细胞氧化应激过程中受PRAK调控的磷酸化蛋白的鉴定
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 1 绪论 | 第14-21页 |
| ·课题背景 | 第14-21页 |
| ·氧化应激 | 第14-15页 |
| ·磷酸化蛋白质组学 | 第15-18页 |
| ·技术路线 | 第18-21页 |
| 2 细胞的培养及总蛋白的提取 | 第21-24页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·配制试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-22页 |
| ·细胞培养与总蛋白的富集 | 第21-22页 |
| ·细胞总蛋白定量 | 第22页 |
| ·结果 | 第22-23页 |
| ·蛋白质定量结果 | 第22-23页 |
| ·本章小结 | 第23-24页 |
| 3 细胞质磷酸化蛋白的DIGE分离 | 第24-36页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·配制试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-28页 |
| ·细胞质磷酸化蛋白质的富集 | 第25-26页 |
| ·细胞质磷酸化蛋白的浓缩(丙酮沉淀) | 第26页 |
| ·细胞质磷酸化蛋白的除盐 | 第26页 |
| ·细胞质磷酸化蛋白的差异点分析-DIGE | 第26-28页 |
| ·结果 | 第28-34页 |
| ·双向凝胶电泳分离荧光标记蛋白的结果 | 第28-29页 |
| ·荧光差异双向凝胶电泳蛋白图谱 | 第29-32页 |
| ·制备胶图像 | 第32页 |
| ·DeCyder软件分析差异性蛋白质点 | 第32-34页 |
| ·本章小结 | 第34-36页 |
| 4 差异蛋白的鉴定和生物信息学分析 | 第36-49页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第36页 |
| ·配制试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·主要网址 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·样品处理 | 第37-38页 |
| ·质谱鉴定 | 第38页 |
| ·生物信息学分析 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-46页 |
| ·蛋白质的质谱鉴定 | 第39-40页 |
| ·蛋白质的亚细胞定位分析质 | 第40页 |
| ·差异蛋白功能分析 | 第40页 |
| ·差异蛋白功能复合物分析 | 第40-46页 |
| ·讨论 | 第46-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 | 第54-56页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
