| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 文昌鱼概述 | 第11-16页 |
| ·文昌鱼的命名和分类 | 第11-12页 |
| ·文昌鱼的形态特征及生活习性 | 第12-13页 |
| ·厦门 2 种文昌鱼的形态比较 | 第13-14页 |
| ·文昌鱼的性腺发育 | 第14-15页 |
| ·不同发育阶段卵巢的特征[11] | 第14-15页 |
| ·不同发育阶段精巢的特征[11] | 第15页 |
| ·分子生物学在研究文昌鱼过程中的应用 | 第15-16页 |
| ·文昌鱼的生物学意义 | 第16页 |
| 2 转录因子活性蛋白(transcription factor AP-1)的研究进展 | 第16-20页 |
| ·AP-1 的结构组成 | 第16-17页 |
| ·AP-1 的活化 | 第17页 |
| ·AP-1 的调控机制 | 第17-18页 |
| ·AP-1 与细胞凋亡 | 第18页 |
| ·AP-1 与细胞周期调控 | 第18-19页 |
| ·AP-1 在卵巢颗粒细胞中的研究 | 第19-20页 |
| 3 原位杂交技术的原理和应用 | 第20-21页 |
| ·原位杂交技术原理 | 第20页 |
| ·探针的标记和检测方法 | 第20页 |
| ·RNA 原位杂交的应用 | 第20-21页 |
| 4 本研究目的和技术路线 | 第21-23页 |
| ·研究目的 | 第21-22页 |
| ·实验技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 日本文昌鱼 BjAP-1 基因的克隆、进化和序列分析 | 第23-36页 |
| 1 材料方法 | 第23-28页 |
| ·实验动物材料 | 第23页 |
| ·仪器与试剂 | 第23-24页 |
| ·仪器 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·试剂配方 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·RNA 提取与检测 | 第24-25页 |
| ·成体文昌鱼卵巢总 RNA 的提取 | 第24-25页 |
| ·甲醛变性凝胶电泳检测 | 第25页 |
| ·cDNA 第一链合成 | 第25-26页 |
| ·PCR 扩增片段、纯化、连接 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的转化 | 第27页 |
| ·克隆测序 | 第27页 |
| ·序列比较与系统进化分析 | 第27-28页 |
| 2 结果与讨论 | 第28-36页 |
| ·全长 cDNA 序列的克隆 | 第28-29页 |
| ·RNA 的提取 | 第28页 |
| ·RT-PCR | 第28-29页 |
| ·序列分析 | 第29-32页 |
| ·系统进化分析 | 第32-36页 |
| 第三章 BjAP-1 基因的组织和时空表达模式 | 第36-49页 |
| 1 材料与方法 | 第36-45页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·质粒和文昌鱼组织 | 第36页 |
| ·仪器与试剂 | 第36-38页 |
| ·仪器 | 第36-37页 |
| ·试剂 | 第37-38页 |
| ·工具酶、试剂盒和主要试剂 | 第37页 |
| ·原位杂交所用试剂(Reagents) | 第37-38页 |
| ·方法 | 第38-45页 |
| ·pGEMX-AP-1 质粒的大量提取 | 第38-39页 |
| ·地高辛标记的原位杂交探针的体外转录合成 | 第39-42页 |
| ·载玻片的处理 | 第42页 |
| ·文昌鱼材料的固定 | 第42页 |
| ·文昌鱼组织块的包埋 | 第42页 |
| ·冷冻切片 | 第42页 |
| ·处理及杂交 | 第42-43页 |
| ·文昌鱼成体不同组织总 RNA 的制备 | 第43-44页 |
| ·半定量 RT-PCR | 第44-45页 |
| 2 结果与讨论 | 第45-49页 |
| ·探针的合成 | 第45-46页 |
| ·文昌鱼成体的冷冻切片原位杂交 | 第46-47页 |
| ·半定量 RT-PCR | 第47-49页 |
| 第四章 结论与展望 | 第49-51页 |
| 1 结论 | 第49-50页 |
| 2 展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 缩略语 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |