摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-16页 |
第一章 绪论 | 第16-26页 |
·羊泰勒虫的分类 | 第16-17页 |
·羊泰勒虫的主要虫种 | 第17-21页 |
·莱氏泰勒虫 | 第17-18页 |
·绵羊泰勒虫 | 第18页 |
·分离泰勒虫 | 第18-19页 |
·隐藏泰勒虫 | 第19-20页 |
·吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫 | 第20-21页 |
·羊泰勒虫病的分子生物学检测方法 | 第21-24页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第21-23页 |
·反向线状印迹杂交技术 | 第23-24页 |
·目的和意义 | 第24-26页 |
第二章 青海血蜱和长角血蜱对吕氏泰勒虫的传播试验 | 第26-34页 |
·材料和方法 | 第27-29页 |
·原始虫种 | 第27页 |
·试验羊 | 第27页 |
·供试蜱 | 第27-28页 |
·蜱的感染 | 第28页 |
·传播试验 | 第28页 |
·长角血蜱传播组 | 第28页 |
·青海血蜱传播组 | 第28页 |
·观察内容 | 第28-29页 |
·结果 | 第29-30页 |
·长角血蜱若蜱对吕氏泰勒虫的传播试验 | 第29页 |
·长角血蜱成蜱对吕氏泰勒虫的传播试验 | 第29页 |
·青海血蜱若蜱对吕氏泰勒虫的传播试验 | 第29-30页 |
·青海血蜱成蜱对吕氏泰勒虫的传播试验 | 第30页 |
·讨论 | 第30-34页 |
第三章 青海血蜱和长角血蜱对尤氏泰勒虫的传播试验 | 第34-42页 |
·材料和方法 | 第35-37页 |
·原始虫种 | 第35页 |
·试验羊 | 第35页 |
·供试蜱 | 第35-36页 |
·蜱的感染 | 第36页 |
·传播试验 | 第36-37页 |
·长角血蜱传播组 | 第36页 |
·青海血蜱传播组 | 第36-37页 |
·观察内容 | 第37页 |
·结果 | 第37-38页 |
·长角血蜱若蜱对尤氏泰勒虫的传播试验 | 第37页 |
·长角血蜱成蜱对尤氏泰勒虫的传播试验 | 第37页 |
·青海血蜱若蜱对尤氏泰勒虫的传播试验 | 第37-38页 |
·青海血蜱成蜱对尤氏泰勒虫的传播试验 | 第38页 |
·讨论 | 第38-42页 |
第四章 两种羊泰勒虫的形态学观察和比较 | 第42-52页 |
·材料和方法 | 第43-48页 |
·寄生虫 | 第43页 |
·实验动物 | 第43页 |
·动物感染 | 第43页 |
·形态学观察 | 第43-48页 |
·结果 | 第48-50页 |
·吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫的感染结果 | 第48页 |
·吕氏泰勒虫的形态学观察 | 第48-49页 |
·梨籽形虫体 | 第48页 |
·针形虫体 | 第48-49页 |
·杆状虫体 | 第49页 |
·圆形/卵圆形虫体 | 第49页 |
·三叶草型和十字架型虫体 | 第49页 |
·尤氏泰勒虫的形态学观察 | 第49-50页 |
·梨籽形虫体 | 第49页 |
·针形虫体 | 第49-50页 |
·杆状虫体 | 第50页 |
·圆形/卵圆形虫体 | 第50页 |
·三叶草型和十字架型虫体 | 第50页 |
·吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫在形态学上的比较 | 第50页 |
·讨论 | 第50-52页 |
第五章 尤氏泰勒虫的病理学研究 | 第52-62页 |
·材料和方法 | 第53-54页 |
·尤氏泰勒虫 | 第53页 |
·青海血蜱 | 第53页 |
·实验动物 | 第53页 |
·蜱的感染 | 第53-54页 |
·动物感染 | 第54页 |
·观察内容 | 第54页 |
·结果 | 第54-55页 |
·羊的感染及生化指标的变化 | 第54页 |
·剖检眼观变化 | 第54-55页 |
·组织学变化 | 第55页 |
·讨论 | 第55-62页 |
第六章 用溶血素从感染红细胞分离羊泰勒虫裂殖子 | 第62-69页 |
·材料和方法 | 第63-65页 |
·羊泰勒虫 | 第63页 |
·实验动物 | 第63页 |
·试剂及配制 | 第63-64页 |
·虫体增殖 | 第64页 |
·充血收集 | 第64页 |
·虫体的纯化 | 第64-65页 |
·CF11柱制备 | 第64页 |
·过柱 | 第64页 |
·裂解红细胞 | 第64页 |
·裂殖子的分离 | 第64-65页 |
·不连续梯度的制备 | 第64-65页 |
