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我国羊泰勒虫的生物学特性研究

摘要第1-7页
Abstract第7-16页
第一章 绪论第16-26页
   ·羊泰勒虫的分类第16-17页
   ·羊泰勒虫的主要虫种第17-21页
     ·莱氏泰勒虫第17-18页
     ·绵羊泰勒虫第18页
     ·分离泰勒虫第18-19页
     ·隐藏泰勒虫第19-20页
     ·吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫第20-21页
   ·羊泰勒虫病的分子生物学检测方法第21-24页
     ·聚合酶链式反应(PCR)第21-23页
     ·反向线状印迹杂交技术第23-24页
   ·目的和意义第24-26页
第二章 青海血蜱和长角血蜱对吕氏泰勒虫的传播试验第26-34页
   ·材料和方法第27-29页
     ·原始虫种第27页
     ·试验羊第27页
     ·供试蜱第27-28页
     ·蜱的感染第28页
     ·传播试验第28页
       ·长角血蜱传播组第28页
       ·青海血蜱传播组第28页
     ·观察内容第28-29页
   ·结果第29-30页
     ·长角血蜱若蜱对吕氏泰勒虫的传播试验第29页
     ·长角血蜱成蜱对吕氏泰勒虫的传播试验第29页
     ·青海血蜱若蜱对吕氏泰勒虫的传播试验第29-30页
     ·青海血蜱成蜱对吕氏泰勒虫的传播试验第30页
   ·讨论第30-34页
第三章 青海血蜱和长角血蜱对尤氏泰勒虫的传播试验第34-42页
   ·材料和方法第35-37页
     ·原始虫种第35页
     ·试验羊第35页
     ·供试蜱第35-36页
     ·蜱的感染第36页
     ·传播试验第36-37页
       ·长角血蜱传播组第36页
       ·青海血蜱传播组第36-37页
     ·观察内容第37页
   ·结果第37-38页
     ·长角血蜱若蜱对尤氏泰勒虫的传播试验第37页
     ·长角血蜱成蜱对尤氏泰勒虫的传播试验第37页
     ·青海血蜱若蜱对尤氏泰勒虫的传播试验第37-38页
     ·青海血蜱成蜱对尤氏泰勒虫的传播试验第38页
   ·讨论第38-42页
第四章 两种羊泰勒虫的形态学观察和比较第42-52页
   ·材料和方法第43-48页
     ·寄生虫第43页
     ·实验动物第43页
     ·动物感染第43页
     ·形态学观察第43-48页
   ·结果第48-50页
     ·吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫的感染结果第48页
     ·吕氏泰勒虫的形态学观察第48-49页
       ·梨籽形虫体第48页
       ·针形虫体第48-49页
       ·杆状虫体第49页
       ·圆形/卵圆形虫体第49页
       ·三叶草型和十字架型虫体第49页
     ·尤氏泰勒虫的形态学观察第49-50页
       ·梨籽形虫体第49页
       ·针形虫体第49-50页
       ·杆状虫体第50页
       ·圆形/卵圆形虫体第50页
       ·三叶草型和十字架型虫体第50页
     ·吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫在形态学上的比较第50页
   ·讨论第50-52页
第五章 尤氏泰勒虫的病理学研究第52-62页
   ·材料和方法第53-54页
     ·尤氏泰勒虫第53页
     ·青海血蜱第53页
     ·实验动物第53页
     ·蜱的感染第53-54页
     ·动物感染第54页
     ·观察内容第54页
   ·结果第54-55页
     ·羊的感染及生化指标的变化第54页
     ·剖检眼观变化第54-55页
     ·组织学变化第55页
   ·讨论第55-62页
第六章 用溶血素从感染红细胞分离羊泰勒虫裂殖子第62-69页
   ·材料和方法第63-65页
     ·羊泰勒虫第63页
     ·实验动物第63页
     ·试剂及配制第63-64页
     ·虫体增殖第64页
     ·充血收集第64页
     ·虫体的纯化第64-65页
       ·CF11柱制备第64页
       ·过柱第64页
       ·裂解红细胞第64页
       ·裂殖子的分离第64-65页
         ·不连续梯度的制备第64-65页
