摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
1 前言 | 第12-23页 |
·AP-2α蛋白的功能 | 第13-16页 |
·AP-2α参与细胞增殖与分化的调控 | 第13页 |
·AP-2α在胚胎发育过程中的重要功能 | 第13-14页 |
·AP-2α在癌症中的作用 | 第14-15页 |
·AP-2α与化疗药物的耐药性 | 第15-16页 |
·microRNA简介 | 第16-21页 |
·microRNAs的发现发生及其作用机制 | 第16-17页 |
·miRNA与生长和分化以及其在肿瘤中的作用 | 第17-19页 |
·miRNA上的SNP位点 | 第19页 |
·miRNA的应用前景 | 第19-20页 |
·miRNA-200家族 | 第20-21页 |
·本课题的研究思路和意义 | 第21-23页 |
2 材料与方法 | 第23-36页 |
·材料 | 第23-27页 |
·菌种与细胞 | 第23页 |
·质粒载体 | 第23页 |
·工具酶 | 第23页 |
·试剂与溶液 | 第23-26页 |
·试剂盒 | 第26页 |
·抗体 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-36页 |
·生物信息学方法 | 第27页 |
·引物及载体的构建 | 第27-28页 |
·细胞培养与细胞转染 | 第28-30页 |
·Western blot | 第30-31页 |
·Dual-Glo双荧光分析实验 | 第31-32页 |
·MTT实验 | 第32-33页 |
·Hochest染核实验 | 第33页 |
·流式细胞分析细胞凋亡实验 | 第33-34页 |
·克隆形成实验 | 第34-36页 |
3 结果与分析 | 第36-46页 |
·AP-2α基因3'UTR含有miR-200b/200C/429的结合位点 | 第36-37页 |
·miR-200b/200c/429抑制内源的AP-2a蛋白的表达 | 第37-38页 |
·SNP rs1045385 A>C变化影响miR-200b/200c/429的结合和AP-2A蛋白的表达 | 第38-40页 |
·SNP rs1045385 A>C变化增加HEC-1-A细胞对顺铂的敏感性 | 第40-46页 |
·MTT实验结果 | 第40-41页 |
·Hochest染色实验与流式细胞实验结果 | 第41-43页 |
·克隆形成实验结果 | 第43-46页 |
4 讨论 | 第46-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
附录 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |