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microRNA-200家族调控AP-2α基因表达的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
1 前言第12-23页
   ·AP-2α蛋白的功能第13-16页
     ·AP-2α参与细胞增殖与分化的调控第13页
     ·AP-2α在胚胎发育过程中的重要功能第13-14页
     ·AP-2α在癌症中的作用第14-15页
     ·AP-2α与化疗药物的耐药性第15-16页
   ·microRNA简介第16-21页
     ·microRNAs的发现发生及其作用机制第16-17页
     ·miRNA与生长和分化以及其在肿瘤中的作用第17-19页
     ·miRNA上的SNP位点第19页
     ·miRNA的应用前景第19-20页
     ·miRNA-200家族第20-21页
   ·本课题的研究思路和意义第21-23页
2 材料与方法第23-36页
   ·材料第23-27页
     ·菌种与细胞第23页
     ·质粒载体第23页
     ·工具酶第23页
     ·试剂与溶液第23-26页
     ·试剂盒第26页
     ·抗体第26-27页
   ·实验方法第27-36页
     ·生物信息学方法第27页
     ·引物及载体的构建第27-28页
     ·细胞培养与细胞转染第28-30页
     ·Western blot第30-31页
     ·Dual-Glo双荧光分析实验第31-32页
     ·MTT实验第32-33页
     ·Hochest染核实验第33页
     ·流式细胞分析细胞凋亡实验第33-34页
     ·克隆形成实验第34-36页
3 结果与分析第36-46页
   ·AP-2α基因3'UTR含有miR-200b/200C/429的结合位点第36-37页
   ·miR-200b/200c/429抑制内源的AP-2a蛋白的表达第37-38页
   ·SNP rs1045385 A>C变化影响miR-200b/200c/429的结合和AP-2A蛋白的表达第38-40页
   ·SNP rs1045385 A>C变化增加HEC-1-A细胞对顺铂的敏感性第40-46页
     ·MTT实验结果第40-41页
     ·Hochest染色实验与流式细胞实验结果第41-43页
     ·克隆形成实验结果第43-46页
4 讨论第46-50页
参考文献第50-57页
附录第57-58页
致谢第58-59页

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