摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
前言 | 第12-21页 |
第一章 人脐带间充质干细胞的分离培养和鉴定 | 第21-32页 |
·引言 | 第21页 |
·实验材料 | 第21-22页 |
·实验试剂 | 第21-22页 |
·主要仪器设备和材料 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-27页 |
·主要试剂配制 | 第22-24页 |
·hUC-MSCs 的原代及传代培养 | 第24页 |
·hUC-MSCs 表面标记检测 | 第24-25页 |
·hUC-MSCs 周期检测 | 第25页 |
·hUC-MSCs 诱导多向分化潜能的检测 | 第25-26页 |
·hUC-MSCs 的冻存与复苏 | 第26-27页 |
·MTT 法检测 hUC-MSCs 的增殖活性 | 第27页 |
·统计学分析 | 第27页 |
·实验结果 | 第27-30页 |
·hUC-MSCs 倒置显微镜下观察 | 第27-28页 |
·第 3 代 hUC-MSCs 表面标志物检测 | 第28页 |
·hUC-MSCs 诱导分化潜能的检 | 第28-29页 |
·流式细胞仪检测 hUC-MSCs 周期 | 第29-30页 |
·MTT 法检测 hUC-MSCs 的增殖活性 | 第30页 |
·讨论 | 第30-31页 |
·小结 | 第31-32页 |
第二章 兔膝关节软骨细胞的分离培养和鉴定 | 第32-45页 |
·引言 | 第32页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·实验试剂 | 第32-33页 |
·主要仪器设备和材料 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-39页 |
·主要试剂配制 | 第33-34页 |
·兔膝关节软骨细胞的分离与传代培养 | 第34页 |
·hUC-MSCs 的复苏与冻存 | 第34-35页 |
·兔膝关节软骨细胞的阿利新蓝染色和甲苯胺蓝染色鉴定 | 第35页 |
·MTT 法检测兔膝关节软骨细胞的增殖活性 | 第35页 |
·兔膝关节软骨细胞 RNA 的提取、普通 PCR 和实时定量 PCR 检测 II 型胶原(COL2-A1)和 GAG mRNA 的表达 | 第35-39页 |
·统计学分析 | 第39页 |
·实验结果 | 第39-43页 |
·兔膝关节软骨细胞的镜下观察 | 第39-40页 |
·兔膝关节软骨细胞的阿利新蓝染色和甲苯胺蓝染色鉴定 | 第40-41页 |
·MTT 法检测兔膝关节软骨细胞增殖活性 | 第41页 |
·PCR 检测兔膝关节软骨细胞 GAG 和 COL2A1 mRNA 表达 | 第41-42页 |
·PCR 检测兔膝关节软骨细胞 GAG 和 COL2-A1 mRNA 表达 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·小结 | 第44-45页 |
第三章 两种共培养体系下人脐带间充质干细胞向软骨细胞分化的研究 | 第45-68页 |
·引言 | 第45-46页 |
·实验材料 | 第46-47页 |
·实验试剂 | 第46-47页 |
·主要仪器设备和材料 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-53页 |
·主要试剂配制 | 第47-49页 |
·hUC-MSCs 的分离与传代培养 | 第49-50页 |
·hUC-MSCs 表面分子标志检测 | 第50页 |
·hUC-MSCs 的多向诱导分化潜能的检测 | 第50页 |
·兔膝关节软骨细胞的分离与传代培养 | 第50页 |
·兔膝关节软骨细胞的阿利新蓝染色和甲苯胺蓝染色 | 第50页 |
·hUC-MSCs 和兔膝关节软骨细胞的共培养 | 第50-51页 |
·蛋白多糖的定性检测 | 第51页 |
·Ⅱ型胶原的定性检测 | 第51-52页 |
·蛋白多糖和Ⅱ型胶原的定量检测 | 第52页 |
·定量 PCR 检测 COL2A1、GAG mRNA 表达 | 第52-53页 |
·统计学分析 | 第53页 |
·实验结果 | 第53-65页 |
·两种共培养方式(直接共培养体系和 Transwell 共培养体系) | 第53页 |
·蛋白多糖的定性检测 | 第53-55页 |
·Ⅱ型胶原的定性检测 | 第55-57页 |
·蛋白多糖的定量检测 | 第57-59页 |
·Ⅱ型胶原的定量检测 | 第59-61页 |
·实时定量 PCR 检测蛋白多糖和Ⅱ型胶原的 mRNA 表达 | 第61-65页 |
·讨论 | 第65-67页 |
·小结 | 第67-68页 |
全文总结 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
英文缩略词 | 第77-78页 |
在学期间发表论文清单 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |