| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-33页 |
| 第一节 抗菌肽研究进展 | 第14-28页 |
| ·抗菌肽概述 | 第14-22页 |
| ·抗菌肽的生物学特性 | 第14-16页 |
| ·抗菌肽的分类 | 第16-20页 |
| ·抗菌肽作用机理 | 第20页 |
| ·抗菌肽应用前景 | 第20-22页 |
| ·抗菌肽 Hepcidin | 第22-26页 |
| ·Hepcidin 的分子生物学特征 | 第22-23页 |
| ·Hepcidin 的表达分布 | 第23-24页 |
| ·Hepcidin 的表达调控及生物学功能 | 第24-26页 |
| ·抗菌肽 NK-lysin | 第26-28页 |
| ·NK-lysin 的分子生物学特征 | 第26-27页 |
| ·NK-lysin 研究进展 | 第27-28页 |
| 第二节 细胞因子 Midkine 研究进展 | 第28-32页 |
| ·Midkine 基因及蛋白 | 第28-30页 |
| ·基因 | 第28-29页 |
| ·蛋白 | 第29-30页 |
| ·Midkine 的表达 | 第30页 |
| ·Midkine 的信号转导 | 第30-31页 |
| ·Midkine 的生物学功能 | 第31-32页 |
| 第三节 本研究的目的、意义和实验设计 | 第32-33页 |
| 第二章 半滑舌鳎抗菌肽 hepcidin 基因的克隆及功能分析 | 第33-68页 |
| 第一节 半滑舌鳎抗菌肽 hepcidin 基因的克隆及序列分析 | 第33-47页 |
| ·材料和方法 | 第33-40页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·实验中所用引物（表 2-1） | 第34页 |
| ·半滑舌鳎 cDNA 第一链的合成 | 第34-37页 |
| ·半滑舌鳎基因组 DNA 的提取 | 第37页 |
| ·半滑舌鳎 hepcidin 基因组序列的获得 | 第37-39页 |
| ·半滑舌鳎 hepcidin 基因的序列分析 | 第39-40页 |
| ·结果 | 第40-45页 |
| ·CsHepcidin 全长 cDNA 序列分析 | 第40页 |
| ·CsHepcidin 全长基因序列分析 | 第40-42页 |
| ·CsHepcidin 氨基酸序列分析 | 第42-43页 |
| ·CsHepcidin 系统进化分析 | 第43-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第二节 半滑舌鳎抗菌肽 hepcidin 基因的表达分析 | 第47-55页 |
| ·材料和方法 | 第47-50页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·实验取材 | 第47-48页 |
| ·荧光定量 PCR | 第48-50页 |
| ·结果 | 第50-53页 |
| ·CsHepcidin 基因的组织表达分析 | 第50页 |
| ·CsHepcidin 基因的发育表达分析 | 第50页 |
| ·免疫刺激前后 CsHepcidin 转录水平表达量的变化 | 第50-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第三节 半滑舌鳎抗菌 hepcidin 的原核表达、纯化及活性检测 | 第55-68页 |
| ·材料和方法 | 第55-61页 |
| ·实验材料 | 第55-57页 |
| ·重组质粒的构建与鉴定 | 第57-58页 |
| ·重组菌株的诱导表达 | 第58-60页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第60页 |
| ·融合蛋白抗菌活性的测定 | 第60-61页 |
| ·结果 | 第61-65页 |
| ·半滑舌鳎 hepcidin 原核表达质粒的构建 | 第61-62页 |
| ·半滑舌鳎 hepcidin 在大肠杆菌中的诱导表达及纯化 | 第62-64页 |
| ·融合蛋白的抑菌活性 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-68页 |
| 第三章 半滑舌鳎抗菌肽 NK-lysin 基因的克隆及表达分析 | 第68-86页 |
| 第一节 半滑舌鳎抗菌肽 NK-lysin 基因的克隆及序列分析 | 第68-78页 |
