摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
縮略词表 | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-23页 |
·玉米纹枯病的研究进展 | 第13-17页 |
·玉米纹枯病病原菌 | 第13-14页 |
·玉米纹枯病病原菌致病机制 | 第14-15页 |
·玉米纹枯病的抗性机制及抗性种质资源的筛选 | 第15-17页 |
·植物与病原菌的互作 | 第17-20页 |
·植物对病原菌免疫机制简介 | 第17页 |
·植物病原菌蛋白质效应子 | 第17-20页 |
·酵母双杂交系统及其在研究病原物与寄主互作中的作用 | 第20-22页 |
·酵母双杂交系统 | 第20-21页 |
·酵母双杂交技术筛选寄主病原物互作中的应用 | 第21-22页 |
·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
2 材料及方法 | 第23-36页 |
·材料 | 第23-24页 |
·植物及病原物材料 | 第23页 |
·菌株和质粒 | 第23页 |
·酶、试剂盒及其他试剂 | 第23页 |
·引物合成及序列测定 | 第23-24页 |
·仪器 | 第24页 |
·方法 | 第24-36页 |
·纹枯病菌的培养、接种及取材 | 第24-25页 |
·“诱饵”载体pGBKT7的线性化 | 第25页 |
·玉米和纹枯病菌cDNA的合成 | 第25-29页 |
·酵母的转化及“诱饵”文库自激活的去除 | 第29-32页 |
·酵母双杂交筛选互作蛋白质 | 第32-33页 |
·互作蛋白质的鉴定及分析 | 第33-34页 |
·纹枯菌培养液SOD活性的检测 | 第34-36页 |
3 结果与分析 | 第36-58页 |
·“诱饵”载体pGBKT7的线性化 | 第36-37页 |
·玉米和纹枯病菌cDNA的合成 | 第37-39页 |
·玉米和纹枯菌总RNA的提取和检测 | 第37-38页 |
·双链cDNA的合成和检测(LD-PCR) | 第38-39页 |
·酵母的转化及“诱饵”文库自激活的去除 | 第39-43页 |
·ds cDNA转化酵母菌株Y187和Y2HGold | 第39-41页 |
·纹枯菌文库中自激活单克隆的去除 | 第41页 |
·文库重组比的鉴定 | 第41-42页 |
·文库保存及滴度检测 | 第42-43页 |
·酵母双杂交筛选互作蛋白质 | 第43-45页 |
·酵母双杂交阳性克隆的筛选 | 第43-44页 |
·杂交效率检测 | 第44页 |
·双杂交阳性克隆凝胶电泳检测 | 第44-45页 |
·阳性克隆的cDNA插入片段序列分析和功能预测 | 第45-58页 |
·cDNA插入片段序列分析 | 第45-48页 |
·cDNA插入片段功能及信号肽预测分析 | 第48-57页 |
·纹枯菌超氧化物歧化酶分泌性的检测 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-66页 |
·对于本方法的思考 | 第58-59页 |
·纹枯菌与玉米互作机制的假设 | 第59-65页 |
·展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-76页 |
附录1 酵母破菌缓冲液和沉淀缓冲液的配制 | 第76-77页 |
附录2 纹枯病菌Mating序列原始信息 | 第77-81页 |
致谢 | 第81页 |