| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| ·课题的提出 | 第11-12页 |
| ·前人研究进展 | 第12-18页 |
| ·植物单宁研究进展概述 | 第12-13页 |
| ·柿单宁组分及结构 | 第13-14页 |
| ·柿单宁细胞发育模式研究 | 第14页 |
| ·柿单宁生物合成基因研究进展 | 第14-17页 |
| ·单宁合成途径中结构基因启动子结构分析 | 第17页 |
| ·植物遗传转化 | 第17-18页 |
| ·本课题研究内容 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-39页 |
| ·实验材料 | 第20-22页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌种和质粒 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·细菌培养基 | 第22页 |
| ·植物细胞培养基 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-39页 |
| ·植物材料准备 | 第22页 |
| ·柿单宁含量测定 | 第22-23页 |
| ·柿单宁细胞大小测定 | 第23页 |
| ·DkLAC基因片段序列扩增 | 第23-27页 |
| ·DkLAC1基因3'端序列扩增 | 第27-29页 |
| ·DkLAC1基因5'端序列扩增 | 第29-32页 |
| ·DkLAC1基因全长扩增 | 第32-33页 |
| ·DkGST基因克隆 | 第33页 |
| ·DkLAC1基因启动子克隆 | 第33-34页 |
| ·实时定量PCR | 第34页 |
| ·DkLAC1转基因载体构建 | 第34-37页 |
| ·拟南芥转化 | 第37-38页 |
| ·拟南芥叶肉原生质体转化 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-58页 |
| ·柿果实发育过程中单宁含量及单宁细胞大小变化 | 第39-42页 |
| ·DkLAC1全长克隆及生物信息学分析 | 第42-47页 |
| ·果实总RNA提取及LAC基因克隆 | 第42-45页 |
| ·DkLAC1基因序列分析 | 第45-47页 |
| ·DkGST全长克隆 | 第47-48页 |
| ·柿单宁生物合成基因表达模式 | 第48-53页 |
| ·DkLAC1在柿单宁生物合成途径中的地位 | 第48页 |
| ·不同脱涩类型果实中柿单宁生物合成基因的表达模式 | 第48-50页 |
| ·DkLAC1基因在不同部位的表达分析 | 第50-51页 |
| ·不同脱涩类型果实中结构基因表达差异 | 第51-53页 |
| ·DkLAC1启动子克隆及生物信息学分析 | 第53-55页 |
| ·遗传转化分析验证DkLAC1功能 | 第55-58页 |
| ·载体构建 | 第55-56页 |
| ·遗传转化 | 第56-57页 |
| ·原生质体瞬时表达分析 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-63页 |
| ·DkLAC1基因在柿单宁生物合成途径中的功能分析 | 第58-60页 |
| ·DkLAC1蛋白序列及结构特征分析 | 第58页 |
| ·DkLAC1基因启动子区域作用元件分析 | 第58-59页 |
| ·单宁细胞发育模式和结构基因表达模式分析 | 第59-60页 |
| ·遗传转化和原生质体瞬时表达定位分析 | 第60页 |
| ·中国完全甜柿自然脱涩分子机理初步探讨 | 第60-63页 |
| ·中国完全甜柿柿单宁发育模式分析 | 第60-61页 |
| ·结构基因表达模式分析 | 第61页 |
| ·柿单宁合成相关基因在不同类型果实中转录本表达差异分析 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 附录 | 第72-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |