| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-27页 |
| 1. 研究目的及意义 | 第11页 |
| 2. 青枯病危害及致病机理 | 第11-13页 |
| ·T3S与青枯菌的致病性 | 第12页 |
| ·T2S与青枯菌的致病性 | 第12-13页 |
| ·其它因素与青枯菌的致病性 | 第13页 |
| 3. 抗青枯病的主要途径 | 第13-15页 |
| ·转基因抗病 | 第13-14页 |
| ·培育抗病品种 | 第14-15页 |
| ·青枯病的生物防治 | 第15页 |
| 4. 植物抗病机制 | 第15-16页 |
| 5 植物转基因抗病策略 | 第16-21页 |
| ·病原物诱导型启动子应用 | 第17-18页 |
| ·寻找病原物诱导型启动子 | 第18-19页 |
| ·病原物诱导型启动子应用 | 第19-20页 |
| ·病原物诱导型启动子应用的局限性 | 第20-21页 |
| ·融合启动子研究 | 第21页 |
| 6 超敏反应与植物抗病 | 第21-22页 |
| 7 辣椒组织培养及转基因抗病进展 | 第22-25页 |
| ·辣椒器官发生 | 第22-23页 |
| ·辣椒体细胞胚胎发生 | 第23-24页 |
| ·辣椒原生质体培养和单倍体培养 | 第24页 |
| ·辣椒不定芽的伸长 | 第24-25页 |
| ·辣椒遗传转化的研究 | 第25页 |
| 8 超敏反应相关基因的诱导表达提高植物广谱抗病力 | 第25-27页 |
| 第二章 辣椒高效遗传转化体系的建立 | 第27-39页 |
| 1. 材料、培养基及菌株 | 第27-28页 |
| ·种子消毒及无菌苗的培养 | 第27页 |
| ·辣椒幼苗汁液(pepper seedling juice，PSJ)的获得 | 第27页 |
| ·培养基及培养条件 | 第27页 |
| ·农杆菌菌株 | 第27-28页 |
| 2. 方法 | 第28-29页 |
| ·不定芽的诱导 | 第28页 |
| ·不定芽的伸长 | 第28页 |
| ·幼苗的生根与移栽 | 第28页 |
| ·辣椒对卡那霉素和对头孢霉素的抗性水平检测 | 第28页 |
| ·农杆菌转化辣椒的研究 | 第28-29页 |
| ·转基因植株检测 | 第29页 |
| 3 结果 | 第29-34页 |
| ·不定芽的诱导 | 第29-32页 |
| ·不定芽的伸长 | 第32页 |
| ·生根与栽培 | 第32-33页 |
| ·辣椒子叶对卡那霉素和头孢霉素的敏感性水平检测 | 第33-34页 |
| ·转基因植株中NPTII基因的检测 | 第34页 |
| 4 讨论 | 第34-39页 |
| 第三章 受病原物诱导的植物启动子PPPs在转基因辣椒中的活性研究 | 第39-45页 |
| 1. 材料与方法 | 第39-41页 |
| ·植物材料、菌株和质粒 | 第39页 |
| ·启动子的克隆和测序 | 第39-40页 |
| ·转化单元的构建 | 第40页 |
| ·辣椒转基因方法 | 第40页 |
| ·转基因植株检测 | 第40页 |
| ·GUS活性检测 | 第40-41页 |
| 2. 结果与分析 | 第41-44页 |
| ·转化单元的构建 | 第41-42页 |
| ·转基因植株的获得和鉴定 | 第42-43页 |
| ·青枯菌的分离 | 第43页 |
| ·转基因植株GUS活性的诱导表达 | 第43-44页 |
| 3. 讨论 | 第44-45页 |
| 第四章 植物两价诱导表达载体的构建 | 第45-53页 |
| 1. 材料与方法 | 第45-46页 |
| ·植物材料、菌株和质粒 | 第45页 |
| ·方法 | 第45页 |
| ·PCR引物、工具酶、试剂盒及测序 | 第45-46页 |
| 2. 结果与分析 | 第46-52页 |
| ·PPP3的扩增 | 第46页 |
| ·细菌诱导型启动子的克隆 | 第46-47页 |
| ·植物单价诱导表达单元中间载体的构建 | 第47-50页 |
| ·两价诱导表达载体的构建 | 第50-52页 |
| 3 讨论 | 第52-53页 |
| 第五章 两价诱导表达载体转化辣椒及检测 | 第53-58页 |
| 1. 材料与方法 | 第53-55页 |
| ·植物材料、菌株和质粒 | 第53页 |
| ·辣椒转基因方法 | 第53页 |
| ·分子试剂 | 第53页 |
| ·Southern杂交实验 | 第53-55页 |
| 2. 结果 | 第55-57页 |
| ·转基因植株目的基因检测 | 第55-56页 |
| ·探针合成及探针合成效率检测 | 第56页 |
| ·转基因抗性苗中目的基因PCR-Southern检测 | 第56-57页 |
| 3. 讨论 | 第57-58页 |
| 第六章 目的基因表达分析 | 第58-68页 |
| 1. 材料与方法 | 第58-59页 |
| ·植物材料 | 第58页 |
| ·RNA提取及RT-PCR | 第58页 |
| ·实时定量PCR(Real-time quantitative PCR,QPCR) | 第58-59页 |
| 2. 结果与分析 | 第59-66页 |
| ·目的基因的诱导表达分析 | 第60-61页 |
| ·实时定量PCR分析目的基因的诱导表达 | 第61-66页 |
| 3. 讨论 | 第66-68页 |
| 第七章 转基因辣椒抗病性分析及光合速率测定 | 第68-78页 |
| 1. 材料与方法 | 第68-69页 |
| ·植物材料 | 第68页 |
| ·青枯菌分离和接种 | 第68-69页 |
| ·酶活性测定 | 第69页 |
| ·青枯病抗性观察 | 第69页 |
| ·疫霉菌接种及抗性观察 | 第69页 |
| ·叶绿素含量测定 | 第69页 |
| ·光合速率测定 | 第69页 |
| 2. 结果与分析 | 第69-75页 |
| ·转基因辣椒青枯菌抗性分析 | 第69-72页 |
| ·转基因辣椒对疫霉菌抗性观察 | 第72-74页 |
| ·转基因辣椒生长发育及光合特征变化 | 第74-75页 |
| 3. 讨论 | 第75-78页 |
| 结论 | 第78-79页 |
| 本文主要创新点 | 第79页 |
| 后续研究思路 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-95页 |
| 缩略词表 | 第95-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 作者简介 | 第98-99页 |
| 攻读学位期间取得的学术成果 | 第99页 |
