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小分子化合物IMB-LA抑制Vpu降解BST-2机理研究

中文摘要第1-4页
Abstract第4-5页
縮略语表第5-10页
第一章 前言第10-19页
   ·宿主限制因子第10-11页
   ·BST-2的结构特征第11-12页
   ·BST-2的抗病毒机制第12-14页
   ·Vpu的结构及其拮抗BST-2功能的机制第14-17页
     ·Vpu的结构和功能第14-15页
     ·Vpu的跨膜区和BST-2跨膜区相互作用诱导BST-2的泛素化降解第15-16页
     ·Vpu拮抗BST-2的作用位点第16-17页
   ·BST-2的其他拮抗因子第17页
   ·结论第17-19页
第二章 实验材料与方法第19-27页
   ·实验材料第19-21页
     ·细胞系第19页
     ·化合物第19页
     ·常用生化试剂第19-20页
     ·试剂盒第20页
     ·抗体第20-21页
     ·质粒第21页
     ·主要实验仪器第21页
   ·实验方法第21-27页
     ·质粒构建第21-22页
     ·细胞培养及转染第22页
     ·假型病毒产量及感染性测定第22-23页
     ·Cell-ELISA流程第23页
     ·免疫印迹(Western Blot)第23页
     ·FACS检测第23-24页
     ·实时荧光定量PCR第24页
     ·高通量筛选流程及模型评价第24-25页
     ·沉默BST-2的单克隆Hela细胞系的建立第25页
     ·化合物IMB-LA抗病毒活性测定第25页
     ·BRET比值测定第25页
     ·免疫共沉淀(Co-IP)第25-26页
     ·激光共聚焦(Confocal Microscopy)第26-27页
第三章 实验结果第27-42页
   ·液体工作站用epMotion5070于Vpu下调BST2筛药模型的高通量筛选以及模型评价第27-30页
     ·Cell-ELISA用于检测细胞表面BST-2的表达水平流程第27-28页
     ·液体工作站epMotion5070应用于Cell-ELISA模型的特异性分析第28页
     ·模型评价结果第28-29页
     ·初筛结果和复筛结果第29-30页
   ·IMB-LA上调细胞表面BST-2含量的机制研究第30-38页
     ·IMB-LA可以上调Hela细胞表面BST-2含量在有Vpu存在的情况下第30-32页
     ·IMB-LA不影响细胞bst-2 mRNA转录及Vpu的表达第32-33页
     ·IMB-LA特异性阻断Vpu降解BST-2第33-35页
     ·IMB-LA对于BST-2/Vpu/β-TrCP2相互作用的影响第35-36页
     ·IMB-LA对于Vpu促进的BST-2泛素化的影响第36-37页
     ·IMB-LA对于Vpu诱导的BST-2降解转运的影响第37-38页
   ·IMB-LA的抗病毒活性的研究第38-42页
     ·Hela-shRNACDS细胞系的建立第38-39页
     ·IMB-LA的抗病毒活性依赖于BST-2第39-42页
第四章 讨论第42-44页
第五章 结论第44-45页
参考文献第45-49页
硕士期间发表论文第49-50页
 一.发表论文第49页
 二.申请专利第49-50页
致谢第50页

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