禽流感DNA疫苗的体内分布与制备工艺研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 引言 | 第9-34页 |
| 1 禽流感病毒及其研究进展 | 第9-22页 |
| ·AIV 的致病性及危害 | 第10-13页 |
| ·禽流感的公共卫生意义 | 第13-15页 |
| ·病原 | 第15-17页 |
| ·禽流感疫苗研究进展 | 第17-22页 |
| 2 核酸疫苗研究进展 | 第22-33页 |
| ·核酸疫苗的产生背景 | 第23页 |
| ·核酸疫苗的免疫机理 | 第23-25页 |
| ·DNA 疫苗的优化策略 | 第25-31页 |
| ·DNA 疫苗最新进展 | 第31-32页 |
| ·核酸疫苗的发展前景 | 第32-33页 |
| 3 本次研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 实验一 疫苗质粒在SPF 鸡体内的分布研究 | 第34-44页 |
| 1 材料与方法 | 第35-39页 |
| ·SPF 鸡 | 第35页 |
| ·菌种及质粒 | 第35页 |
| ·引物 | 第35-36页 |
| ·相关试剂 | 第36-37页 |
| ·免疫及组织器官的采集 | 第37页 |
| ·PCR 检测 | 第37页 |
| ·PCR 产物测序 | 第37-39页 |
| 2 结果检测 | 第39-40页 |
| ·PCR 结果分析 | 第39页 |
| ·DNA 测序结果分析 | 第39-40页 |
| 3 结果 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| ·核酸疫苗在动物体内的传播途径 | 第41-42页 |
| ·核酸疫苗与动物基因组整合的问题 | 第42-44页 |
| 实验二 DNA 疫苗制备工艺研究 | 第44-61页 |
| 一 工程菌发酵 | 第44-47页 |
| 1 材料 | 第44-45页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·菌种及质粒 | 第44-45页 |
| ·培养基 | 第45页 |
| 2 方法 | 第45-46页 |
| ·第一级发酵 | 第45页 |
| ·第二级发酵 | 第45页 |
| ·菌体浓度检测 | 第45页 |
| ·质粒得率的检测 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-47页 |
| ·不同发酵条件下工程菌的生长曲线 | 第46页 |
| ·对发酵后质粒得率的检测结果 | 第46-47页 |
| 二 核酸疫苗纯化及鉴定 | 第47-61页 |
| 1 细胞裂解与质粒浓缩 | 第47-49页 |
| ·试剂、溶液和仪器 | 第47-48页 |
| ·方法 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49页 |
| 2 质粒纯化 | 第49-51页 |
| ·试剂、溶液和仪器 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-50页 |
| ·结果 | 第50-51页 |
| 3 纯化质粒DNA 的鉴定 | 第51-56页 |
| ·主要试剂和材料 | 第51-52页 |
| ·方法 | 第52-53页 |
| ·结果 | 第53-56页 |
| 4 讨论 | 第56-61页 |
| ·宿主菌高密度发酵 | 第56-57页 |
| ·细胞裂解和质粒DNA 浓缩 | 第57-59页 |
| ·阴离子交换色谱纯化质粒DNA | 第59-60页 |
| ·质粒DNA 的鉴定 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简介 | 第73页 |
