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甘蓝型油菜MPK4抗菌核病功能研究

摘要第1-7页
 Abstract第7-15页
第一章 绪论第15-41页
   ·植物防卫反应机制第15-23页
     ·R 基因介导的抗性—基因对基因抗性第16-17页
     ·过敏反应第17-18页
     ·活性氧类第18-19页
     ·依赖水杨酸(SA)的信号转导第19-22页
     ·依赖于茉莉酸/乙烯(JA/ET)的信号转导途径第22-23页
   ·防卫反应的复杂性第23-25页
     ·SA 和JA/ET 信号转导的相互作用第23-25页
     ·防卫反应对病原菌侵染进行灵活调节第25页
   ·油菜菌核病研究进展第25-31页
     ·菌核病菌的生物学特性第26-27页
     ·核盘菌的致病机理第27-29页
     ·油菜对菌核病抗病机制及抗病研究进展第29-31页
   ·油菜功能基因组研究进展第31-35页
     ·油菜基因组和功能基因组的研究第32-33页
     ·油菜与拟南芥重要功能基因的比较基因组学研究第33-34页
     ·油菜抗菌核病分子机制研究进展第34-35页
   ·MAPKs 在植物防卫中的作用第35-40页
     ·植物体中MAPK 的分类第35-36页
     ·MAPK 在植物体中的防卫功能第36-40页
   ·本课题研究的目的和意义第40-41页
第二章 甘蓝型油菜MPK4 cDNA 的克隆及序列分析第41-49页
   ·材料与方法第41-43页
     ·甘蓝型油菜(Brassica napus)MPK4 cDNA 的克隆第41页
     ·大肠杆菌的转化第41-42页
     ·BnMPK4 cDNA 的测序第42-43页
     ·序列分析第43页
   ·结果与分析第43-47页
     ·BnMPK4 cDNA 核苷酸序列分析第43页
     ·BnMPK4 cDNA 氨基酸序列分析第43-45页
     ·进化分析第45-47页
   ·讨论第47-49页
第三章 甘蓝型油菜 MPK4 诱导表达分析第49-56页
   ·材料和方法第50-53页
     ·植株培养第50页
     ·化学诱导处理第50页
     ·菌核培养第50-51页
     ·核盘菌接种第51页
     ·取样第51页
     ·总RNA 的提取第51页
     ·cDNA 制备第51-52页
     ·实时定量PCR第52-53页
     ·数据处理方法第53页
   ·结果第53-55页
     ·苯丙噻重氮、甲基茉莉酸和草酸诱导BnMPK4 表达的动态变化第53-54页
     ·核盘菌侵染后BnMPK4 分别在抗、感病品种的表达变化第54-55页
   ·讨论第55-56页
第四章 BnMPK4 在油菜中的过表达第56-69页
   ·材料和方法第56-63页
     ·植物表达载体pG4A 的构建第56页
     ·植物转化载体的构建第56-57页
     ·油菜的遗传转化第57页
     ·转基因油菜的PCR 检测第57-58页
     ·转基因油菜的Southern blot 鉴定第58-61页
     ·转基因油菜的Northern blot 表达鉴定第61-63页
   ·结果第63-67页
     ·植物表达载体的构建及阳性菌株的筛选和鉴定第63-64页
     ·油菜的转化和除草剂抗性苗的获得第64页
     ·转基因油菜PCR 检测第64-65页
     ·转基因油菜Southern blotting 检测第65-66页
     ·Northern blot 检测转基因植株BnMPK4 表达第66页
     ·转基因植株表现植株增大表型第66-67页
   ·讨论第67-69页
第五章 BnMPK4 转基因油菜抗菌核病鉴定第69-83页
   ·材料和方法第70-72页
     ·转基因油菜T0 代植株菌核病接种第70-71页
     ·转基因油菜T1 代植株菌核病接种第71页
     ·菌丝生长观察第71页
     ·转基因油菜T1 代植株灰霉病接种第71-72页
     ·防卫基因的表达第72页
     ·H_2O_2 积累的组织化学染色检测第72页
     ·植株H_2O_2 处理及菌核病和灰霉病接种第72页
   ·结果第72-79页
     ·转基因油菜T0 代植株抗菌核病鉴定第72-73页
     ·转基因油菜T1 代植株抗菌核病鉴定第73-74页
     ·BnMPK4 过表达抑制核盘菌的生长第74-75页
     ·转基因油菜植株抗灰霉病鉴定第75-76页
     ·BnMPK4 高水平的表达激活PDF1.2 但是抑制PR-1 的表达第76-77页
     ·过表达BnMPK4 降低H_2O_2 的积累第77-79页
   ·讨论第79-83页
第六章 全文结论第83-84页
参考文献第84-102页
致谢第102-103页
作者简历第103页

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