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陆地棉中NAC家族与叶片衰老和胁迫应答相关功能的遗传学分析

摘要第1-8页
Abstract第8-16页
CHAPTER Ⅰ Introduction第16-25页
   ·NAC family第16-18页
     ·General information of NAC family第16-17页
     ·Role of NAC family genes in plant第17-18页
   ·Leaf senescence第18-19页
   ·Leaf senescence as programmed cell death第19-20页
   ·Analysis and regulation of leaf senescence第20-22页
     ·Genetic analysis of leaf senescence第20页
     ·Molecular approaches for leaf senescence第20-21页
     ·Molecular genetic regulation of leaf senescence第21-22页
     ·Onset of leaf senescence第22页
   ·Environmental factors and hormones regulating leaf senescence第22-24页
     ·Environmental factors regulating leaf senescence第22-23页
     ·Phytohormones pathways in leaf senescence第23-24页
   ·NAC family and leaf senescence第24页
   ·Research objectives第24-25页
CHAPTER Ⅱ Characterization of GhNAC8-Gh2NAC17 genes for leaf senescence andresponses to stresses第25-46页
   ·Materials and Methods第25-28页
     ·Plant material,growth conditions,and stress assays第25页
     ·RNA extraction,cDNA synthesis and DNA preparation第25-26页
     ·Amplification of internal conserved sequences of GhNACs第26页
     ·Sequence analysis第26页
     ·Isolation of GhNAC promoters by genome walking method第26页
     ·Quantitative RT-PCR assays第26-27页
     ·Chlorophyll measurement第27页
     ·Subcellular localization第27-28页
     ·GhNAC8 and GhNAC9 plasmid construction and transgenic lines第28页
     ·Statistical analysis第28页
   ·Results第28-41页
     ·Cloning of GhNAC transcription factor genes from upland cotton第28-29页
     ·Sequence analysis of the deduced GhNAC proteins第29-30页
     ·Phylogenic analysis of GhNACs at the protein level第30-32页
     ·Expression analysis of GhNACs in different organs第32-33页
     ·Morphological and chlorophyll response during natural and induced leaf senescence第33-34页
     ·Expression of GhNACs genes during induced leaf senescence in cotton第34-35页
     ·Expression of GhNACs genes during natural leaf senescence in cotton第35页
     ·Expression of GhNACs genes under abiotic stresses第35-37页
     ·Hormones treatments on the expression of GhNACs genes第37-38页
     ·Study of partial putative cis-acting elements of GhNACs gene第38页
     ·Nuclear localization of GhNAC9 and GhNAC10 proteins第38-39页
     ·Ectopic expression of GhNAC8 and GhNAC9 in Arabidopsis第39-41页
     ·Summary of GhNAC18-GhNAC17 genes results第41页
   ·Discussion第41-46页
CHAPTER Ⅲ Expression analysis of NAC family gene(GhNAC18-77)for multipleabiotic stresses in cotton第46-67页
   ·Materials and Methods第46-47页
     ·Database search and sequence retrieval第46页
     ·Phylogenetic analysis第46页
     ·Chromosome location第46页
     ·Plant growth and stress assays第46-47页
     ·RNA extraction and cDNA synthesis第47页
     ·Amplification of internal conserved sequences of GhNACs第47页
     ·Quantitative RT-PCR assays第47页
   ·Results第47-63页
     ·Identification of NAC gene family in Gossypium hirsutum L第47-48页
     ·Phylogenetic analysis of GhNAC genes第48-51页
     ·Chromosome location of GhNAC genes第51-52页
     ·Motifs and phylogenetic tree of GhNAC genes第52-54页
     ·Expression profile of GhNACs in different organs第54-55页
     ·Morphological and chlorophyll response during natural leaf senescence and GhNAC genes expression第55-57页
     ·GhNAC genes expression by exogenous application of phytohormones第57-60页
     ·GhNAC genes expression under drought and salt stresses第60-63页
     ·Expression profile of GhNAC in developing fibre第63页
   ·Discussion第63-67页
CHAPTER Ⅳ GhNAC7,a novel cotton NAC family transcription factor gene has animportant role in leaf senescence第67-81页
   ·Materials and Methods第67-70页
     ·Plant material,growth conditions,and stress assays第67页
     ·RNA extraction,cDNA synthesis and DNA preparation第67页
     ·GhNAC7 gene amplification and sequence analysis第67页
     ·Isolation of GhNAC7 promoter第67页
     ·Quantitative RT-PCR assays第67页
     ·Chlorophyll measurement第67页
     ·Subcellular localization of GhNAC7第67-68页
     ·Constructs of plasmid and transformation of Arabidopsis第68页
     ·Transformation of Arabidopsis第68-69页
     ·Histochemical GUS staining第69页
     ·Transformation of tobacco第69页
     ·Transformation of cotton(Gossypium hirsutum L.)第69-70页
     ·In-vitro binding protein assay and SDS-PAGE gel electrophoresis第70页
     ·Chromatin immunoprecipitation(ChIP)assay第70页
     ·Statistical analysis第70页
   ·Results第70-79页
     ·GhNAC7 gene in Gossypium hirsutum L第70-71页
     ·Nuclear localization of GFP-GhNAC7 protein第71页
     ·Expression pattern of GhNAC7 in upland cotton第71-72页
     ·Expression of GhNAC7 during abiotic stresses第72-73页
     ·Phenotypes of GhNAC7overexpression in Arabidopsis第73-74页
     ·Expression pattern of GhNAC7 conferred by their promoter第74-75页
     ·GhNAC7overexpression in tobacco第75-76页
     ·Overexpression transgenic lines of GhNAC7 in Gossypium hirsutum L第76-77页
     ·The pGhNAC7 has positive interaction with GhNAC7 protein第77-78页
     ·In vitro DNA/protein-binding assay and immunoblot analysis第78-79页
   ·Discussion第79-81页
CONCLUSION第81-82页
REFERENCES第82-91页
SUPPLEMENTARY DATA第91-114页
ACKNOWLEDGEMENTS第114-115页
CURRICULUM VITAE第115页

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