中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-24页 |
·植物离体器官发生 | 第12-14页 |
·植物细胞全能性 | 第12页 |
·离体器官再生的调控机理研究 | 第12-13页 |
·水稻离体器官发生的研究现状 | 第13-14页 |
·水稻茎端干细胞发育与茎端分生组织的形成 | 第14-17页 |
·水稻中调控干细胞发育相关基因的表达 | 第15-16页 |
·水稻中调控茎端分生组织形成相关基因的表达 | 第16-17页 |
·生长素 | 第17-20页 |
·生长素的分布 | 第17-18页 |
·生长素的合成 | 第18-19页 |
·生长素的运输 | 第19页 |
·生长素的信号转导 | 第19-20页 |
·细胞分裂素 | 第20-22页 |
·细胞分裂素的合成 | 第20-21页 |
·细胞分裂素的降解 | 第21页 |
·细胞分裂素的运输 | 第21-22页 |
·细胞分裂素的信号转导 | 第22页 |
·生长素和细胞分裂素的相互作用 | 第22-23页 |
·本研究的目的意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-36页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·植物材料及其生长条件 | 第24页 |
·菌株与质粒 | 第24页 |
·酶、生化试剂及仪器 | 第24-25页 |
·引物 | 第25页 |
·培养基配方 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-36页 |
·表达载体的构建 | 第25-31页 |
·植物基因组的提取与纯化 | 第25-26页 |
·PCR 扩增 | 第26页 |
·连接反应 | 第26-27页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备转化及碱法小量质粒 DNA 的提取 | 第27-28页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
·大肠杆菌细胞的转化 | 第27页 |
·碱法小量质粒 DNA 的提取 | 第27-28页 |
·质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第28页 |
·DNA 序列测定 | 第28页 |
·启动子驱动 GUS 和 GFP 报告基因表达载体的构建 | 第28-30页 |
·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第30-31页 |
·根癌农杆菌 EHA105 感受态细胞的制备 | 第30页 |
·电转法转化农杆菌 | 第30-31页 |
·水稻成熟胚愈伤组织的诱导 | 第31页 |
·水稻愈伤组织的转化 | 第31-32页 |
·水稻愈伤组织的预培养及农杆菌的活化 | 第31页 |
·农杆菌对水稻愈伤组织的转化 | 第31-32页 |
·激光共聚焦扫描显微镜的观察和图像处理 | 第32页 |
·转基因水稻的 GUS 染色鉴定和石蜡切片 | 第32-33页 |
·转基因水稻的 GUS 染色鉴定 | 第32-33页 |
·石蜡切片 | 第33页 |
·取材固定 | 第33页 |
·材料脱水、透明、浸蜡、包埋 | 第33页 |
·切片 | 第33页 |
·钌红染色 | 第33页 |
·Real time-PCR 分析 | 第33-36页 |
·植物总 RNA 的提取 | 第33-34页 |
·反转录 cDNA 第一链的合成 | 第34-35页 |
·Real time-PCR | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-48页 |
·水稻离体芽再生系统的建立 | 第36-37页 |
·生长素、细胞分裂素合成酶相关基因和信号转导相关基因在水稻离体芽再生过程中的 Real time-PCR 分析 | 第37-42页 |
·生长素合成酶基因 OsYUCCAs 在水稻离体芽再生过程中的作用 | 第38页 |
·生长素响应调节因子 OsARFs 在水稻离体芽再生过程中的作用 | 第38-41页 |
·细胞分裂素响应调节因子 OsRRs 在水稻离体芽再生过程中的作用 | 第41-42页 |
·水稻离体芽再生过程中茎端分生组织相关基因表达模式分析 | 第42-44页 |
·OsWUS 的表达分布 | 第42-43页 |
·OSH1 的表达分布 | 第43-44页 |
·生长素的区域性分布 | 第44-45页 |
·细胞分裂素的区域性分布 | 第45-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
·水稻离体芽再生过程中生长素和细胞分裂素部分相关基因表达水平改变 | 第48-49页 |
·水稻离体芽再生过程中茎端分生组织相关基因表达模式分析 | 第49页 |
·水稻离体芽再生过程中生长素和细胞分裂素由均匀到区域性的分布模式 | 第49-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
附录 | 第60-63页 |
致谢 | 第63页 |