| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-55页 |
| 1 引言 | 第15-16页 |
| 2 流感的流行与现状 | 第16-19页 |
| ·历史上流感的爆发与流行 | 第16-17页 |
| ·禽流感的流行现状 | 第17-19页 |
| 3 禽流感的抗原变异 | 第19-24页 |
| ·抗原变异相关基因的结构与功能 | 第20页 |
| ·HA抗原变异的分子基础 | 第20-24页 |
| ·NA抗原性变异的分子生物学基础 | 第24页 |
| 4 流感病毒致病性的分子基础 | 第24-35页 |
| ·流感病毒各蛋白与致病性的关系 | 第24-33页 |
| ·流感病毒宿主特异性的分子基础 | 第33-35页 |
| 5 A型流感病毒的反向遗传技术 | 第35-41页 |
| ·流感病毒反向遗传技术的发展过程 | 第35-37页 |
| ·流感病毒反向遗传技术的应用 | 第37-41页 |
| 参考文献 | 第41-55页 |
| 实验部分 | 第55-137页 |
| 第二章 H9N2亚型禽流感病毒抗原变异分子机制的研究 | 第56-82页 |
| 1 材料和方法 | 第58-69页 |
| ·病毒 | 第58页 |
| ·感染鸡血清 | 第58页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第58页 |
| ·质粒载体和转染质粒 | 第58-59页 |
| ·引物 | 第59页 |
| ·病毒的增殖 | 第59-60页 |
| ·病毒 RNA的提取和反转录 | 第60-61页 |
| ·反转录 | 第61页 |
| ·HA和NA基因的PCR扩增 | 第61页 |
| ·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第61页 |
| ·PCR产物的回收和纯化 | 第61-62页 |
| ·HA和 NA重组质粒的克隆 | 第62-64页 |
| ·重组病毒的救获及鉴定 | 第64-66页 |
| ·嵌合质粒的构建与嵌合病毒的救获 | 第66-67页 |
| ·嵌合病毒的抗原性分析 | 第67页 |
| ·点突变质粒的构建 | 第67页 |
| ·点突变病毒的救获 | 第67-68页 |
| ·点突变病毒的抗原性分析 | 第68-69页 |
| 2 结果 | 第69-76页 |
| ·抗原变异株的筛选 | 第69-71页 |
| ·重组质粒的克隆鉴定结果 | 第71页 |
| ·病毒救获及其鉴定结果 | 第71-72页 |
| ·救获重组病毒的抗原性分析结果 | 第72页 |
| ·嵌合病毒的救获及抗原性分析 | 第72-74页 |
| ·点突变病毒的救获及抗原性分析 | 第74-76页 |
| 3 讨论 | 第76-80页 |
| 参考文献 | 第80-82页 |
| 第三章 HA蛋白糖基化对 H9N2禽流感病毒抗原性的影响 | 第82-100页 |
| 1 材料和方法 | 第83-86页 |
| ·病毒和单抗 | 第83-84页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第84页 |
| ·引物 | 第84页 |
| ·重组质粒的构建 | 第84页 |
| ·病毒的救获及鉴定 | 第84页 |
| ·病毒 TCID_(50)的测定 | 第84页 |
| ·病毒中和试验 | 第84-85页 |
| ·重组病毒的浓缩 | 第85页 |
| ·重组病毒的 SDS-PAGE电泳 | 第85页 |
| ·重组病毒及点突变病毒的 Western-Blotting | 第85页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第85-86页 |
| 2 结果 | 第86-92页 |
| ·H9N2亚型禽流感病毒与 H9单抗的反应性结果 | 第86-87页 |
| ·CK/SD/6/96和CK/GX/10/99病毒HA和NA基因双向表达质粒的构建及重组病毒的救获 | 第87页 |
| ·SDHA和 GXHA嵌合质粒的构建与嵌合病毒的救获 | 第87-88页 |
| ·点突变质粒的构建与点突变病毒救获 | 第88-89页 |
| ·重组病毒与145位氨基酸点突变病毒的中和试验 | 第89-90页 |
| ·重组病毒的间接免疫荧光试验 | 第90-91页 |
| ·重组病毒的蛋白电泳迁移率试验 | 第91-92页 |
| 3 讨论 | 第92-98页 |
| 参考文献 | 第98-100页 |
| 第四章 H9N2亚型禽流感病毒感染哺乳动物的分子基础 | 第100-136页 |
| 1 材料和方法 | 第102-108页 |
| ·病毒 | 第102页 |
| ·实验动物 | 第102页 |
| ·试剂和仪器 | 第102页 |
| ·引物 | 第102-103页 |
| ·病毒 RNA提取、反转录与 PCR | 第103页 |
| ·各基因感染性克隆的构建 | 第103页 |
| ·病毒的救获 | 第103-104页 |
| ·救获病毒的鉴定 | 第104页 |
| ·救获病毒的 EID_(50)测定 | 第104页 |
| ·病毒对 BALB/c小鼠的感染性试验 | 第104页 |
| ·嵌合质粒的构建 | 第104-105页 |
| ·嵌合病毒的救获 | 第105-106页 |
| ·嵌合病毒的小鼠感染试验 | 第106页 |
| ·PB2基因点突变质粒的构建 | 第106页 |
| ·PB2点突变病毒的救获 | 第106页 |
| ·PB2点突变病毒的小鼠感染试验 | 第106-107页 |
| ·病毒感染后小鼠各脏器的病理变化 | 第107-108页 |
| 2 结果 | 第108-129页 |
| ·毒株的筛选 | 第108-109页 |
| ·重组双向表达质粒的构建与鉴定 | 第109-111页 |
| ·病毒救获与鉴定结果 | 第111-112页 |
| ·救获病毒 EID_(50)的测定结果 | 第112页 |
| ·野生病毒和救获重组病毒对 BALB/c小鼠的感染性试验 | 第112-117页 |
| ·嵌合病毒的救获及其小鼠感染试验 | 第117-119页 |
| ·点突变病毒的救获及其小鼠感染试验 | 第119-123页 |
| ·野生病毒、亲本重组毒、单基因替换病毒对小鼠致病性的比较 | 第123-125页 |
| ·嵌合病毒和点突变病毒对小鼠致病性比较 | 第125-127页 |
| ·野生毒和救获病毒感染小鼠后病理变化 | 第127-129页 |
| 3 讨论 | 第129-133页 |
| 参考文献 | 第133-136页 |
| 全文总结 | 第136-137页 |
| 论文创新点 | 第137-138页 |
| 附录 | 第138-150页 |
| 致谢 | 第150-152页 |
| 简历 | 第152页 |
