| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-23页 |
| ·玉米干旱胁迫下的研究现状 | 第12-13页 |
| ·海藻糖抗逆功能的研究状况 | 第13-18页 |
| ·海藻糖的来源分布及其理化性质 | 第13-14页 |
| ·海藻糖的抗逆分子机理 | 第14-15页 |
| ·海藻糖的代谢途径 | 第15-18页 |
| ·海藻糖酶基因家族及其性质 | 第18-21页 |
| ·海藻糖酶的来源及其存在形式 | 第18页 |
| ·海藻糖酶基因家族及其调控机制 | 第18-20页 |
| ·海藻糖酶的酶学特性 | 第20-21页 |
| ·RNA干扰作用机制及其在植物转基因中的应用 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-45页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·工程菌、质粒和引物 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·胚性愈伤组织培养基 | 第24页 |
| ·细菌培养基 | 第24页 |
| ·抗生素和激素 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-45页 |
| ·海藻糖水解酶(Treh)基因部分片段的克隆 | 第25-27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·DNA片段的连接与转化 | 第28-29页 |
| ·E.coli质粒的提取(试剂盒法) | 第29-30页 |
| ·植物表达载体pTF101.1的改造 | 第30-35页 |
| ·含反向重复转基因植物表达载体的构建 | 第35-39页 |
| ·愈伤组织的诱导,筛选和基因转化 | 第39-41页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选、分化与炼苗 | 第41-42页 |
| ·转基因植株的分子生物学检测 | 第42-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-56页 |
| ·玉米海藻糖水解酶基因片段W和J | 第45-47页 |
| ·克隆载体的PCR检测与酶切验证 | 第47-49页 |
| ·植物表达载体的酶切验证 | 第49页 |
| ·T_0代抗性愈伤率、再生率和转化率 | 第49-51页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第51-55页 |
| ·T_0代转基因植株PCR检测 | 第51-52页 |
| ·T_1代转基因植株PCR检测 | 第52-53页 |
| ·T_1代转基因植株的Southern杂交检测 | 第53页 |
| ·T_1代转基因植株的定量RT-PCR检测 | 第53-55页 |
| ·T_0和T_1代阳性转基因植株收到的种子及发芽率 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| ·RNAi技术在植物功能基因研究中的应用 | 第56页 |
| ·受体材料对转基因结果的影响 | 第56-57页 |
| ·反向重复干扰片段W和J诱导基因沉默效果 | 第57页 |
| ·海藻糖酶的研究展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65页 |