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以HIV-1 gp41为靶点的融合抑制剂活性评价和筛选方法研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第一章 文献综述第9-24页
   ·Env 介导的 HIV-1―细胞膜融合机制第10-11页
   ·HIV-1 gp41 结构第11-14页
     ·细胞外功能区第11-13页
     ·跨膜区(Transmembrane domain,TM)第13页
     ·细胞质区(Cytoplasm domain,CP)第13-14页
   ·HIV-1 融合抑制剂的发展第14-17页
     ·晶体结构及小分子融合抑制剂的发展第14页
     ·多肽类融合抑制剂的发展第14-17页
   ·HIV-1 融合抑制剂活性评价和筛选方法第17-22页
     ·抗 HIV-1 细胞-细胞融合测试第17-22页
     ·荧光共振能转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET)测试方法第22页
   ·本课题研究内容及选题意义第22-24页
第二章 基于荧光素酶报告基因的细胞-细胞融合测试第24-51页
   ·实验材料和方法第24-28页
     ·细胞培养及活性检测材料第24页
     ·细胞-细胞融合常规测试方法第24-25页
     ·Temperature-arrested State Prime Wash Assays 实验方法第25页
     ·无 FBS 存在条件下的活性测试方法第25-26页
     ·测试样品的配制第26页
     ·活性数据处理第26-27页
     ·多肽合成第27-28页
     ·多肽纯化的方法第28页
     ·多肽溶液浓度的测定第28页
   ·荧光素酶细胞-细胞融合原理第28-29页
   ·荧光素酶细胞-细胞融合测试的优化第29-41页
     ·阴性对照的选取第29-30页
     ·细胞浓度对化学发光信号的影响第30-31页
     ·DMSO 对化学发光信号的影响第31-32页
     ·FBS 对小分子活性测定的影响第32-34页
     ·细胞铺板顺序对化学发光信号的影响第34-35页
     ·细胞代数对化学发光信号的影响第35-37页
     ·细胞融合的动力学研究第37-39页
     ·活性数据评价第39-41页
   ·HIV-1 融合抑制剂的细胞-细胞活性筛选第41-49页
     ·螺旋稳定性多肽的活性研究第43-45页
     ·FRET 工具肽的活性研究第45-46页
     ·共价型多肽融合抑制剂的活性研究第46-48页
     ·表面活性剂的活性研究第48-49页
   ·本章结论第49-51页
第三章 荧光共振能转移(FRET)测试方法第51-69页
   ·实验材料和方法第51-56页
     ·实验材料第51页
     ·靶点多肽合成第51页
     ·BPY 与靶点肽 N 端的连接第51-52页
     ·探针的合成第52-53页
     ·连有 BPY 的靶点肽与探针标记的探针肽的纯化第53-54页
     ·多肽溶液浓度的测定第54-55页
     ·FRET 工具肽及测试样品的配制第55页
     ·圆二色光谱的测定第55-56页
     ·FRET 测试方法第56页
   ·FRET 测试原理第56-57页
   ·FRET 工具肽的研究第57-63页
     ·FRET 工具肽圆二色性研究第58-60页
     ·FRET 工具肽的结合强度研究第60-63页
   ·FRET 测试第63-67页
   ·本章结论第67-69页
第四章 结论第69-71页
参考文献第71-77页
发表论文和参加科研情况说明第77-78页
致谢第78页

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