         ·梯度离心和虫体保存第65页
   ·结果第65-66页
     ·虫体增殖第65页
     ·CF11柱层析第65-66页
     ·红细胞裂解第66页
     ·裂殖子的分离第66页
   ·讨论第66-69页
第七章 吕氏泰勒虫CDNA表达文库的构建第69-85页
   ·材料与方法第70-79页
     ·寄生虫第70页
     ·试剂第70页
     ·仪器设备第70页
     ·羊泰勒虫mRNA的小量纯化第70-71页
     ·mRNA的检测第71页
     ·吕氏泰勒虫cDNA表达文库的构建第71-79页
       ·cDNA第一链的合成第71-72页
       ·cDNA第二链的合成第72-73页
       ·末端修饰第73-75页
       ·柱层析选择大片段cDNA第75页
       ·大片段cDNA与载体的连接第75-77页
       ·重组λ噬菌体的体外包装与铺板测定库容量第77-78页
       ·噬菌体文库的扩增第78-79页
       ·文库重组率的测定第79页
   ·结果第79-82页
     ·mRNA的纯化第79-80页
     ·双链cDNA检测结果第80-81页
     ·cDNA文库的基础库容和扩增库容第81页
     ·用PCR鉴定cDNA文库的重组率第81-82页
   ·讨论第82-85页
     ·虫体的质量和纯度第82-83页
     ·mRNA纯化第83页
     ·cDNA文库的构建第83-85页
第八章 吕氏泰勒虫CDNA表达文库的免疫学筛选及基因的测序和表达第85-99页
   ·材料和方法第86-92页
     ·材料第86页
     ·宿主菌的培养第86页
     ·噬菌体的准备第86页
     ·免疫学筛选第86-88页
       ·阳性血清的预吸附第86-87页
       ·免疫筛选第87-88页
     ·阳性克隆的鉴定第88-90页
       ·Cre重组酶介导的质粒切除自动亚克隆第88页
       ·亚克隆质粒的提取第88-89页
       ·重组质粒的转化第89页
       ·重组质粒的提取与鉴定第89-90页
       ·重组质粒的测序第90页
     ·目的基因的诱导表达第90页
       ·BL21(DE3)pLysE感受态细胞的制备第90页
       ·重组质粒的转化第90页
       ·重组质粒的诱导表达第90页
     ·Western Blotting分析第90-92页
       ·溶液的配制第90-91页
       ·蛋白质样品获得第91页
       ·不连续SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备第91页
       ·电泳第91页
       ·转移印迹第91-92页
       ·免疫显色第92页
   ·结果第92-96页
     ·阳性克隆的筛选结果第92-93页
     ·阳性克隆的PCR鉴定和新基因的测序、命名和序列同源性比较第93页
     ·重组蛋白的诱导表达第93-96页
     ·重组蛋白的免疫活性分析第96页
   ·讨论第96-99页
第九章 用PCR检测吕氏泰勒虫感染方法的建立第99-105页
   ·材料和方法第100-102页
     ·吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫第100页
     ·羊巴贝斯未定种第100页
     ·绵羊无浆体第100页
     ·虫体基因组DNA的分离和提纯第100-101页
     ·目的DNA片段的扩增第101页
     ·PCR产物的鉴定第101-102页
     ·PCR方法的敏感性试验第102页
     ·野外样品的检测第102页
   ·结果第102-104页
     ·PCR检测方法的特异性第102-103页
     ·PCR检测方法的敏感性第103页
     ·野外样品的PCR检测第103-104页
   ·讨论第104-105页
第十章 全文结论第105-107页
   ·结论一第105页
   ·结论二第105页
   ·结论三第105页
   ·结论四第105页
   ·结论五第105-106页
   ·结论六第106页
   ·结论七第106页
   ·结论八第106-107页
参考文献第107-115页
附录第115-129页
致谢第129-130页
作者简历第130页

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