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罗非鱼和南方鲇生殖细胞几种分子标记的克隆和表达研究

摘要第1-12页
Abstract第12-15页
第1章 脊椎动物鱼类生殖细胞分子标记研究概况第15-33页
   ·鱼类的性别决定第15-16页
   ·鱼类的性别分化第16-17页
   ·类固醇激素对鱼类的性分化的作用第17页
   ·外源性类固醇激素对鱼类的性分化的作用第17-18页
   ·内源性类固醇激素和鱼类性分化的关系第18-19页
   ·鱼类生殖细胞分化的研究第19-20页
   ·鱼类原始生殖细胞(PGCs)的特征第20-21页
   ·鱼类原始生殖细胞(PGCs)的起源、迁移和分化第21-29页
     ·鱼类原始生殖细胞的起源第21-22页
     ·鱼类原始生殖细胞的迁移第22-23页
     ·鱼类原始生殖细胞及性腺的分化第23-25页
     ·PGCs发生和发育的有关基因及分子特征第25-29页
   ·生殖细胞的发生和分子标记第29-30页
     ·生殖细胞的特异性标记第29-30页
   ·本项目的立项依据第30-33页
第2章 南方鲇Vasa两种亚型cDNA的克隆及其表达研究第33-45页
   ·前言第33页
   ·材料和方法第33-36页
     ·材料和试剂第33-34页
     ·基因克隆第34页
     ·南方鲇Vasa部分基因组序列的确定第34页
     ·scVasa和scVasa-s序列分析与Vasa进化树的构建第34-35页
     ·南方鲇Vasa两个亚型mRNA在各组织中的分布第35页
     ·原位杂交第35-36页
     ·两个亚型mRNA在不同时期卵巢的表达第36页
   ·结果第36-41页
     ·南方鲇scVasa和scVasa-s序列第36-38页
     ·南方鲇Vasa部分基因组序列第38页
     ·南方鲇scVasa和scVasa-s序列分析和进化树分析第38-39页
     ·南方鲇scVasa和scVasa-s mRNA的组织表达模式第39-40页
     ·原位杂交第40页
     ·南方鲇scVasa和scVasa-s mRNA在VS和ORS卵巢中的表达变化第40-41页
   ·讨论第41-45页
     ·南方鲇scVasa和scVasa-s序列分析第41-42页
     ·南方鲇Vasa两个亚型的组织分布第42页
     ·南方鲇性腺中scVasa表达的细胞类型第42-43页
     ·南方鲇scVasa和scVasa-s在卵黄生成期(VS)和卵巢恢复期(ORS)的表达变化第43-45页
第3章 尼罗罗非鱼Scp3基因的克隆和表达分析第45-61页
   ·前言第45-48页
   ·材料和方法第48-51页
     ·实验动物第48页
     ·菌株、克隆载体、工具酶第48页
     ·罗非鱼Scp3基因的克隆第48-49页
       ·Scp3序列分析与Scp3进化树的构建第49-50页
     ·罗非鱼Scp3 mRNA在各组织中的分布第50页
     ·罗非鱼Scp3 mRNA在罗非鱼性腺个体发生中的表达第50页
     ·原位杂交(in situ hybridization,ISH)检测Scp3表达情况第50-51页
     ·原位杂交分析罗非鱼Scp3 mRNA在性腺个体发生中的表达第51页
   ·结果第51-56页
     ·罗非鱼Scp3序列第51-52页
     ·罗非鱼Scp3序列分析和进化树分析第52-53页
     ·罗非鱼Scp3 mRNA的组织表达模式第53-54页
     ·RT-PCR分析罗非鱼Scp3 mRNA的个体发生第54页
     ·原位杂交分析罗非鱼Scp3 mRNA的个体发生第54-55页
     ·原位杂交分析罗非鱼Scp3 mRNA药物处理性逆转性腺中的表达第55-56页
   ·讨论第56-61页
     ·罗非鱼Scp3序列及系统分析第56-57页
     ·罗非鱼Scp3的组织表达模式第57-58页
     ·RT-PCR和原位杂交对罗非鱼Scp3的系统发生分析第58页
     ·原位杂交研究Scp3在性逆转鱼性腺中的表达第58-61页
第4章 尼罗罗非鱼Figla基因的克隆和表达分析第61-75页
   ·前言第61-63页
     ·Figla研究现状第61页
