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醋酸铅对雌性小鼠生殖与胚胎发育的影响及机制研究

致谢第4-9页
摘要第9-11页
1 文献综述第11-20页
    1.1 环境中铅的发展历史及污染现状第11页
        1.1.1 铅的发展历史第11页
        1.1.2 环境中铅的污染现状第11页
    1.2 铅的毒性及其作用机制第11-13页
        1.2.1 铅的神经毒性第11-12页
        1.2.2 铅的免疫毒性第12页
        1.2.3 铅致肾脏毒性第12-13页
        1.2.4 铅的血液毒性第13页
        1.2.5 铅的致癌作用第13页
    1.3 铅对动物生殖机能的影响第13-15页
        1.3.1 铅的生殖毒性第13-14页
        1.3.2 铅对卵巢的影响第14页
        1.3.3 铅对卵母细胞的影响第14页
        1.3.4 铅接触对妊娠期的危害第14-15页
    1.4 铅对生殖内分泌的影响第15-16页
        1.4.1 铅对下丘脑-垂体-卵巢轴的影响第15页
        1.4.2 铅对妊娠期生殖内分泌的影响第15-16页
    1.5 铅对哺乳动物胚胎生长发育的影响第16-17页
        1.5.1 铅对哺乳动物胚胎的毒性作用第16页
        1.5.2 铅影响早期胚胎发育的可能机理第16-17页
        1.5.3 铅对胚胎附植的影响第17页
    1.6 铅对卵巢颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁的影响第17-18页
        1.6.1 颗粒细胞对卵母细胞的作用第17页
        1.6.2 颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁的关系第17-18页
    1.7 细胞凋亡及相关基因第18-19页
        1.7.1 细胞凋亡概述第18页
        1.7.2 铅与细胞凋亡第18页
        1.7.3 凋亡基因第18-19页
            1.7.3.1 Bcl-2 基因家族第18-19页
            1.7.3.2 P53基因第19页
    1.8 本试验的目的与意义第19-20页
2 引言第20-21页
3 试验一醋酸铅对雌性小鼠生殖与早期胚胎发育的影响第21-36页
    3.1 试验材料第21-22页
        3.1.1 试验动物第21页
        3.1.2 主要试剂第21页
        3.1.3 主要仪器设备第21-22页
    3.2 试验方法第22-25页
        3.2.1 饲养管理第22页
        3.2.2 雌性小鼠醋酸铅中毒模型的建立第22页
        3.2.3 雌性小鼠同笼、超排与胚胎采集第22页
        3.2.4 雌性小鼠采血及分离血清第22-23页
            3.2.4.1 采血第22页
            3.2.4.2 雌性小鼠血清的分离第22-23页
        3.2.5 酶联免疫分析(ELISA)对小鼠激素进行测定第23页
        3.2.6 雌性小鼠体外受胎产仔第23页
        3.2.7 石蜡切片的制作第23-25页
            3.2.7.1 取材与固定第23页
            3.2.7.2 脱水、透明和浸蜡第23页
            3.2.7.3 包埋组织第23-24页
            3.2.7.4 对包埋组织进行切片第24页
            3.2.7.5 贴片和烘片第24页
            3.2.7.6 HE染色第24-25页
            3.2.7.7 封片第25页
            3.2.7.8 在光镜下计算每个卵巢切片中的各类型卵泡数量第25页
        3.2.8 电镜切片的制作第25页
        3.2.9 数据统计与分析第25页
    3.3 结果与分析第25-33页
        3.3.1 醋酸铅对雌性小鼠的一般毒性第25页
        3.3.2 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠体质量的影响第25-26页
        3.3.3 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠胚胎生长发育的影响第26-28页
        3.3.4 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠卵巢子宫的外观变化第28-29页
        3.3.5 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠子宫、卵巢病理结构的影响第29-30页
            3.3.5.1 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠卵巢、子宫显微结构的改变第29页
            3.3.5.2 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠卵巢、子宫超微结构的改变第29-30页
        3.3.6 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠卵泡发育的影响第30-33页
    3.4 讨论第33-35页
        3.4.1 醋酸铅对雌性小鼠子宫、卵巢形态结构的影响第33页
        3.4.2 醋酸铅铅对雌性小鼠早期胚胎体内发育的影响第33-34页
        3.4.3 不同剂量醋酸铅对雌性小鼠血清中激素含量的影响第34-35页
    3.5 结论第35-36页
4 试验二醋酸铅对雌性小鼠卵巢颗粒细胞凋亡基因表达的影响第36-47页
    4.1 材料与方法第36-40页
        4.1.1 试验动物及样品采集第36页
        4.1.2 主要仪器第36页
        4.1.3 主要试剂及制备第36-37页
        4.1.4 引物设计与合成第37页
        4.1.5 雌性小鼠卵巢颗粒细胞的提取第37页
        4.1.6 雌性小鼠卵巢组织总RNA的抽提第37-38页
        4.1.7 RNA浓度和质量检测第38页
        4.1.8 cDNA合成第38-39页
        4.1.9 荧光定量PCR第39-40页
    4.2 结果与分析第40-44页
        4.2.1RNA质量和浓度检测第40页
        4.2.2 不同剂量醋酸铅对P53、Bax、Bcl-2 基因表达量的影响第40-44页
            4.2.2.1 不同剂量醋酸铅对P53表达量的影响第41-42页
            4.2.2.2 不同剂量醋酸铅对Bax表达量的影响第42-43页
            4.2.2.3 不同剂量的醋酸铅对Bcl-2 的表达量的影响第43-44页
    4.3 讨论第44-46页
        4.3.1 颗粒细胞对卵母细胞的作用第44-45页
        4.3.2 醋酸铅对P53、Bax、Bcl-2 基因表达量的影响第45-46页
    4.4 小结第46页
    4.5 结论第46-47页
5 结论第47-48页
参考文献第48-54页
ABSTRACT第54-55页

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