中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-31页 |
1. 蜂王浆及其新鲜度指标 | 第14-18页 |
·蜂王浆的作用 | 第14-15页 |
·蜂王浆的组成 | 第15页 |
·蜂王浆新鲜度指标的研究进展 | 第15-18页 |
·王浆酸 | 第15-16页 |
·王浆肌动蛋白 | 第16-17页 |
·超氧化物歧化酶活力(SOD) | 第17页 |
·葡萄糖氧化酶(GOD) | 第17页 |
·水溶性蛋白 | 第17-18页 |
2. 王浆主要蛋白的研究进展 | 第18-21页 |
·MRJPs 的序列研究进展 | 第19-20页 |
·MRJP1 的研究进展 | 第20-21页 |
3. 高效液相色谱法概述 | 第21-24页 |
·基本原理 | 第21页 |
·装置 | 第21-24页 |
·色谱柱 | 第22页 |
·高压输液泵 | 第22-23页 |
·检测器 | 第23-24页 |
·高效液相色谱法在蜂王浆检测中的应用 | 第24页 |
4. 实时荧光定量PCR 分析技术 | 第24-27页 |
·荧光定量PCR 技术的原理 | 第24页 |
·荧光定量PCR 技术的种类 | 第24-26页 |
·非特异性 DNA 结合染料法 | 第25页 |
·探针法 | 第25-26页 |
·定量方法 | 第26-27页 |
·荧光定量PCR 技术在蜜蜂研究中的应用 | 第27页 |
5. 单核苷酸多态性(SNP)及研究方法 | 第27-29页 |
·单核苷酸多态性 | 第27-28页 |
·SNP 的研究方法:PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP) | 第28-29页 |
6. 本研究的目的与意义 | 第29-31页 |
第二章 不同意蜂种群间蜂王浆中 MRJP1 相对含量的比较 | 第31-38页 |
1. 材料 | 第31页 |
·样本 | 第31页 |
·仪器 | 第31页 |
·试剂 | 第31页 |
2. 方法 | 第31-33页 |
·蜂王浆水溶性蛋白的提取 | 第31-32页 |
·水溶性蛋白浓度的测定 | 第32页 |
·色谱条件 | 第32-33页 |
·样品前处理和测定 | 第33页 |
·数据处理 | 第33页 |
3. 结果与分析 | 第33-35页 |
·蜂王浆中水溶性蛋白的浓度测定结果 | 第33页 |
·HPLC 结果分析 | 第33-35页 |
4. 讨论 | 第35-38页 |
·实验样本的选择 | 第35页 |
·高效液相色谱技术的应用 | 第35-36页 |
·GPC-RI-MALLS 技术的优点 | 第35-36页 |
·流动相的选择 | 第36页 |
·样品的处理 | 第36页 |
·不同种群间MRJP1 相对含量的差异分析 | 第36-37页 |
·MRJP1 作为评价蜂王浆新鲜度指标的可行性分析 | 第37-38页 |
第三章 不同意蜂种群间 MRJP1 基因表达的比较 | 第38-55页 |
1 材料与方法 | 第38-47页 |
·试验材料 | 第38-39页 |
·试验材料 | 第38页 |
·主要试剂与仪器 | 第38页 |
·主要试剂的配制 | 第38-39页 |
·试验方法 | 第39-45页 |
·蜜蜂头部总RNA 提取 | 第39-41页 |
·反转录 | 第41页 |
·引物设计 | 第41页 |
·目的片段扩增 | 第41-42页 |
·DNA 片段的克隆测序 | 第42-44页 |
·扩增效率的鉴定 | 第44-45页 |
·实时荧光定量 PCR | 第45页 |
·统计分析 | 第45-47页 |
·荧光定量计算方法 | 第45-46页 |
·引物扩增效率的计算 | 第46-47页 |
2 结果与分析 | 第47-52页 |
·总 RNA 的检测 | 第47页 |
·PCR 扩增目的片断 | 第47-48页 |
·测序结果分析 | 第48页 |
·标准曲线分析 | 第48-50页 |
·溶解曲线分析 | 第50-51页 |
·3 个蜜蜂种群 mRNA 的表达结果比较 | 第51-52页 |
·MRJP1 基因表达和蛋白含量的相关性 | 第52页 |
3 讨论 | 第52-55页 |
·Real-Time PCR 技术的应用 | 第52-53页 |
·Real-Time PCR 技术的优点 | 第52页 |
·本研究的定量方法 | 第52页 |
·SYBR GreenⅠ荧光染料的评价 | 第52-53页 |
·标准曲线和溶解曲线的分析 | 第53页 |
·不同蜂种间MRJP1 基因表达的差异分析 | 第53-54页 |
·MRJP1 基因表达与蛋白含量的相关性分析 | 第54-55页 |
第四章 三个意蜂种群 MRJP1 基因的多态性分析 | 第55-70页 |
1 材料与方法 | 第55-60页 |
·试验材料 | 第55-56页 |
·试验材料 | 第55页 |
·主要仪器 | 第55页 |
·主要试剂的配制 | 第55-56页 |
·主要分子生物学软件 | 第56页 |
·试验方法 | 第56-59页 |
·基因组DNA 提取 | 第56-57页 |
·引物设计与合成 | 第57-58页 |
·PCR 扩增 | 第58页 |
·琼脂糖检测 | 第58页 |
·SSCP 分析 | 第58-59页 |
·硝酸银染色 | 第59页 |
·多态片段的序列测定 | 第59页 |
·统计分析方法 | 第59-60页 |
2 结果与分析 | 第60-68页 |
·SNPs 多态性检测 | 第60-64页 |
·SSCP 电泳结果分析 | 第60-61页 |
·测序结果分析 | 第61-64页 |
·3 个意蜂种群MRJP1 基因多态位点的基因型和基因频率分析 | 第64-66页 |
·MRJP1 基因不同多态位点的杂合度和多态信息含量分析 | 第66-67页 |
·不同基因型与MRJP1 含量的关联 | 第67-68页 |
3 讨论 | 第68-70页 |
·基因多态性分析 | 第68页 |
·群体遗传学分析 | 第68-69页 |
·不同基因型与MRJP1 含量的关联分析 | 第69-70页 |
全文结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
攻读学位期间发表学术论文目录 | 第80页 |