英文缩写 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
前言 | 第9-13页 |
第一部分 爪蟾视神经损伤后hnRNP K表达变化的研究 | 第13-20页 |
材料和方法 | 第14-16页 |
1. 实验动物 | 第14页 |
2. 主要仪器和试剂 | 第14页 |
3. 实验方法 | 第14-16页 |
·爪蟾视神经压榨伤模型的建立 | 第15页 |
·动物灌注固定 | 第15页 |
·冰冻组织切片的制备 | 第15页 |
·间接免疫荧光组织化学染色 | 第15-16页 |
·图像分析和数据统计 | 第16页 |
结果 | 第16-19页 |
1. hnRNP K在爪蟾视神经损伤后RGCs中的表达及分布 | 第16-18页 |
2. hnRNP K在RGCs中分布变化的定量分析 | 第18-19页 |
讨论 | 第19-20页 |
第二部分 VMO在体抑制hnRNP K表达动物模型的建立 | 第20-28页 |
材料和方法 | 第20-22页 |
1. 实验动物 | 第20页 |
2. 主要仪器和试剂 | 第20-21页 |
3. 实验方法 | 第21-22页 |
·VMO的玻璃体内注射 | 第21-22页 |
·冰冻切片的制备 | 第22页 |
·免疫荧光组织化学染色 | 第22页 |
·图像获取 | 第22页 |
·细胞计数 | 第22页 |
·胞免疫荧光定量分析 | 第22页 |
结果 | 第22-26页 |
1. 注射VMO后,用于统计分析的hnRNP K阳性细胞数 | 第22-23页 |
2. 玻璃体内注射VMO对RGCs中hnRNP K的抑制作用 | 第23页 |
3. 重复注射VMO对RGCs中hnRNP K表达具有持续抑制作用 | 第23-24页 |
4. VMO对RGCs中hnRNP K表达的特异性抑制作用 | 第24-25页 |
5. VMO对RGCs的死亡、视神经损伤和退化的影响 | 第25-26页 |
讨论 | 第26-28页 |
第三部分 hnRNP K对爪蟾受损视神经轴突再生的作用及其作用的靶mRNA | 第28-40页 |
材料和方法 | 第28-31页 |
1. 实验动物 | 第28-29页 |
2. 主要仪器和试剂 | 第29页 |
3. 实验方法 | 第29-31页 |
·玻璃体内注射VMO以抑制RGCs中hnRNP K的表达 | 第29-30页 |
·脊髓横断伤造模 | 第30页 |
·冰冻切片的制备 | 第30页 |
·免疫荧光组织化学染色 | 第30页 |
·轴突标记 | 第30页 |
·轴突追踪 | 第30页 |
·核酸原位杂交方法 | 第30页 |
·轴突再生基因在胞核和胞质中mRNA的分布 | 第30-31页 |
·细胞质内多聚核糖体分析(polysomal profiling) | 第31页 |
4. 图像分析和数据统计(方法同前) | 第31页 |
结果 | 第31-37页 |
1. 在RGCs中抑制hnRNP K的表达则抑制了视神经轴突的再生 | 第31-33页 |
2. hnRNP K的表达抑制,没有引起再生过程中RGCs和视神经的异常退行性改变 | 第33-35页 |
3. 在轴突再生过程中,抑制了hnRNP K的表达可引起与之相结合、与细胞骨架相关的转录子的核输出和翻译障碍 | 第35-37页 |
讨论 | 第37-40页 |
全文小结 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-46页 |
综述 | 第46-61页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
附录 | 第62-63页 |