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结直肠癌中miR-126的转移抑制功能研究及其靶基因的鉴定

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
缩写词简表第10-13页
第一章 前言第13-16页
技术路线第16-17页
第二章 实验材料与方法第17-32页
   ·材料第17-23页
     ·细胞系第17页
     ·菌株和质粒第17页
     ·试剂第17-22页
     ·相关细胞培养试剂第22页
     ·引物第22页
     ·主要仪器第22-23页
   ·方法第23-32页
     ·Real-time PCR第23-26页
     ·miR-126的功能研究第26-27页
     ·miR-126潜在靶基因CXCR4的生物信息学分析情况第27-28页
     ·构建荧光素酶报告质粒第28-30页
     ·Western-blotting检测靶基因的表达第30-31页
     ·统计学软件及分析第31-32页
第三章 结果第32-51页
 第一部分 miR-126在HT-29、SW480、SW620三株细胞系及癌旁正常结肠粘膜组织中的表达情况第32-34页
     ·细胞及组织RNA样品质检第32页
     ·miR-126的q-PCR扩增曲线及溶解曲线第32-33页
     ·miR-126在不同结肠癌细胞系及癌旁远端结肠粘膜的表达情况第33-34页
 第二部分 miR-126在结肠癌细胞系中的细胞生物学功能研究第34-43页
     ·MTT实验检测miR-126对HT-29细胞生长活力的影响第34-36页
     ·划痕实验检测miR-126对SW480细胞迁移能力的影响第36-38页
     ·Transwell小室法检测miR-126对SW620细胞迁移能力的影响第38-40页
     ·Transwell小室法检测miR-126对SW480、SW620细胞侵袭的影响第40-43页
 第三部分 miR-126的生物信息学分析及其下游靶基因的鉴定第43-51页
     ·生物信息学分析miR-126的基本信息第43-46页
     ·荧光素酶报告系统分析miR-126负调控的靶基因CXCR4第46-50页
     ·Wesetrn-blotting分析验证miR-126调控的靶基因CXCR4第50-51页
第四章 讨论第51-58页
 第一部分 Real-time PCR检测HT-29、SW480、SW620三株细胞系及癌旁远端结肠粘膜组织中microRNA-126的表达情况第52-53页
 第二部分 miR-126在结肠癌细胞系中的细胞生物学功能研究第53-55页
 第三部分 miR-126的生物信息学分析及其下游靶基因的预测与实验验证第55-58页
结论第58-59页
参考文献第59-65页
综述第65-77页
 参考文献第71-77页
致谢第77-78页
攻读学位期间主要的研究成果第78页

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