| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 引言 | 第8-14页 |
| ·植物与病原的相互作用 | 第8-9页 |
| ·病程相关蛋白 | 第9-10页 |
| ·植物病程相关蛋白 | 第9页 |
| ·病程相关蛋白的作用 | 第9-10页 |
| ·病程相关蛋白的生化特性以及在细胞中的分布 | 第10页 |
| ·类甜蛋白(PR-5蛋白) | 第10-12页 |
| ·PR-5蛋白的结构特征 | 第10-11页 |
| ·PR-5蛋白的生物学功能 | 第11-12页 |
| ·大豆中的病程相关蛋白 | 第12-13页 |
| ·大豆中病程相关蛋白的研究进展 | 第12页 |
| ·大豆中的类甜蛋白的研究进展 | 第12-13页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第13-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-27页 |
| ·材料与试剂 | 第14-15页 |
| ·植物材料 | 第14页 |
| ·质粒和菌种 | 第14页 |
| ·培养基 | 第14页 |
| ·供试引物 | 第14-15页 |
| ·实验试剂 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15页 |
| ·试验方法 | 第15-27页 |
| ·试验材料种植方法 | 第15页 |
| ·植物总RNA的提取(TRlzol法)及检测 | 第15-16页 |
| ·cDNA的合成 | 第16-17页 |
| ·GmOLPa基因的克隆 | 第17页 |
| ·目的基因的凝胶回收 | 第17-18页 |
| ·回收片段与pMD 18-Tvector连接 | 第18页 |
| ·大肠杆菌JM109感受态细胞的制备 | 第18页 |
| ·连接体系转入E.coli JM109感受态细胞(热激法) | 第18-19页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第19-20页 |
| ·GmOLPa RNAi植物沉默载体(1301-Gm-RNAi)的构建 | 第20-22页 |
| ·发根农杆菌侵染大豆体系的建立 | 第22-23页 |
| ·GmOLPa基因原核表达载体的构建及重组蛋白的优化表达 | 第23-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-37页 |
| ·GmOLPa基因的克隆 | 第27-30页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第27页 |
| ·GmOLPa基因的克隆及鉴定 | 第27-28页 |
| ·GmOLPa基因的序列分析 | 第28-30页 |
| ·GmOLPa RNAi植物沉默载体(1301-Gm-RNAi)的构建及农杆菌侵染体系的建立 | 第30-35页 |
| ·GmOLPa RNAi植物沉默载体(1301-Gm-RNAi)的构建 | 第30-33页 |
| ·发根农杆菌侵染大豆体系的建立 | 第33-35页 |
| ·GmOLPa基因原核表达载体的构建及重组蛋白的表达优化 | 第35-37页 |
| ·原核表达质粒pET-28-GP的构建 | 第35页 |
| ·GmOLPa基因在大肠杆菌中的诱导表达及优化 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| ·GmOLPa基因的克隆 | 第37页 |
| ·农杆菌侵染大豆体系的建立 | 第37-38页 |
| ·GmOLPa RNAi植物沉默载体(1301-Gm-RNAi)的构建 | 第38-39页 |
| ·GmOLPa基因原核表达载体的构建及重组蛋白的优化表达 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 附录 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简介 | 第48-49页 |
| 附件 | 第49页 |