| ·材料和方法 | 第68-71页 |
| ·实验材料 | 第68页 |
| ·实验中所用引物 | 第68-69页 |
| ·半滑舌鳎 NK-lysin 基因全长 cDNA 的克隆 | 第69-70页 |
| ·半滑舌鳎 NK-lysin 基因组序列的克隆 | 第70页 |
| ·半滑舌鳎 NK-lysin 基因的序列分析 | 第70-71页 |
| ·结果 | 第71-72页 |
| ·CsNK-lysin 全长 cDNA 和基因序列分析 | 第71页 |
| ·CsNK-lysin 三种剪切型的发现 | 第71-72页 |
| ·CsNK-lysin 的系统进化分析 | 第72页 |
| ·讨论 | 第72-78页 |
| 第二节 半滑舌鳎抗菌肽 NK-lysin 基因的表达分析 | 第78-86页 |
| ·材料与方法 | 第78-79页 |
| ·实验材料 | 第78页 |
| ·引物设计 | 第78页 |
| ·荧光定量 PCR | 第78-79页 |
| ·半滑舌鳎 NK-lysin 基因的组织特异表达 | 第79页 |
| ·免疫刺激前后 NK-lysin 转录水平表达量的变化 | 第79页 |
| ·结果 | 第79-84页 |
| ·CsNK-lysin 基因的组织表达分析 | 第79页 |
| ·免疫刺激前后 CsNK-lysin 转录水平表达量的变化 | 第79-84页 |
| ·讨论 | 第84-86页 |
| 第四章 半滑舌鳎 Midkine 基因的克隆及表达分析 | 第86-112页 |
| 第一节 半滑舌鳎抗菌肽 Midkine 基因的克隆及序列分析 | 第86-96页 |
| ·材料和方法 | 第86-89页 |
| ·实验材料 | 第86页 |
| ·半滑舌鳎 Midkine 基因全长 cDNA 的克隆 | 第86-87页 |
| ·半滑舌鳎 Midkine 基因组序列的克隆 | 第87页 |
| ·半滑舌鳎 Midkine 基因启动子序列的克隆 | 第87-88页 |
| ·半滑舌鳎 Midkine 基因的序列分析 | 第88-89页 |
| ·结果 | 第89-94页 |
| ·CsMidkinecDNA 全长序列及基因序列分析 | 第89页 |
| ·CsMidkine氨基酸序列分析 | 第89-92页 |
| ·CsMidkine系统进化分析 | 第92页 |
| ·CsMidkine 基因启动子序列分析 | 第92-94页 |
| ·讨论 | 第94-96页 |
| 第二节 半滑舌鳎 Midkine 基因的表达分析 | 第96-104页 |
| ·材料与方法 | 第96-99页 |
| ·实验材料 | 第96页 |
| ·半滑舌鳎 CsMidkine 基因的组织特异表达 | 第96-97页 |
| ·半滑舌鳎 CsMidkine 基因的发育表达分析 | 第97页 |
| ·整体原位杂交探针制备 | 第97-98页 |
| ·胚胎整体原位杂交 | 第98-99页 |
| ·结果 | 第99-102页 |
| ·CsMidkine 基因的组织表达分析 | 第99-101页 |
| ·CsMidkine 基因的发育表达分析 | 第101页 |
| ·CsMidkinemRNA 在胚胎发育中的时空表达 | 第101-102页 |
| ·讨论 | 第102-104页 |
| 第三节 半滑舌鳎 CsMidkine 基因的定点改造及原核表达 | 第104-112页 |
| ·材料与方法 | 第104-106页 |
| ·试剂、菌株及质粒 | 第104页 |
| ·引物序列的设计 | 第104-105页 |
| ·CsMidkine 基因的 SOEing PCR 合成 | 第105页 |
| ·原核表达质粒的构建 | 第105页 |
| ·含重组质粒 pET32a(+)-MK 的表达菌株的制备 | 第105-106页 |
| ·重组菌株的诱导表达 | 第106页 |
| ·融合蛋白的可溶性分析 | 第106页 |
| ·结果 | 第106-110页 |
| ·SOEing PCR 合成目的基因 | 第106-108页 |
| ·原核表达质粒的构建与鉴定 | 第108页 |
| ·重组蛋白的诱导表达和可溶性分析 | 第108-110页 |
| ·讨论 | 第110-112页 |
| 总结 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-125页 |
| 个人简历 | 第125-126页 |
| 发表的学术论文 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127页 |
