| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-19页 |
| ·阿特拉津和毒死蜱概述 | 第13页 |
| ·阿特拉津和毒死蜱毒理学研究 | 第13-15页 |
| ·阿特拉津毒理学研究 | 第13-14页 |
| ·毒死蜱毒理学研究 | 第14-15页 |
| ·毒物对 DNA 甲基化的影响 | 第15-17页 |
| ·DNA 甲基化概述 | 第15-16页 |
| ·农药及化学物质对 DNA 甲基化的影响 | 第16-17页 |
| ·重金属中毒对 DNA 甲基化的影响 | 第17页 |
| ·研究的目的意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-26页 |
| ·试验毒物 | 第19页 |
| ·试验鱼的驯养和暴露环境 | 第19页 |
| ·试验的设计 | 第19-21页 |
| ·暴露实验 | 第19页 |
| ·恢复实验 | 第19-21页 |
| ·样品的采集与处理 | 第21页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·主要化学与生物试剂 | 第21-22页 |
| ·主要试剂的配置 | 第22页 |
| ·组织 DNA 总甲基化水平的检测 | 第22-24页 |
| ·组织 DNA 提取 | 第22-23页 |
| ·DNA 的水解 | 第23页 |
| ·高效液相色谱条件优化 | 第23页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第23页 |
| ·回收率与精密度试验 | 第23页 |
| ·样品的 DNA 总甲基化水平高效液相色谱法检测 | 第23-24页 |
| ·鲤鱼 DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、MBD2 基因 mRNA 表达的检测 | 第24-25页 |
| ·引物设计与合成 | 第24页 |
| ·组织总 RNA 的抽提 | 第24-25页 |
| ·反转录反应 | 第25页 |
| ·实时 PCR 扩增 | 第25页 |
| ·试验数据的分析与统计 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-50页 |
| ·基因组 DNA 甲基化 HPLC 检测方法的建立 | 第26-28页 |
| ·实验条件的优化结果 | 第26页 |
| ·二元一次方程和标准曲线的建立 | 第26-27页 |
| ·精密度与回收率的测定结果 | 第27-28页 |
| ·基因组 DNA 甲基化 HPLC 检测样品结果 | 第28-36页 |
| ·基因组 DNA 提取结果 | 第28页 |
| ·样品色谱图 | 第28-29页 |
| ·样品 DNA 甲基化检测结果 | 第29-36页 |
| ·目的基因实时定量 PCR 检测方法的建立 | 第36-38页 |
| ·组织 RNA 提取结果的鉴定 | 第36-38页 |
| ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合暴露对鲤鱼组织 DNMT1、DNMT3 和 MBD2mRNA 表达影响的检测结果 | 第38-50页 |
| ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合暴露对鲤鱼肝脏组织 DNMT1、DNMT3 和 MBD2 mRNA 表达影响的检测结果 | 第38页 |
| ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合暴露对鲤鱼肾脏组织 DNMT1、DNMT3 和 MBD2 mRNA 表达影响的检测结果 | 第38-39页 |
| ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合暴露对鲤鱼鳃组织 DNMT1、DNMT3 和 MBD2 mRNA 表达影响的检测结果 | 第39页 |
| ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合暴露对鲤鱼肌肉组织 DNMT1、DNMT3 和 MBD2 mRNA 表达影响的检测结果 | 第39-40页 |
| ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合暴露对鲤鱼脑组织 DNMT1、DNMT3 和 MBD2mRNA 表达影响的检测结果 | 第40页 |
| ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合暴露对鲤鱼心脏组织 DNMT1、DNMT3 和 MBD2 mRNA 表达影响的检测结果 | 第40-41页 |
| ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合暴露对鲤鱼肠道组织 DNMT1、DNMT3 和 MBD2 mRNA 表达影响的检测结果 | 第41页 |
| ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合暴露对鲤鱼性腺组织 DNMT1、DNMT3 和 MBD2 mRNA 表达影响的检测结果 | 第41-42页 |
| 附表 | 第42-50页 |
| 4 讨论 | 第50-54页 |
| ·DNA 总甲基化水平检测方法的建立 | 第50页 |
| ·阿特拉津和毒死蜱对鲤鱼组织 DNA 总甲基化水平的影响 | 第50-52页 |
| ·阿特拉津和毒死蜱对鲤鱼组织 DNMT1、DNMT3 和 MBD2 基因 mRNA 表达的影响 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 附录 | 第63-66页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第66页 |
