侵染大蒜12种病毒CP基因的原核表达、抗血清制备及其病毒检测
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-23页 |
| 1 大蒜功能研究现状 | 第10-12页 |
| ·大蒜的主要成分 | 第10-11页 |
| ·大蒜的功效 | 第11-12页 |
| 2 大蒜病毒病的研究进展 | 第12-17页 |
| ·葱属X病毒属 | 第13-14页 |
| ·马铃薯Y病毒属 | 第14-16页 |
| ·香石竹潜隐病毒属 | 第16-17页 |
| 3 检测病毒的方法 | 第17-20页 |
| ·传统生物学方法 | 第17-18页 |
| ·电镜检测法 | 第18页 |
| ·血清学方法 | 第18-19页 |
| ·分子生物学方法 | 第19-20页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第20-23页 |
| 第二章 12种大蒜病毒CP基因的克隆 | 第23-35页 |
| 1 实验材料 | 第23-24页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·引物 | 第23-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-28页 |
| ·RNA的提取 | 第24-25页 |
| ·逆转录 | 第25页 |
| ·PCR扩增 | 第25页 |
| ·克隆 | 第25-28页 |
| ·DNA片段的切胶纯化 | 第25-26页 |
| ·克隆载体的构建 | 第26页 |
| ·感受态细胞制备 | 第26页 |
| ·转化和筛选 | 第26页 |
| ·质粒提取 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第27页 |
| ·序列测定和分析 | 第27-28页 |
| 3 实验结果 | 第28-34页 |
| ·葱属X病毒属病毒CP基因的克隆 | 第28-30页 |
| ·马铃薯Y病毒属病毒CP基因的克隆 | 第30-33页 |
| ·香石竹潜隐病毒属病毒CP基因的克隆 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 病毒CP基因的原核表达和抗血清的制备 | 第35-47页 |
| 1 实验材料 | 第35页 |
| 2 实验方法 | 第35-41页 |
| ·外源基因的原核表达 | 第35-38页 |
| ·酶切目的基因 | 第36页 |
| ·与表达载体的连接 | 第36-37页 |
| ·IPTG诱导表达 | 第37页 |
| ·SDS-PACE检测 | 第37-38页 |
| ·抗血清的制备 | 第38-41页 |
| ·目的蛋白纯化 | 第38-39页 |
| ·制备抗血清 | 第39页 |
| ·吸附除杂抗体 | 第39页 |
| ·抗血清纯度检测 | 第39-41页 |
| ·ELISA分析 | 第41页 |
| 3 结果 | 第41-45页 |
| ·葱属X病毒属病毒CP基因的原核表达 | 第41-42页 |
| ·马铃薯Y病毒属病毒CP基因的原核表达 | 第42-43页 |
| ·香石竹潜隐病毒属病毒CP基因的原核表达 | 第43-44页 |
| ·抗血清的Western blot检测 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 病叶样品病毒的检测 | 第47-56页 |
| 1 实验材料 | 第47页 |
| ·病叶样品 | 第47页 |
| ·仪器 | 第47页 |
| 2 实验方法 | 第47-48页 |
| ·Western blot | 第47页 |
| ·间接ELISA法 | 第47-48页 |
| ·Dot-ELISA法 | 第48页 |
| 3 结果 | 第48-55页 |
| ·Western blot法检测病叶 | 第48页 |
| ·间接ELISA法检测病叶 | 第48-54页 |
| ·Dot-ELISA法检测病叶 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-58页 |
| 1 主要成果和结论 | 第56页 |
| 2 研究的创新点 | 第56-57页 |
| 3 下一步要解决的问题 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第65页 |
