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细胞骨架介导的RhoA活性在宫颈癌细胞增殖和凋亡过程中的作用及其机制研究

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
目录第9-12页
引言第12-14页
1 RhoA/ROCK 信号通路在紫杉醇诱导宫颈癌细胞周期阻滞中的作用第14-26页
   ·材料和方法第14页
     ·细胞第14页
     ·耗材第14页
   ·实验仪器第14-15页
   ·主要试剂及配置第15-18页
     ·主要试剂第15-16页
     ·配制溶液第16-18页
   ·实验方法第18-19页
     ·C33A 细胞培养和传代第18页
     ·细胞冻存第18页
     ·细胞复苏第18页
     ·MTT 实验第18页
     ·流式细胞术检测细胞周期第18-19页
     ·流式细胞仪检测 RhoA 蛋白表达第19页
     ·Western bloting 检测 ROCKI、cyclins 和 CDKs 的表达第19页
     ·统计学分析第19页
   ·结果第19-23页
     ·Taxol 对 C33A 细胞生长的影响第19-20页
     ·Taxol 对 C33A 细胞周期的影响第20-21页
     ·Taxol 对 C33A 细胞中 RhoA/ROCKI 蛋白表达的影响第21页
     ·抑制 RhoA 信号通路对 taxol 诱导的 C33A 细胞 G2/M 期阻滞的影响第21-22页
     ·抑制 RhoA 信号通路对 taxol 诱导的 C33A 细胞周期蛋白表达的影响第22-23页
   ·讨论第23-25页
   ·结论第25-26页
2 RhoA、细胞骨架和细胞周期在紫杉醇抑制宫颈癌发展中的关系及其机制第26-44页
   ·材料和方法第26页
     ·细胞第26页
     ·耗材第26页
   ·实验仪器和设备第26页
   ·主要试剂及药品配制第26-27页
     ·主要试剂第26-27页
     ·药品配制第27页
   ·实验方法第27-31页
     ·细胞培养、冻存与复苏第27页
     ·MTT 实验第27-28页
     ·流式细胞术检测细胞周期和 RhoA 蛋白表达第28页
     ·免疫荧光染色观察 MFMT 纤维排列方式第28页
     ·RhoAT19N 突变质粒构建第28-30页
     ·将重组载体导入到宿主细胞与筛选第30页
     ·质粒 DNA 的提取第30页
     ·PCI neo/RhoA 突变重组质粒构建第30-31页
     ·含 RhoA 突变 N19RhoA 基因的质粒转染细胞第31页
   ·Western bloting 检测蛋白表达实验第31-32页
   ·统计方法第32页
   ·结果第32-41页
     ·点突变构建携带 RhoA 突变体 RhoAT19N 的重组质粒第32-33页
     ·Taxol 对细胞活力、细胞周期和 RhoA 蛋白表达的影响第33-34页
     ·Taxol 对 MF、MT 纤维排列和细胞凋亡的影响第34-35页
     ·MT 解聚剂对 CasKi 细胞中细胞骨架纤维排列、细胞周期、凋亡和 RhoA蛋白的影响第35-37页
     ·MF 解聚剂对 CasKi 细胞中细胞骨架纤维排列、细胞周期、凋亡和 RhoA蛋白的影响第37-39页
     ·RhoA 活性对 CasKi 细胞中细胞骨架纤维排列、G2/M 期阻滞和凋亡的影响第39-41页
   ·讨论第41-43页
   ·结论第43-44页
3 全文总结第44-46页
参考文献第46-51页
附录A 缩略词第51-52页
附录B 综述第52-63页
 参考文献第58-63页
在学研究成果第63-64页
致谢第64页

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