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蛋白质组学相关技术及其在正常人肝组织和肝癌研究中的应用

中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
缩略语索引第14-15页
第一章 前言第15-26页
 1 蛋白质组分离鉴定技术第15-17页
   ·凝胶电泳与质谱联用技术第15-16页
   ·多维液相色谱串联质谱联用技术第16-17页
 2 蛋白质分离富集技术第17-19页
   ·膜蛋白富集技术第17-18页
   ·糖蛋白糖肽富集技术第18-19页
 3 蛋白质组定量技术第19-21页
 4 本文立题依据第21-23页
   ·本论文研究背景第21-22页
   ·主要研究内容第22-23页
 参考文献第23-26页
第二章 基于2-DE的人肝脏蛋白质表达谱研究第26-54页
 1 材料与方法第27-31页
   ·主要试剂第27-28页
   ·仪器设备第28页
   ·实验方法第28-31页
 2 结果与讨论第31-50页
   ·人肝脏蛋白样品的制备第31-33页
   ·碱性pH范围2-DE分离第33-36页
   ·高分辨2-DE技术分离人肝脏蛋白质第36-37页
   ·构建高分辨的人肝脏蛋白质2-DE参考谱第37-40页
   ·切胶与蛋白质点的酶切第40-41页
   ·蛋白质点的质谱鉴定和胶上注释第41-45页
   ·鉴定蛋白质的理化性质分析第45-47页
   ·鉴定蛋白质的功能分类第47-50页
 3 小结第50-51页
 参考文献第51-54页
第三章 生物素酰肼标记-亲和素纯化富集方法的建立及在肝癌细胞膜糖蛋白研究中的应用第54-105页
 第一节 生物素酰肼标记-亲和素纯化富集方法的建立和优化第54-71页
  1 材料与方法第56-60页
   ·主要试剂第56页
   ·仪器设备第56页
   ·实验方法第56-60页
  2 结果与讨论第60-70页
   ·蛋白生物素标记-链霉亲和素纯化方法的原理第60-61页
     ·生物素酰肼试剂结构第60页
     ·生物素酰肼标记糖蛋白的反应原理第60-61页
     ·亲和素纯化富集第61页
   ·标准蛋白生物素标记-亲和素纯化条件优化第61-63页
   ·标准蛋白生物素-亲和纯化特异性考察第63-64页
   ·链霉亲和素磁珠富集蛋白洗脱条件考察第64-65页
   ·生物素化糖肽富集第65-70页
     ·生物素化糖肽富集技术路线第65-66页
     ·糖肽和糖基化位点的检测第66-68页
     ·富集技术路线结果考察分析第68-70页
  3 小结第70-71页
 第二节 生物素酰肼标记-亲和素纯化富集HepG2肝癌细胞膜糖蛋白研究第71-90页
  1 材料与方法第72-75页
   ·主要试剂第72页
   ·仪器设备第72页
   ·实验方法第72-75页
  2 结果与讨论第75-89页
   ·HepG2 细胞表面生物素酰肼标记-链霉亲和素纯化第75-76页
   ·HepG2 细胞表面膜糖蛋白表达谱研究第76-83页
     ·HepG2 细胞表面膜糖蛋白SDS-PAGE分离第76-77页
     ·RPLC-MS/MS蛋白质鉴定第77-78页
     ·鉴定蛋白质亚细胞定位分析第78-79页
     ·跨膜蛋白质分析第79-81页
     ·跨膜蛋白质糖基化修饰分析第81-83页
   ·HepG2 膜糖肽富集研究第83-89页
     ·HepG2 膜糖肽富集样品制备第83-84页
     ·HepG2 膜糖肽质谱分析第84-87页
     ·理化性质和亚细胞定位分析第87页
     ·鉴定蛋白功能分析第87-89页
  3 小结第89-90页
 参考文献第90-105页
第四章 细胞培养稳定同位素标记定量蛋白质组技术的建立及在肝癌研究中的应用第105-122页
 1 材料与方法第106-108页
   ·主要试剂第106页
   ·仪器设备第106页
   ·实验方法第106-108页
 2. 结果与讨论第108-116页
   ·肝癌细胞SILAC定量技术路线第108-109页
   ·傅立叶变换离子回旋共振质谱仪质量准确度的评估及校正第109-111页
   ·MSquant定量分析软件第111-114页
   ·肝癌细胞蛋白质定量分析结果第114页
   ·肝癌细胞差异蛋白分析第114-116页
 3 小结第116-117页
 参考文献第117-122页
全文小结第122-123页
附表第123-144页
个人简历第144页
在读期间研究成果第144-146页
致谢第146-147页

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