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家禽Gal-6基因片段克隆与成熟肽基因表达的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
英文缩写词表第11-12页
文献综述第12-20页
1 引言第20-22页
2 材料与方法第22-38页
   ·实验材料第22-26页
     ·实验动物第22页
     ·菌株与载体第22页
     ·主要工具酶及试剂盒第22页
     ·其他相关试剂第22页
     ·标准参照物第22页
     ·缓冲液及培养基的配制第22-24页
     ·仪器设备第24-26页
   ·实验方法第26-38页
     ·家禽Gal-6的克隆及Gal-6在巢湖鸭不同组织分布情况第26-28页
     ·pGEM-T Easy-Gal-6克隆载体的构建第28-30页
     ·家禽Gal-6基因cDNA序列鉴定和氨基酸分析第30-31页
     ·巢湖麻鸭Gal-6成熟肽PCR扩增及产物的纯化回收第31页
     ·重组pGEX-4T-1-Gal-6表达载体的构建第31-35页
     ·GST-Gal-6融合蛋白的纯化第35-37页
     ·表达产物体外活性的检测第37-38页
3 结果与分析第38-47页
   ·家禽不同组织总RNA的提取第38页
   ·安徽三黄鸡、皖西白鹅Gal-6基因片段的克隆及在巢湖麻鸭不同组织的分布情况第38-40页
     ·安徽三黄鸡、皖西白鹅Gal-6基因片段的RT-PCR第39页
     ·Gal-6基因片段在巢湖麻鸭不同组织的分布情况第39-40页
   ·pGEM-T Easy-Gal-6克隆载体的构建第40-41页
     ·家禽Gal-6基因片段cDNA的克隆与鉴定第40页
     ·Gal6基因片段序列cDNA序列测定及其氨基酸序列的分析第40-41页
     ·巢湖麻鸭、皖西白鹅测序的克隆序列提交GenBank第41页
   ·巢湖麻鸭Gal6基因成熟肽巢式PCR扩增产物第41-42页
   ·重组pGEX-4T-1- Gal-6表达载体的构建第42-44页
   ·阳性转化子的诱导表达最佳时间的确定第44页
   ·温度对诱导表达的影响第44-45页
   ·融合蛋白的纯化第45页
   ·紫外分光光度计测定GST融合蛋白含量第45页
   ·表达产物体外活性的检测第45-47页
4 讨论第47-50页
   ·引物与序列分析第47页
   ·巢湖麻鸭防御素基因的克隆与组织分布第47-48页
   ·克隆载体选择第48页
   ·宿主细胞与表达载体选择第48页
   ·温度对包涵体形成的影响第48-49页
   ·活性分析第49-50页
5 结论第50-51页
参考文献第51-55页
致谢第55-56页
作者简介第56-57页
附录第57-58页

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