| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-31页 |
| ·昆虫气味结合蛋白研究进展 | 第13-25页 |
| ·OBPs 的配体结合能力 | 第18-19页 |
| ·OBPs 的立体结构(3D structure) | 第19-22页 |
| ·OBPs 的生理功能 | 第22-24页 |
| ·其他 | 第24-25页 |
| ·应用研究展望 | 第25页 |
| ·EβF 在寄主植物-蚜虫-天敌三级营养水平的化学通讯中的作用 | 第25-27页 |
| ·蚜虫报警信息素EβF | 第25-26页 |
| ·植物次生代谢物质EβF | 第26页 |
| ·蚜虫天敌利他素EβF | 第26页 |
| ·EβF 在寄主植物-蚜虫-天敌三级营养关系中的作用 | 第26-27页 |
| ·本研究的立题依据及目的与意义 | 第27-31页 |
| ·麦长管蚜是重要的小麦害虫 | 第28页 |
| ·EβF 是麦长管蚜报警信息素的唯一成分 | 第28页 |
| ·与EβF 具有特异结合活性的气味结合蛋白ApisOBP3 | 第28-29页 |
| ·EβF 在寄主植物-蚜虫-天敌三级营养关系的化学通信中发挥着重要作用 | 第29页 |
| ·麦长管蚜嗅觉信号传递分子机制研究亟待突破 | 第29页 |
| ·本研究创新点 | 第29-31页 |
| 第二章 类ApisOBP3 蛋白的cDNA 克隆及序列分析 | 第31-52页 |
| ·材料与方法 | 第32-39页 |
| ·供试昆虫 | 第32页 |
| ·试剂及仪器 | 第32页 |
| ·RNA 提取 | 第32-33页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第33-34页 |
| ·引物 | 第34-35页 |
| ·目的序列的PCR 扩增 | 第35-36页 |
| ·PCR 产物电泳凝胶回收纯化 | 第36页 |
| ·PCR 产物回收纯化 | 第36页 |
| ·平末端PCR 产物加“A” | 第36-37页 |
| ·连接反应 | 第37页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞DH5α的制备 | 第37页 |
| ·转化DH5α | 第37-38页 |
| ·质粒提取 | 第38页 |
| ·阳性克隆鉴定 | 第38-39页 |
| ·序列测定 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-50页 |
| ·OBP3 蛋白基因片段的克隆 | 第39-42页 |
| ·OBP3 蛋白全长基因的克隆 | 第42-47页 |
| ·序列分析与蛋白的比较建模 | 第47-50页 |
| ·小结与讨论 | 第50-52页 |
| 第三章 三种蚜虫及两种天敌OBP3 原核表达载体的构建和SaveOBP3 的蛋白表达 | 第52-65页 |
| ·材料与方法 | 第52-60页 |
| ·供试昆虫 | 第52页 |
| ·质粒和菌种 | 第52页 |
| ·试剂及溶液 | 第52-54页 |
| ·主要仪器设备 | 第54页 |
| ·总RNA 提取 | 第54页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第54页 |
| ·引物 | 第54-55页 |
| ·目的序列的PCR 扩增 | 第55-56页 |
| ·PCR 产物回收纯化 | 第56页 |
| ·连接反应 | 第56页 |
| ·转化DH5α | 第56页 |
| ·质粒提取 | 第56页 |
| ·阳性克隆鉴定 | 第56页 |
| ·序列测定 | 第56页 |
| ·酶切克隆载体获得目的序列 | 第56-57页 |
| ·目的序列与表达载体的连接反应 | 第57-58页 |
| ·转化M15 细胞 | 第58-59页 |
| ·诱导表达 | 第59页 |
| ·OBP3 重组蛋白的纯化及复性 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-64页 |
| ·表达载体的构建 | 第60-62页 |
| ·麦长管蚜重组OBP3 蛋白的表达与纯化 | 第62-64页 |
| ·重组蛋白与EβF 的亲和能力测定 | 第64页 |
| ·小结与讨论 | 第64-65页 |
| 第四章 枫长镰管蚜的嗅觉行为反应测定 | 第65-69页 |
| ·材料与方法 | 第65-66页 |
| ·供试昆虫 | 第65-66页 |
| ·EβF 溶液 | 第66页 |
| ·四臂嗅觉仪 | 第66页 |
| ·实验设计 | 第66页 |
| ·数据转换和统计分析 | 第66页 |
| ·结果与分析 | 第66-67页 |
| ·小结与讨论 | 第67-69页 |
| 第五章 麦长管蚜头部嗅觉等感觉相关蛋白的鉴定 | 第69-81页 |
| ·材料与方法 | 第69-73页 |
| ·供试昆虫 | 第69页 |
| ·仪器及试剂 | 第69-70页 |
| ·麦长管蚜头部总蛋白抽提 | 第70页 |
| ·提取蛋白浓度测定 | 第70页 |
| ·IPG 胶条水化 | 第70-71页 |
| ·第一向等电聚焦电泳（IEF） | 第71页 |
| ·胶条的平衡 | 第71页 |
| ·第二向SDS-PAGE 电泳 | 第71-72页 |
| ·凝胶的固定和染色 | 第72页 |
| ·样品胶分析 | 第72页 |
| ·切取分析胶目的蛋白点 | 第72页 |
| ·目的蛋白的消化 | 第72-73页 |
| ·测序 | 第73页 |
| ·序列比对 | 第73页 |
| ·结果与分析 | 第73-78页 |
| ·小结与讨论 | 第78-81页 |
| 第六章 全文结论 | 第81-84页 |
| ·在 mRNA 水平上证实 EβF 在寄主植物-蚜虫-天敌的化学通讯中，是一个重要的化学信息物质 | 第82页 |
| ·枫长镰管蚜DplaOBP3 表达情况支持Zhou 等昆虫气味结合蛋白家族起源说 | 第82页 |
| ·OBP3 基因的出现早于昆虫纲向不同目的分散进化 | 第82页 |
| ·黑带食蚜蝇的OBP3 表达存在性二型性 | 第82页 |
| ·从麦长管蚜头部鉴定嗅觉等感觉相关蛋白的表达 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
| 作者简历 | 第100-101页 |
