| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 前言 | 第11页 |
| 1 小肽在鱼类生长中的作用 | 第11-13页 |
| ·促进氨基酸的吸收,提高动物的生产性能 | 第11-12页 |
| ·促进动物吸收微量元素,提高矿物质元素利用率 | 第12页 |
| ·增强鱼的免疫力,提高成活率 | 第12-13页 |
| 2 小肽转运蛋白PepT1研究进展 | 第13-17页 |
| ·PepT1转运的动力学特征与吸收特点 | 第13-15页 |
| ·鱼类PepT1基因的克隆及其分子特征 | 第15页 |
| ·鱼类PepT1基因的组织表达 | 第15-17页 |
| 3 小肽转运蛋白PepT2研究进展 | 第17-20页 |
| ·小肽PepT2的吸收特点 | 第17-18页 |
| ·PepT2基因的克隆及其分子特征 | 第18页 |
| ·PepT2基因的组织表达 | 第18-20页 |
| ·PepT2基因的组织分布 | 第18-19页 |
| ·PepT2的表达调控 | 第19-20页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 草鱼PepT2基因全长克隆与组织表达 | 第21-44页 |
| 1 材料 | 第21-23页 |
| ·实验动物与菌株 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| 2 实验方法 | 第23-29页 |
| ·动物材料获得 | 第23页 |
| ·总RNA的提取 | 第23页 |
| ·PepT2 cDNA部分片段克隆 | 第23-25页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第23页 |
| ·PCR 扩増 | 第23-24页 |
| ·目的片段回收 | 第24页 |
| ·目的片段与pUCm-T连接 | 第24页 |
| ·DH5α感受态制备与转化 | 第24-25页 |
| ·蓝白斑筛选、阳性鉴定及送检测序 | 第25页 |
| ·PepT23′端和5′端片段扩增和克隆 | 第25-28页 |
| ·PepT23′RACE-Ready cDNA与5′RACE-Ready cDNA合成 | 第25-26页 |
| ·RACE PCR扩增及片段回收 | 第26-28页 |
| ·PepT2序列拼接 | 第28页 |
| ·PepT2全长序列分析 | 第28页 |
| ·生物学信息分析 | 第28页 |
| ·序列同源性比对与系统发育树的构建 | 第28页 |
| ·PepT2组织表达 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-41页 |
| ·总RNA提取效果 | 第29-30页 |
| ·草鱼PepT2基因全长cDNA克隆 | 第30-31页 |
| ·草鱼PepT2中间片段的克隆 | 第30页 |
| ·草鱼PepT2 3'端与5'端的克隆 | 第30-31页 |
| ·草鱼PepT2基因全长生物学分析 | 第31-39页 |
| ·草鱼PepT2基因全长拼接与分析 | 第31-33页 |
| ·PepT2预测蛋白质生物学分析 | 第33-35页 |
| ·PepT2氨基酸同源性分析 | 第35-39页 |
| ·草鱼PepT2的系统进化分析 | 第39页 |
| ·草鱼PepT2基因组织表达 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| ·草鱼小肽转运载体PepT2的结构与功能 | 第41-42页 |
| ·草鱼PepT2的组织表达差异 | 第42-44页 |
| 第三章 草鱼PepT1基因全长克隆与序列分析 | 第44-65页 |
| 1 材料 | 第44-45页 |
| ·实验动物与菌株 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器设备 | 第44-45页 |
| ·引物设计 | 第45页 |
| 2 实验方法 | 第45-50页 |
| ·动物材料获得 | 第45-46页 |
| ·总RNA的提取 | 第46页 |
| ·PepT1 cDNA部分片段克隆 | 第46-47页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第46页 |
| ·PepT1片段PCR扩增 | 第46-47页 |
| ·目的片段回收 | 第47页 |
| ·目的片段与pUCm-T连接 | 第47页 |
| ·DH5α感受态制备与转化 | 第47页 |
| ·蓝白斑筛选、阳性鉴定及送检测序 | 第47页 |
| ·PepT13′端和5′端片段扩增和克隆 | 第47-50页 |
| ·PepT1 3′RACE-Ready cDNA与5′RACE-Ready cDNA合成 | 第48页 |
| ·RACE PCR扩增 | 第48-50页 |
| ·PepT1序列拼接 | 第50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-62页 |
| ·总RNA提取效果 | 第50-51页 |
| ·草鱼PepT1基因全长cDNA克隆 | 第51页 |
| ·草鱼PepT1部分片段的克隆 | 第51页 |
| ·草鱼PepT13’端与5’端的克隆 | 第51页 |
| ·草鱼PepT1基因全长生物学分析 | 第51-62页 |
| ·PepT1基因全长拼接与序列分析 | 第52-54页 |
| ·PepT1预测蛋白质生物学分析 | 第54-55页 |
| ·PepT1氨基酸同源性分析 | 第55-61页 |
| ·草鱼PepT1的系统进化分析 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 附录 | 第72-77页 |
| 致谢 | 第77页 |