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共培养对人脐带间充质干细胞成软骨诱导分化的影响

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
前言第12-21页
第一章 人脐带间充质干细胞的分离培养和鉴定第21-32页
   ·引言第21页
   ·实验材料第21-22页
     ·实验试剂第21-22页
     ·主要仪器设备和材料第22页
   ·实验方法第22-27页
     ·主要试剂配制第22-24页
     ·hUC-MSCs 的原代及传代培养第24页
     ·hUC-MSCs 表面标记检测第24-25页
     ·hUC-MSCs 周期检测第25页
     ·hUC-MSCs 诱导多向分化潜能的检测第25-26页
     ·hUC-MSCs 的冻存与复苏第26-27页
     ·MTT 法检测 hUC-MSCs 的增殖活性第27页
     ·统计学分析第27页
   ·实验结果第27-30页
     ·hUC-MSCs 倒置显微镜下观察第27-28页
     ·第 3 代 hUC-MSCs 表面标志物检测第28页
     ·hUC-MSCs 诱导分化潜能的检第28-29页
     ·流式细胞仪检测 hUC-MSCs 周期第29-30页
     ·MTT 法检测 hUC-MSCs 的增殖活性第30页
   ·讨论第30-31页
   ·小结第31-32页
第二章 兔膝关节软骨细胞的分离培养和鉴定第32-45页
   ·引言第32页
   ·实验材料第32-33页
     ·实验试剂第32-33页
     ·主要仪器设备和材料第33页
   ·实验方法第33-39页
     ·主要试剂配制第33-34页
     ·兔膝关节软骨细胞的分离与传代培养第34页
     ·hUC-MSCs 的复苏与冻存第34-35页
     ·兔膝关节软骨细胞的阿利新蓝染色和甲苯胺蓝染色鉴定第35页
     ·MTT 法检测兔膝关节软骨细胞的增殖活性第35页
     ·兔膝关节软骨细胞 RNA 的提取、普通 PCR 和实时定量 PCR 检测 II 型胶原(COL2-A1)和 GAG mRNA 的表达第35-39页
     ·统计学分析第39页
   ·实验结果第39-43页
     ·兔膝关节软骨细胞的镜下观察第39-40页
     ·兔膝关节软骨细胞的阿利新蓝染色和甲苯胺蓝染色鉴定第40-41页
     ·MTT 法检测兔膝关节软骨细胞增殖活性第41页
     ·PCR 检测兔膝关节软骨细胞 GAG 和 COL2A1 mRNA 表达第41-42页
     ·PCR 检测兔膝关节软骨细胞 GAG 和 COL2-A1 mRNA 表达第42-43页
   ·讨论第43-44页
   ·小结第44-45页
第三章 两种共培养体系下人脐带间充质干细胞向软骨细胞分化的研究第45-68页
   ·引言第45-46页
   ·实验材料第46-47页
     ·实验试剂第46-47页
     ·主要仪器设备和材料第47页
   ·实验方法第47-53页
     ·主要试剂配制第47-49页
     ·hUC-MSCs 的分离与传代培养第49-50页
     ·hUC-MSCs 表面分子标志检测第50页
     ·hUC-MSCs 的多向诱导分化潜能的检测第50页
     ·兔膝关节软骨细胞的分离与传代培养第50页
     ·兔膝关节软骨细胞的阿利新蓝染色和甲苯胺蓝染色第50页
     ·hUC-MSCs 和兔膝关节软骨细胞的共培养第50-51页
     ·蛋白多糖的定性检测第51页
     ·Ⅱ型胶原的定性检测第51-52页
     ·蛋白多糖和Ⅱ型胶原的定量检测第52页
     ·定量 PCR 检测 COL2A1、GAG mRNA 表达第52-53页
     ·统计学分析第53页
   ·实验结果第53-65页
       ·两种共培养方式(直接共培养体系和 Transwell 共培养体系)第53页
       ·蛋白多糖的定性检测第53-55页
       ·Ⅱ型胶原的定性检测第55-57页
       ·蛋白多糖的定量检测第57-59页
     ·Ⅱ型胶原的定量检测第59-61页
     ·实时定量 PCR 检测蛋白多糖和Ⅱ型胶原的 mRNA 表达第61-65页
   ·讨论第65-67页
   ·小结第67-68页
全文总结第68-70页
参考文献第70-77页
英文缩略词第77-78页
在学期间发表论文清单第78-79页
致谢第79页

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