     ·Figla基因结构第61页
     ·Figla蛋白结构第61页
     ·Figla基因功能第61-63页
   ·材料和方法第63-68页
     ·实验动物第63页
     ·菌株、克隆载体、工具酶第63页
     ·Figla cDNA的分子克隆第63-66页
     ·Figla在尼罗罗非鱼各组织中的表达分布第66-67页
     ·系统进化树分析第67页
     ·通过RT-PCR分析Figla表达第67页
     ·原位杂交第67-68页
   ·结果第68-72页
     ·尼罗罗非鱼Figla序列分析第68-69页
     ·系统发生分析第69-70页
     ·尼罗罗非鱼Figla组织分布第70-71页
     ·RT-PCR检测尼罗罗非鱼发育过程中Figla的表达情况第71页
     ·实时定量RT-PCR检测个体发生过程中Figla的表达情况第71-72页
     ·原位杂交 in situ hvbridization第72页
   ·讨论第72-75页
     ·所测出序列为尼罗罗非鱼Figla序列第72页
     ·Figla可用于卵母细胞特异标记第72-73页
     ·研究Figla的意义第73-75页
第5章 尼罗罗非鱼Oct-4基因的克隆和表达分析第75-87页
   ·前言第75-77页
     ·Oct4基因结构和定位第75页
     ·Oct4基因的功能第75-76页
     ·Oct4基因的调控和相互作用第76-77页
   ·材料和方法第77-80页
     ·实验动物第77页
     ·菌株、克隆载体、工具酶第77页
     ·罗非鱼Oct4基因的克隆第77-78页
     ·Oct4序列分析与Oct4进化树的构建第78页
     ·罗非鱼Oct4在雌雄成鱼的组织表达模式的研究第78-79页
     ·原位杂交(in situ hybridization,ISH)第79-80页
   ·实验结果第80-83页
     ·尼罗罗非鱼Oct4 cDNA和氨基酸全序列第80-81页
     ·序列分析和进化树的构建第81-82页
     ·罗非鱼Oct4 mRNA的组织表达模式第82页
     ·个体发生和药物处理性逆转过程中的Oct4 mRNA原位杂交检测第82-83页
   ·讨论第83-87页
     ·罗非鱼Oct4序列及其系统发生分析第83-84页
     ·Oct4的组织表达模式第84页
     ·原位杂交分析Oct4在雌雄性腺发育过程中的表达第84-87页
第6章 尼罗罗非鱼Spo11基因的克隆和表达分析第87-99页
   ·前言第87-89页
     ·基因克隆第87页
     ·基因表达第87页
     ·基因功能第87-88页
     ·基因定位第88页
     ·动物模型第88页
     ·研究意义第88-89页
   ·材料和方法第89-92页
     ·实验动物第89页
     ·菌株、克隆载体、工具酶第89页
     ·罗非鱼Spo11基因的克隆第89-90页
     ·Spo11序列分析与Spo11进化树的构建第90-91页
     ·Spo11组织分布第91页
     ·原位杂交(in situ hybridization,ISH)第91-92页
   ·结果第92-97页
     ·罗非鱼Spo11序列第92页
     ·罗非鱼Spo11序列分析和进化树分析第92-94页
     ·罗非鱼Spo11 mRNA的组织表达模式第94-95页
     ·原位杂交分析罗非鱼Spo11 mRNA的个体发生第95页
     ·原位杂交分析罗非鱼Spo11 mRNA药物处理性逆转性腺中的表达第95-96页
     ·实时定量RT-PCR检测个体发生过程中Spo11的表达情况第96-97页
   ·讨论第97-99页
     ·所测出序列为尼罗罗非鱼Spo11序列第97页
     ·Spo11可用于处于减数分裂的生殖细胞的特异标记第97-98页
     ·Spo11在性逆转鱼性腺中的表达第98-99页
结论第99-101页
参考文献第101-117页
主要的实验方法第117-129页
致谢第129-131页
在学期间所发表的文章和参加科研情况第131页

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