞-细胞融合测试的优化 | 第29-41页 |
·阴性对照的选取 | 第29-30页 |
·细胞浓度对化学发光信号的影响 | 第30-31页 |
·DMSO 对化学发光信号的影响 | 第31-32页 |
·FBS 对小分子活性测定的影响 | 第32-34页 |
·细胞铺板顺序对化学发光信号的影响 | 第34-35页 |
·细胞代数对化学发光信号的影响 | 第35-37页 |
·细胞融合的动力学研究 | 第37-39页 |
·活性数据评价 | 第39-41页 |
·HIV-1 融合抑制剂的细胞-细胞活性筛选 | 第41-49页 |
·螺旋稳定性多肽的活性研究 | 第43-45页 |
·FRET 工具肽的活性研究 | 第45-46页 |
·共价型多肽融合抑制剂的活性研究 | 第46-48页 |
·表面活性剂的活性研究 | 第48-49页 |
·本章结论 | 第49-51页 |
第三章 荧光共振能转移(FRET)测试方法 | 第51-69页 |
·实验材料和方法 | 第51-56页 |
·实验材料 | 第51页 |
·靶点多肽合成 | 第51页 |
·BPY 与靶点肽 N 端的连接 | 第51-52页 |
·探针的合成 | 第52-53页 |
·连有 BPY 的靶点肽与探针标记的探针肽的纯化 | 第53-54页 |
·多肽溶液浓度的测定 | 第54-55页 |
·FRET 工具肽及测试样品的配制 | 第55页 |
·圆二色光谱的测定 | 第55-56页 |
·FRET 测试方法 | 第56页 |
·FRET 测试原理 | 第56-57页 |
·FRET 工具肽的研究 | 第57-63页 |
·FRET 工具肽圆二色性研究 | 第58-60页 |
·FRET 工具肽的结合强度研究 | 第60-63页 |
·FRET 测试 | 第63-67页 |
·本章结论 | 第67-69页 |
第四章 结论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |