摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
缩写词简表 | 第10-13页 |
第一章 前言 | 第13-16页 |
技术路线 | 第16-17页 |
第二章 实验材料与方法 | 第17-32页 |
·材料 | 第17-23页 |
·细胞系 | 第17页 |
·菌株和质粒 | 第17页 |
·试剂 | 第17-22页 |
·相关细胞培养试剂 | 第22页 |
·引物 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-32页 |
·Real-time PCR | 第23-26页 |
·miR-126的功能研究 | 第26-27页 |
·miR-126潜在靶基因CXCR4的生物信息学分析情况 | 第27-28页 |
·构建荧光素酶报告质粒 | 第28-30页 |
·Western-blotting检测靶基因的表达 | 第30-31页 |
·统计学软件及分析 | 第31-32页 |
第三章 结果 | 第32-51页 |
第一部分 miR-126在HT-29、SW480、SW620三株细胞系及癌旁正常结肠粘膜组织中的表达情况 | 第32-34页 |
·细胞及组织RNA样品质检 | 第32页 |
·miR-126的q-PCR扩增曲线及溶解曲线 | 第32-33页 |
·miR-126在不同结肠癌细胞系及癌旁远端结肠粘膜的表达情况 | 第33-34页 |
第二部分 miR-126在结肠癌细胞系中的细胞生物学功能研究 | 第34-43页 |
·MTT实验检测miR-126对HT-29细胞生长活力的影响 | 第34-36页 |
·划痕实验检测miR-126对SW480细胞迁移能力的影响 | 第36-38页 |
·Transwell小室法检测miR-126对SW620细胞迁移能力的影响 | 第38-40页 |
·Transwell小室法检测miR-126对SW480、SW620细胞侵袭的影响 | 第40-43页 |
第三部分 miR-126的生物信息学分析及其下游靶基因的鉴定 | 第43-51页 |
·生物信息学分析miR-126的基本信息 | 第43-46页 |
·荧光素酶报告系统分析miR-126负调控的靶基因CXCR4 | 第46-50页 |
·Wesetrn-blotting分析验证miR-126调控的靶基因CXCR4 | 第50-51页 |
第四章 讨论 | 第51-58页 |
第一部分 Real-time PCR检测HT-29、SW480、SW620三株细胞系及癌旁远端结肠粘膜组织中microRNA-126的表达情况 | 第52-53页 |
第二部分 miR-126在结肠癌细胞系中的细胞生物学功能研究 | 第53-55页 |
第三部分 miR-126的生物信息学分析及其下游靶基因的预测与实验验证 | 第55-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
综述 | 第65-77页 |
参考文献 | 第71-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第78页 |