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玉米DREB1/CBF转录因子的克隆及其抗逆功能分析

中文摘要第1-6页
Abstract第6-13页
第一章 文章综述第13-28页
   ·植物抗逆的分子机制第13-20页
     ·在逆境胁迫中直接发挥功能的蛋白第14-16页
     ·渗透调节剂第16-18页
     ·转录因子调控第18-20页
   ·DREB 转录因子的研究进展第20-27页
     ·AP2/ERF 转录因子家族第21-22页
     ·DREB/CBF 转录因子的结构特征第22-23页
     ·DREB/CBF 转录因子的生物学功能第23-25页
     ·DREB/CBF 转录因子的调控机制第25-26页
     ·DREB/CBF 转录因子在植物抗逆中的应用第26-27页
   ·本研究的目的与意义第27-28页
第二章 ZmDREB1B 基因的克隆及序列分析第28-40页
   ·材料第28-30页
     ·植物材料第28页
     ·载体及菌株第28页
     ·主要试剂第28页
     ·主要仪器设备第28-29页
     ·试剂配制第29-30页
   ·方法第30-34页
     ·引物设计第30页
     ·CTAB 法提取玉米基因组 DNA第30-31页
     ·ZmDREB1B 的 PCR 扩增第31页
     ·PCR 产物的回收第31-32页
     ·目的片段与 pMD18-T 载体连接第32页
     ·大肠杆菌 DH5α热激感受态的制备第32-33页
     ·热激法转化大肠杆菌 DH5α感受态细胞第33页
     ·质粒提取第33-34页
     ·生物信息学分析第34页
   ·结果与分析第34-38页
     ·基因序列的克隆第34-35页
     ·序列特征分析及编码蛋白的结构和功能预测第35-36页
     ·序列同源性比对及序列系统进化树分析第36-38页
   ·讨论第38-40页
第三章 ZmDREB1B 功能的初步分析第40-61页
   ·材料第40-41页
     ·植物材料第40页
     ·载体及菌株第40页
     ·主要试剂第40页
     ·主要仪器设备第40-41页
     ·主要试剂配制第41页
   ·方法第41-52页
     ·引物设计第41-42页
     ·原核表达第42-44页
     ·亚细胞定位第44-47页
     ·酵母单杂交第47-49页
     ·ZmDREB1B 基因的表达模式分析第49-52页
   ·结果与分析第52-58页
     ·原核表达第52-54页
     ·ZmDREB1B 在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位第54-55页
     ·ZmDREB1B 的转录激活活性鉴定第55-56页
     ·ZmDREB1B 基因的表达模式第56-58页
   ·讨论第58-61页
第四章 ZmDREB1B 在大肠杆菌和酵母中的功能分析第61-70页
   ·材料第61页
     ·载体及菌株第61页
     ·主要试剂第61页
     ·主要仪器设备第61页
     ·主要试剂配制第61页
   ·方法第61-65页
     ·引物设计第61-62页
     ·ZmDREB1B 在原核生物大肠杆菌中的表达及分析第62页
     ·ZmDREB1B 在真核生物酵母中的表达及分析第62-65页
   ·结果与分析第65-69页
     ·重组大肠杆菌 BL21 的逆境胁迫抗性分析第65-66页
     ·重组酵母 INVSc1 的逆境胁迫抗性分析第66-69页
   ·讨论第69-70页
第五章 ZmDREB1B 在拟南芥中的过量表达及其抗逆功能分析第70-87页
   ·材料第70-71页
     ·植物材料第70页
     ·载体及菌株第70页
     ·主要试剂第70页
     ·主要仪器设备第70-71页
     ·主要试剂配制第71页
   ·方法第71-76页
     ·引物设计第71-72页
     ·植物表达载体 pCHF-1301-ZmDREB1B 的构建第72-73页
     ·农杆菌热激感受态细胞的制备及其转化第73页
     ·野生型拟南芥的种植第73-74页
     ·农杆菌介导的拟南芥遗传转化第74页
     ·转基因拟南芥的筛选及鉴定第74-75页
     ·T3 代 ZmDREB1B 转基因拟南芥的抗逆功能分析第75-76页
   ·结果与分析第76-85页
     ·植物表达载体的构建及转化农杆菌 EHA105第76-77页
     ·ZmDREB1B 转基因拟南芥植株的筛选及鉴定第77-79页
     ·T3 代 ZmDREB1B 转基因拟南芥的表型特征第79页
     ·T3 代 ZmDREB1B 转基因拟南芥的抗逆功能分析第79-85页
   ·讨论第85-87页
第六章 结论第87-89页
参考文献第89-102页
作者简介第102-103页
致谢第103页

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