| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 英文縮略表 | 第12-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-33页 |
| 1 多不饱和脂肪酸简介 | 第15-18页 |
| ·PUFAs的分类 | 第16页 |
| ·PUFAs的功能 | 第16页 |
| ·PUFAs生物合成途径 | 第16-18页 |
| ·PUFAs来源及利用微藻生产PUFAs的优势 | 第18页 |
| 2 植物硫酯酶基因研究进展 | 第18-21页 |
| ·植物硫酯酶基因的种类与功能特征 | 第19页 |
| ·植物硫酯酶基因在脂肪酸基因工程中的研究进展及应用 | 第19-21页 |
| 3 蓝藻基因工程 | 第21-30页 |
| ·蓝藻基因组学研究进展 | 第21-24页 |
| ·蓝藻表达外源基因的优点和缺点 | 第24-26页 |
| ·蓝藻表达外源基因的优点 | 第24-25页 |
| ·蓝藻表达外源基因的缺点 | 第25-26页 |
| ·集胞藻PCC6803的分类地位 | 第26页 |
| ·集胞藻PCC6803的遗传学特点及研究进展 | 第26-28页 |
| ·集胞藻PCC6803转录组学研究 | 第26-27页 |
| ·集胞藻PCC6803蛋白组学研究 | 第27-28页 |
| ·集胞藻PCC6803的转化 | 第28-30页 |
| ·集胞藻PCC6803脂肪酸去饱和酶基因 | 第30页 |
| 4 本研究的目的、意义及总体实验设计 | 第30-33页 |
| 第二部分 实验论文 | 第33-135页 |
| 第一章 花生硫酯酶基因的克隆及表达研究 | 第33-107页 |
| ·实验材料 | 第33-39页 |
| ·植物材料、载体及菌种 | 第33页 |
| ·酶、化学试剂及抗体 | 第33-34页 |
| ·主要仪器及型号 | 第34-35页 |
| ·引物序列 | 第35-39页 |
| ·实验方法 | 第39-66页 |
| ·花生基因组DNA提取(CTAB法) | 第39-40页 |
| ·CTAB法提取花生总RNA | 第40-41页 |
| ·反转录cDNA第一链的合成 | 第41-42页 |
| ·AhFatA、AhFatB1基因克隆及序列分析 | 第42-47页 |
| ·基于半定量及荧光定量RT-PCR的AhFatA、AhFatB1基因表达分析 | 第47-48页 |
| ·AhFatA、AhFatB1基因定位分析 | 第48-50页 |
| ·AhFatA、AhFatB1基因植物表达载体的构建及农杆菌介导的花生遗传转化 | 第50-55页 |
| ·AhFatA、AhFatB1基因的原核表达 | 第55-60页 |
| ·AhFatA、AhFatB1基因转化集胞藻PCC6803 | 第60-66页 |
| ·实验结果与分析 | 第66-103页 |
| ·AhFatA、AhFatB1基因的克隆及分析 | 第66-80页 |
| ·AhFatA、AhFatB1基因的亚细胞定位 | 第80-83页 |
| ·AhFatA、AhFatB1基因的花生遗传转化 | 第83-85页 |
| ·AhFatA、AhFatB1基因的原核表达 | 第85-94页 |
| ·AhFatA、AhFatB1基因转化集胞藻PCC6803 | 第94-103页 |
| ·讨论 | 第103-107页 |
| ·花生硫酯酶基因的表达模式分析 | 第103-104页 |
| ·花生硫酯酶基因的亚细胞定位 | 第104页 |
| ·花生硫脂酶基因基因组序列分析 | 第104-105页 |
| ·花生硫酯酶基因对脂肪酸组成和成分的影响 | 第105-107页 |
| 第二章 多不饱和脂肪酸ω-3生物合成途径相关酶基因在集胞藻PCC6803中的表达研究 | 第107-135页 |
| ·实验材料 | 第107-108页 |
| ·藻株 | 第107页 |
| ·引物序列 | 第107-108页 |
| ·实验方法 | 第108-113页 |
| ·转化集胞藻PCC6803相关基因的获得 | 第108-110页 |
| ·脂肪酸去饱和酶基因转化集胞藻PCC6803 | 第110-112页 |
| ·转基因集胞藻基因组DNA提取及PCR检测 | 第112页 |
| ·Western blot杂交检测脂肪酸去饱和酶基因表达水平 | 第112页 |
| ·转基因藻脂肪酸成分测定 | 第112-113页 |
| ·实验结果 | 第113-130页 |
| ·脂肪酸去饱和酶转化集胞藻PCC6803重组质粒的构建及转化 | 第113-114页 |
| ·转基因集胞藻PCC6803重组子鉴定 | 第114-115页 |
| ·Western blot检测转基因藻株脂肪酸去饱和酶基因表达水平 | 第115-117页 |
| ·转基因藻株脂肪酸成分分析 | 第117-130页 |
| ·讨论 | 第130-135页 |
| ·集胞藻PCC6803同源重组载体构建 | 第130-131页 |
| ·SD序列问题 | 第131-132页 |
| ·脂肪酸去饱和酶基因对集胞藻PCC6803脂肪酸组成和含量的影响 | 第132-133页 |
| ·温度对转基因藻脂肪酸组成和含量的影响 | 第133-135页 |
| 总结 | 第135-138页 |
| 参考文献 | 第138-152页 |
| 附录 | 第152-157页 |
| 攻读博士期间发表论文与申请专利 | 第157-158页 |
| 参与的科研课题 | 第158-159页 |
| 致谢 | 第159页 |
