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三个意蜂种群MRJP1基因多态、基因表达和含量的相关性分析

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-14页
第一章 文献综述第14-31页
 1. 蜂王浆及其新鲜度指标第14-18页
   ·蜂王浆的作用第14-15页
   ·蜂王浆的组成第15页
   ·蜂王浆新鲜度指标的研究进展第15-18页
     ·王浆酸第15-16页
     ·王浆肌动蛋白第16-17页
     ·超氧化物歧化酶活力(SOD)第17页
     ·葡萄糖氧化酶(GOD)第17页
     ·水溶性蛋白第17-18页
 2. 王浆主要蛋白的研究进展第18-21页
   ·MRJPs 的序列研究进展第19-20页
   ·MRJP1 的研究进展第20-21页
 3. 高效液相色谱法概述第21-24页
   ·基本原理第21页
   ·装置第21-24页
     ·色谱柱第22页
     ·高压输液泵第22-23页
     ·检测器第23-24页
   ·高效液相色谱法在蜂王浆检测中的应用第24页
 4. 实时荧光定量PCR 分析技术第24-27页
   ·荧光定量PCR 技术的原理第24页
   ·荧光定量PCR 技术的种类第24-26页
     ·非特异性 DNA 结合染料法第25页
     ·探针法第25-26页
   ·定量方法第26-27页
   ·荧光定量PCR 技术在蜜蜂研究中的应用第27页
 5. 单核苷酸多态性(SNP)及研究方法第27-29页
   ·单核苷酸多态性第27-28页
   ·SNP 的研究方法:PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)第28-29页
 6. 本研究的目的与意义第29-31页
第二章 不同意蜂种群间蜂王浆中 MRJP1 相对含量的比较第31-38页
 1. 材料第31页
   ·样本第31页
   ·仪器第31页
   ·试剂第31页
 2. 方法第31-33页
   ·蜂王浆水溶性蛋白的提取第31-32页
   ·水溶性蛋白浓度的测定第32页
   ·色谱条件第32-33页
   ·样品前处理和测定第33页
   ·数据处理第33页
 3. 结果与分析第33-35页
   ·蜂王浆中水溶性蛋白的浓度测定结果第33页
   ·HPLC 结果分析第33-35页
 4. 讨论第35-38页
   ·实验样本的选择第35页
   ·高效液相色谱技术的应用第35-36页
     ·GPC-RI-MALLS 技术的优点第35-36页
     ·流动相的选择第36页
     ·样品的处理第36页
   ·不同种群间MRJP1 相对含量的差异分析第36-37页
   ·MRJP1 作为评价蜂王浆新鲜度指标的可行性分析第37-38页
第三章 不同意蜂种群间 MRJP1 基因表达的比较第38-55页
 1 材料与方法第38-47页
   ·试验材料第38-39页
     ·试验材料第38页
     ·主要试剂与仪器第38页
     ·主要试剂的配制第38-39页
   ·试验方法第39-45页
     ·蜜蜂头部总RNA 提取第39-41页
     ·反转录第41页
     ·引物设计第41页
     ·目的片段扩增第41-42页
     ·DNA 片段的克隆测序第42-44页
     ·扩增效率的鉴定第44-45页
     ·实时荧光定量 PCR第45页
   ·统计分析第45-47页
     ·荧光定量计算方法第45-46页
     ·引物扩增效率的计算第46-47页
 2 结果与分析第47-52页
   ·总 RNA 的检测第47页
   ·PCR 扩增目的片断第47-48页
   ·测序结果分析第48页
   ·标准曲线分析第48-50页
   ·溶解曲线分析第50-51页
   ·3 个蜜蜂种群 mRNA 的表达结果比较第51-52页
   ·MRJP1 基因表达和蛋白含量的相关性第52页
 3 讨论第52-55页
   ·Real-Time PCR 技术的应用第52-53页
     ·Real-Time PCR 技术的优点第52页
     ·本研究的定量方法第52页
     ·SYBR GreenⅠ荧光染料的评价第52-53页
     ·标准曲线和溶解曲线的分析第53页
   ·不同蜂种间MRJP1 基因表达的差异分析第53-54页
   ·MRJP1 基因表达与蛋白含量的相关性分析第54-55页
第四章 三个意蜂种群 MRJP1 基因的多态性分析第55-70页
 1 材料与方法第55-60页
   ·试验材料第55-56页
     ·试验材料第55页
     ·主要仪器第55页
     ·主要试剂的配制第55-56页
     ·主要分子生物学软件第56页
   ·试验方法第56-59页
     ·基因组DNA 提取第56-57页
     ·引物设计与合成第57-58页
     ·PCR 扩增第58页
     ·琼脂糖检测第58页
     ·SSCP 分析第58-59页
     ·硝酸银染色第59页
     ·多态片段的序列测定第59页
   ·统计分析方法第59-60页
 2 结果与分析第60-68页
   ·SNPs 多态性检测第60-64页
     ·SSCP 电泳结果分析第60-61页
     ·测序结果分析第61-64页
   ·3 个意蜂种群MRJP1 基因多态位点的基因型和基因频率分析第64-66页
   ·MRJP1 基因不同多态位点的杂合度和多态信息含量分析第66-67页
   ·不同基因型与MRJP1 含量的关联第67-68页
 3 讨论第68-70页
   ·基因多态性分析第68页
   ·群体遗传学分析第68-69页
   ·不同基因型与MRJP1 含量的关联分析第69-70页
全文结论第70-71页
参考文献第71-79页
致谢第79-80页
攻读学位期间发表学术论文目录第80页

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