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水稻茎端分生组织离体重建过程中生长素和细胞分裂素响应信号的分布模式研究

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-24页
   ·植物离体器官发生第12-14页
     ·植物细胞全能性第12页
     ·离体器官再生的调控机理研究第12-13页
     ·水稻离体器官发生的研究现状第13-14页
   ·水稻茎端干细胞发育与茎端分生组织的形成第14-17页
     ·水稻中调控干细胞发育相关基因的表达第15-16页
     ·水稻中调控茎端分生组织形成相关基因的表达第16-17页
   ·生长素第17-20页
     ·生长素的分布第17-18页
     ·生长素的合成第18-19页
     ·生长素的运输第19页
     ·生长素的信号转导第19-20页
   ·细胞分裂素第20-22页
     ·细胞分裂素的合成第20-21页
     ·细胞分裂素的降解第21页
     ·细胞分裂素的运输第21-22页
     ·细胞分裂素的信号转导第22页
   ·生长素和细胞分裂素的相互作用第22-23页
   ·本研究的目的意义第23-24页
2 材料与方法第24-36页
   ·实验材料第24-25页
     ·植物材料及其生长条件第24页
     ·菌株与质粒第24页
     ·酶、生化试剂及仪器第24-25页
     ·引物第25页
     ·培养基配方第25页
   ·实验方法第25-36页
     ·表达载体的构建第25-31页
       ·植物基因组的提取与纯化第25-26页
       ·PCR 扩增第26页
       ·连接反应第26-27页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备转化及碱法小量质粒 DNA 的提取第27-28页
         ·大肠杆菌感受态细胞的制备第27页
         ·大肠杆菌细胞的转化第27页
         ·碱法小量质粒 DNA 的提取第27-28页
       ·质粒 DNA 的酶切鉴定第28页
       ·DNA 序列测定第28页
       ·启动子驱动 GUS 和 GFP 报告基因表达载体的构建第28-30页
       ·农杆菌感受态细胞的制备和转化第30-31页
         ·根癌农杆菌 EHA105 感受态细胞的制备第30页
         ·电转法转化农杆菌第30-31页
     ·水稻成熟胚愈伤组织的诱导第31页
     ·水稻愈伤组织的转化第31-32页
       ·水稻愈伤组织的预培养及农杆菌的活化第31页
       ·农杆菌对水稻愈伤组织的转化第31-32页
     ·激光共聚焦扫描显微镜的观察和图像处理第32页
     ·转基因水稻的 GUS 染色鉴定和石蜡切片第32-33页
       ·转基因水稻的 GUS 染色鉴定第32-33页
       ·石蜡切片第33页
         ·取材固定第33页
         ·材料脱水、透明、浸蜡、包埋第33页
         ·切片第33页
         ·钌红染色第33页
     ·Real time-PCR 分析第33-36页
       ·植物总 RNA 的提取第33-34页
       ·反转录 cDNA 第一链的合成第34-35页
       ·Real time-PCR第35-36页
3 结果与分析第36-48页
   ·水稻离体芽再生系统的建立第36-37页
   ·生长素、细胞分裂素合成酶相关基因和信号转导相关基因在水稻离体芽再生过程中的 Real time-PCR 分析第37-42页
     ·生长素合成酶基因 OsYUCCAs 在水稻离体芽再生过程中的作用第38页
     ·生长素响应调节因子 OsARFs 在水稻离体芽再生过程中的作用第38-41页
     ·细胞分裂素响应调节因子 OsRRs 在水稻离体芽再生过程中的作用第41-42页
   ·水稻离体芽再生过程中茎端分生组织相关基因表达模式分析第42-44页
     ·OsWUS 的表达分布第42-43页
     ·OSH1 的表达分布第43-44页
   ·生长素的区域性分布第44-45页
   ·细胞分裂素的区域性分布第45-48页
4 讨论第48-51页
   ·水稻离体芽再生过程中生长素和细胞分裂素部分相关基因表达水平改变第48-49页
   ·水稻离体芽再生过程中茎端分生组织相关基因表达模式分析第49页
   ·水稻离体芽再生过程中生长素和细胞分裂素由均匀到区域性的分布模式第49-51页
5 结论第51-52页
参考文献第52-60页
附录第60-63页
致谢第63页

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