·梯度离心和虫体保存 | 第65页 |
·结果 | 第65-66页 |
·虫体增殖 | 第65页 |
·CF11柱层析 | 第65-66页 |
·红细胞裂解 | 第66页 |
·裂殖子的分离 | 第66页 |
·讨论 | 第66-69页 |
第七章 吕氏泰勒虫CDNA表达文库的构建 | 第69-85页 |
·材料与方法 | 第70-79页 |
·寄生虫 | 第70页 |
·试剂 | 第70页 |
·仪器设备 | 第70页 |
·羊泰勒虫mRNA的小量纯化 | 第70-71页 |
·mRNA的检测 | 第71页 |
·吕氏泰勒虫cDNA表达文库的构建 | 第71-79页 |
·cDNA第一链的合成 | 第71-72页 |
·cDNA第二链的合成 | 第72-73页 |
·末端修饰 | 第73-75页 |
·柱层析选择大片段cDNA | 第75页 |
·大片段cDNA与载体的连接 | 第75-77页 |
·重组λ噬菌体的体外包装与铺板测定库容量 | 第77-78页 |
·噬菌体文库的扩增 | 第78-79页 |
·文库重组率的测定 | 第79页 |
·结果 | 第79-82页 |
·mRNA的纯化 | 第79-80页 |
·双链cDNA检测结果 | 第80-81页 |
·cDNA文库的基础库容和扩增库容 | 第81页 |
·用PCR鉴定cDNA文库的重组率 | 第81-82页 |
·讨论 | 第82-85页 |
·虫体的质量和纯度 | 第82-83页 |
·mRNA纯化 | 第83页 |
·cDNA文库的构建 | 第83-85页 |
第八章 吕氏泰勒虫CDNA表达文库的免疫学筛选及基因的测序和表达 | 第85-99页 |
·材料和方法 | 第86-92页 |
·材料 | 第86页 |
·宿主菌的培养 | 第86页 |
·噬菌体的准备 | 第86页 |
·免疫学筛选 | 第86-88页 |
·阳性血清的预吸附 | 第86-87页 |
·免疫筛选 | 第87-88页 |
·阳性克隆的鉴定 | 第88-90页 |
·Cre重组酶介导的质粒切除自动亚克隆 | 第88页 |
·亚克隆质粒的提取 | 第88-89页 |
·重组质粒的转化 | 第89页 |
·重组质粒的提取与鉴定 | 第89-90页 |
·重组质粒的测序 | 第90页 |
·目的基因的诱导表达 | 第90页 |
·BL21(DE3)pLysE感受态细胞的制备 | 第90页 |
·重组质粒的转化 | 第90页 |
·重组质粒的诱导表达 | 第90页 |
·Western Blotting分析 | 第90-92页 |
·溶液的配制 | 第90-91页 |
·蛋白质样品获得 | 第91页 |
·不连续SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第91页 |
·电泳 | 第91页 |
·转移印迹 | 第91-92页 |
·免疫显色 | 第92页 |
·结果 | 第92-96页 |
·阳性克隆的筛选结果 | 第92-93页 |
·阳性克隆的PCR鉴定和新基因的测序、命名和序列同源性比较 | 第93页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第93-96页 |
·重组蛋白的免疫活性分析 | 第96页 |
·讨论 | 第96-99页 |
第九章 用PCR检测吕氏泰勒虫感染方法的建立 | 第99-105页 |
·材料和方法 | 第100-102页 |
·吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫 | 第100页 |
·羊巴贝斯未定种 | 第100页 |
·绵羊无浆体 | 第100页 |
·虫体基因组DNA的分离和提纯 | 第100-101页 |
·目的DNA片段的扩增 | 第101页 |
·PCR产物的鉴定 | 第101-102页 |
·PCR方法的敏感性试验 | 第102页 |
·野外样品的检测 | 第102页 |
·结果 | 第102-104页 |
·PCR检测方法的特异性 | 第102-103页 |
·PCR检测方法的敏感性 | 第103页 |
·野外样品的PCR检测 | 第103-104页 |
·讨论 | 第104-105页 |
第十章 全文结论 | 第105-107页 |
·结论一 | 第105页 |
·结论二 | 第105页 |
·结论三 | 第105页 |
·结论四 | 第105页 |
·结论五 | 第105-106页 |
·结论六 | 第106页 |
·结论七 | 第106页 |
·结论八 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-115页 |
附录 | 第115-129页 |
致谢 | 第129-130页 |
作者简历 | 第130页 |