致谢 | 第4-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-20页 |
1.1 环境中铅的发展历史及污染现状 | 第11页 |
1.1.1 铅的发展历史 | 第11页 |
1.1.2 环境中铅的污染现状 | 第11页 |
1.2 铅的毒性及其作用机制 | 第11-13页 |
1.2.1 铅的神经毒性 | 第11-12页 |
1.2.2 铅的免疫毒性 | 第12页 |
1.2.3 铅致肾脏毒性 | 第12-13页 |
1.2.4 铅的血液毒性 | 第13页 |
1.2.5 铅的致癌作用 | 第13页 |
1.3 铅对动物生殖机能的影响 | 第13-15页 |
1.3.1 铅的生殖毒性 | 第13-14页 |
1.3.2 铅对卵巢的影响 | 第14页 |
1.3.3 铅对卵母细胞的影响 | 第14页 |
1.3.4 铅接触对妊娠期的危害 | 第14-15页 |
1.4 铅对生殖内分泌的影响 | 第15-16页 |
1.4.1 铅对下丘脑-垂体-卵巢轴的影响 | 第15页 |
1.4.2 铅对妊娠期生殖内分泌的影响 | 第15-16页 |
1.5 铅对哺乳动物胚胎生长发育的影响 | 第16-17页 |
1.5.1 铅对哺乳动物胚胎的毒性作用 | 第16页 |
1.5.2 铅影响早期胚胎发育的可能机理 | 第16-17页 |
1.5.3 铅对胚胎附植的影响 | 第17页 |
1.6 铅对卵巢颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁的影响 | 第17-18页 |
1.6.1 颗粒细胞对卵母细胞的作用 | 第17页 |
1.6.2 颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁的关系 | 第17-18页 |
1.7 细胞凋亡及相关基因 | 第18-19页 |
1.7.1 细胞凋亡概述 | 第18页 |
1.7.2 铅与细胞凋亡 | 第18页 |
1.7.3 凋亡基因 | 第18-19页 |
1.7.3.1 Bcl-2 基因家族 | 第18-19页 |
1.7.3.2 P53基因 | 第19页 |
1.8 本试验的目的与意义 | 第19-20页 |
2 引言 | 第20-21页 |
3 试验一醋酸铅对雌性小鼠生殖与早期胚胎发育的影响 | 第21-36页 |
3.1 试验材料 | 第21-22页 |
3.1.1 试验动物 | 第21页 |
3.1.2 主要试剂 | 第21页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第21-22页 |
3.2 试验方法 | 第22-25页 |
3.2.1 饲养管理 | 第22页 |
3.2.2 雌性小鼠醋酸铅中毒模型的建立 | 第22页 |
3.2.3 雌性小鼠同笼、超排与胚胎采集 | 第22页 |
3.2.4 雌性小鼠采血及分离血清 | 第22-23页 |
3.2.4.1 采血 | 第22页 |
3.2.4.2 雌性小鼠血清的分离 | 第22-23页 |
3.2.5 酶联免疫分析(ELISA)对小鼠激素进行测定 | 第23页 |
3.2.6 雌性小鼠体外受胎产仔 | 第23页 |
3.2.7 石蜡切片的制作 | 第23-25页 |
3.2.7.1 取材与固定 | 第23页 |
3.2.7.2 脱水、透明和浸蜡 | 第23页 |
3.2.7.3 包埋组织 | 第23-24页 |
3.2.7.4 对包埋组织进行切片 | 第24页 |
3.2.7.5 贴片和烘片 | 第24页 |
3.2.7.6 HE染色 | 第24-25页 |
3.2.7.7 封片 | 第25页 |
3.2.7.8 在光镜下计算每个卵巢切片中的各类型卵泡数量 | 第25页 |
3.2.8 电镜切片的制作 | 第25页 |
3.2.9 数据统计与分析 | 第25页 |
3.3 结果与分析 | 第25-33页 |
3.3.1 醋酸铅对雌性小鼠的一般毒性 | 第25页 |
3.3.2 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠体质量的影响 | 第25-26页 |
3.3.3 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠胚胎生长发育的影响 | 第26-28页 |
3.3.4 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠卵巢子宫的外观变化 | 第28-29页 |
3.3.5 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠子宫、卵巢病理结构的影响 | 第29-30页 |
3.3.5.1 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠卵巢、子宫显微结构的改变 | 第29页 |
3.3.5.2 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠卵巢、子宫超微结构的改变 | 第29-30页 |
3.3.6 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠卵泡发育的影响 | 第30-33页 |
3.4 讨论 | 第33-35页 |
3.4.1 醋酸铅对雌性小鼠子宫、卵巢形态结构的影响 | 第33页 |
3.4.2 醋酸铅铅对雌性小鼠早期胚胎体内发育的影响 | 第33-34页 |
3.4.3 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠血清中激素含量的影响 | 第34-35页 |
3.5 结论 | 第35-36页 |
4 试验二醋酸铅对雌性小鼠卵巢颗粒细胞凋亡基因表达的影响 | 第36-47页 |
4.1 材料与方法 | 第36-40页 |
4.1.1 试验动物及样品采集 | 第36页 |
4.1.2 主要仪器 | 第36页 |
4.1.3 主要试剂及制备 | 第36-37页 |
4.1.4 引物设计与合成 | 第37页 |
4.1.5 雌性小鼠卵巢颗粒细胞的提取 | 第37页 |
4.1.6 雌性小鼠卵巢组织总RNA的抽提 | 第37-38页 |
4.1.7 RNA浓度和质量检测 | 第38页 |
4.1.8 cDNA合成 | 第38-39页 |
4.1.9 荧光定量PCR | 第39-40页 |
4.2 结果与分析 | 第40-44页 |
4.2.1RNA质量和浓度检测 | 第40页 |
4.2.2 不同剂量醋酸铅对P53、Bax、Bcl-2 基因表达量的影响 | 第40-44页 |
4.2.2.1 不同剂量醋酸铅对P53表达量的影响 | 第41-42页 |
4.2.2.2 不同剂量醋酸铅对Bax表达量的影响 | 第42-43页 |
4.2.2.3 不同剂量的醋酸铅对Bcl-2 的表达量的影响 | 第43-44页 |
4.3 讨论 | 第44-46页 |
4.3.1 颗粒细胞对卵母细胞的作用 | 第44-45页 |
4.3.2 醋酸铅对P53、Bax、Bcl-2 基因表达量的影响 | 第45-46页 |
4.4 小结 | 第46页 |
4.5 结论 | 第46-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
ABSTRACT | 第54-55页 |