| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-17页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶的生物学特点 | 第8-11页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶的分类及结构特点 | 第8-9页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶酶活检测方法 | 第9页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶在体外的抑菌作用 | 第9-11页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶在分子生物学方面的研究进展 | 第11-14页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶基因研究 | 第11-12页 |
| ·转β-1,3-葡聚糖酶基因植物的抗病作用 | 第12-14页 |
| ·真核基因在pET系统中表达的优化 | 第14-17页 |
| ·真核基因中的信号肽序列影响蛋白表达 | 第14页 |
| ·mRNA转录的二级结构的优化 | 第14-15页 |
| ·过量的稀有密码子也是低水平表达的一个潜在原因 | 第15-16页 |
| ·毒性基因与质粒的稳定性 | 第16-17页 |
| 引言 | 第17-19页 |
| ·研究方法及意义 | 第17-18页 |
| ·技术路线 | 第18页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-32页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·仪器与试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-32页 |
| ·茶树的不同部位及不同茶树之间的酶活比较 | 第20-21页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶阅读框的蛋白表达 | 第21-28页 |
| ·重组子的序列分析及表达体系的优化 | 第28-30页 |
| ·表达蛋白酶活性的鉴定—水杨酸比色法 | 第30页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶的抑菌试验 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-39页 |
| ·茶树的不同部位及不同茶树之间的酶活比较 | 第32-33页 |
| ·鲜叶中RNA的提取、检测与cDNA第一链的合成 | 第33页 |
| ·总RNA的提取与检测 | 第33页 |
| ·全长及阅读框的克隆与测序 | 第33-34页 |
| ·阅读框PCR及克隆 | 第33-34页 |
| ·阅读框的测序 | 第34页 |
| ·原核表达载体pET32a-c(+)-Glu载体构建与表达蛋白的鉴定 | 第34-35页 |
| ·原核表达载体pET32a-c(+)-Glu载体构建 | 第34页 |
| ·细胞总蛋白分析 | 第34-35页 |
| ·表达体系的优化 | 第35-37页 |
| ·重组子的序列分析及验证 | 第35页 |
| ·重组子的改造 | 第35-36页 |
| ·改造后的蛋白表达 | 第36-37页 |
| ·表达蛋白的酶活测定 | 第37页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶的抑菌效果 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-42页 |
| ·茶树中β-1,3-葡聚糖酶酶活比较 | 第39页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶基因阅读框的获得 | 第39页 |
| ·真核基因的原核表达 | 第39-40页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶的抑菌功能 | 第40-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| ·茶树中β-1,3-葡聚糖酶的酶活 | 第42页 |
| ·改造后β-1,3-葡聚糖酶的表达 | 第42页 |
| ·重组菌中β-1,3-葡聚糖酶的酶活检测 | 第42页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶的抑菌效果 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 附录1 英文缩写词表 | 第52-53页 |
| 附录2 网上分析信号肽结果 | 第53-55页 |
| 附录3 改造序列与原始序列比对图 | 第55-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
| 成果清单 | 第57页 |