中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
第一章 文章综述 | 第13-28页 |
·植物抗逆的分子机制 | 第13-20页 |
·在逆境胁迫中直接发挥功能的蛋白 | 第14-16页 |
·渗透调节剂 | 第16-18页 |
·转录因子调控 | 第18-20页 |
·DREB 转录因子的研究进展 | 第20-27页 |
·AP2/ERF 转录因子家族 | 第21-22页 |
·DREB/CBF 转录因子的结构特征 | 第22-23页 |
·DREB/CBF 转录因子的生物学功能 | 第23-25页 |
·DREB/CBF 转录因子的调控机制 | 第25-26页 |
·DREB/CBF 转录因子在植物抗逆中的应用 | 第26-27页 |
·本研究的目的与意义 | 第27-28页 |
第二章 ZmDREB1B 基因的克隆及序列分析 | 第28-40页 |
·材料 | 第28-30页 |
·植物材料 | 第28页 |
·载体及菌株 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28页 |
·主要仪器设备 | 第28-29页 |
·试剂配制 | 第29-30页 |
·方法 | 第30-34页 |
·引物设计 | 第30页 |
·CTAB 法提取玉米基因组 DNA | 第30-31页 |
·ZmDREB1B 的 PCR 扩增 | 第31页 |
·PCR 产物的回收 | 第31-32页 |
·目的片段与 pMD18-T 载体连接 | 第32页 |
·大肠杆菌 DH5α热激感受态的制备 | 第32-33页 |
·热激法转化大肠杆菌 DH5α感受态细胞 | 第33页 |
·质粒提取 | 第33-34页 |
·生物信息学分析 | 第34页 |
·结果与分析 | 第34-38页 |
·基因序列的克隆 | 第34-35页 |
·序列特征分析及编码蛋白的结构和功能预测 | 第35-36页 |
·序列同源性比对及序列系统进化树分析 | 第36-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
第三章 ZmDREB1B 功能的初步分析 | 第40-61页 |
·材料 | 第40-41页 |
·植物材料 | 第40页 |
·载体及菌株 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·主要仪器设备 | 第40-41页 |
·主要试剂配制 | 第41页 |
·方法 | 第41-52页 |
·引物设计 | 第41-42页 |
·原核表达 | 第42-44页 |
·亚细胞定位 | 第44-47页 |
·酵母单杂交 | 第47-49页 |
·ZmDREB1B 基因的表达模式分析 | 第49-52页 |
·结果与分析 | 第52-58页 |
·原核表达 | 第52-54页 |
·ZmDREB1B 在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位 | 第54-55页 |
·ZmDREB1B 的转录激活活性鉴定 | 第55-56页 |
·ZmDREB1B 基因的表达模式 | 第56-58页 |
·讨论 | 第58-61页 |
第四章 ZmDREB1B 在大肠杆菌和酵母中的功能分析 | 第61-70页 |
·材料 | 第61页 |
·载体及菌株 | 第61页 |
·主要试剂 | 第61页 |
·主要仪器设备 | 第61页 |
·主要试剂配制 | 第61页 |
·方法 | 第61-65页 |
·引物设计 | 第61-62页 |
·ZmDREB1B 在原核生物大肠杆菌中的表达及分析 | 第62页 |
·ZmDREB1B 在真核生物酵母中的表达及分析 | 第62-65页 |
·结果与分析 | 第65-69页 |
·重组大肠杆菌 BL21 的逆境胁迫抗性分析 | 第65-66页 |
·重组酵母 INVSc1 的逆境胁迫抗性分析 | 第66-69页 |
·讨论 | 第69-70页 |
第五章 ZmDREB1B 在拟南芥中的过量表达及其抗逆功能分析 | 第70-87页 |
·材料 | 第70-71页 |
·植物材料 | 第70页 |
·载体及菌株 | 第70页 |
·主要试剂 | 第70页 |
·主要仪器设备 | 第70-71页 |
·主要试剂配制 | 第71页 |
·方法 | 第71-76页 |
·引物设计 | 第71-72页 |
·植物表达载体 pCHF-1301-ZmDREB1B 的构建 | 第72-73页 |
·农杆菌热激感受态细胞的制备及其转化 | 第73页 |
·野生型拟南芥的种植 | 第73-74页 |
·农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第74页 |
·转基因拟南芥的筛选及鉴定 | 第74-75页 |
·T3 代 ZmDREB1B 转基因拟南芥的抗逆功能分析 | 第75-76页 |
·结果与分析 | 第76-85页 |
·植物表达载体的构建及转化农杆菌 EHA105 | 第76-77页 |
·ZmDREB1B 转基因拟南芥植株的筛选及鉴定 | 第77-79页 |
·T3 代 ZmDREB1B 转基因拟南芥的表型特征 | 第79页 |
·T3 代 ZmDREB1B 转基因拟南芥的抗逆功能分析 | 第79-85页 |
·讨论 | 第85-87页 |
第六章 结论 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-102页 |
作者简介 | 第102-103页 |
致谢 | 第103页 |