| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 1 细胞分泌的分子机制及其调控的研究进展 | 第13-37页 |
| ·胞吐过程 | 第14-22页 |
| ·囊泡的锚定 | 第15-18页 |
| ·囊泡的激活或成熟 | 第18-19页 |
| ·钙信号的感应 | 第19-20页 |
| ·囊泡的融合 | 第20-21页 |
| ·非Ca~(2＋)依赖的分泌 | 第21-22页 |
| ·胞吞过程 | 第22-25页 |
| ·募集 | 第22-23页 |
| ·出芽 | 第23-24页 |
| ·囊泡脱离 | 第24-25页 |
| ·包被蛋白分离 | 第25页 |
| ·分泌调控的相关蛋白 | 第25-37页 |
| ·SNARE 蛋白 | 第26-28页 |
| ·Synaptotagmin | 第28-30页 |
| ·SM 蛋白 | 第30-33页 |
| ·Munc13/UNC-13 | 第33-35页 |
| ·CAPS/UNC-31 | 第35-37页 |
| 2 UNC-31 对致密核心囊泡分泌的调控机制研究 | 第37-63页 |
| ·摘要 | 第37页 |
| ·引言 | 第37-40页 |
| ·实验材料和方法 | 第40-43页 |
| ·线虫种系 | 第40页 |
| ·胚胎细胞的分离培养 | 第40页 |
| ·溶液配方 | 第40-41页 |
| ·TIRFM 图象采集及数据分析 | 第41-42页 |
| ·膜电容测量 | 第42页 |
| ·钙离子光解释放和胞内钙离子浓度的测定 | 第42页 |
| ·5-羟色胺释放的安培测量 | 第42-43页 |
| ·数据的统计 | 第43页 |
| ·实验结论 | 第43-59页 |
| ·在确定的线虫细胞上进行膜电容记录 | 第43-46页 |
| ·UNC-31 在IDA-1::GFP 标记的神经元中对RRP 的维持是必需的 | 第46-47页 |
| ·UNC-13 在IDA-1::GFP 标记的神经元中对于RRP 的维持不是必需的 | 第47-49页 |
| ·胞吐簇发相的动力学特征没有被unc-31 和unc-13 的突变基因改变 | 第49-50页 |
| ·5-羟色胺分泌对UNC-31 和UNC-13 的不同需求 | 第50-52页 |
| ·UNC-31 作用于DCVs 的锚定过程 | 第52-56页 |
| ·PMA 在unc-31 基因缺失的背景下不能加强IDA-1::GFP 标记细胞的分泌 | 第56-57页 |
| ·Forskolin 可以恢复UNC-31 缺失对囊泡分泌的损害 | 第57-59页 |
| ·讨论 | 第59-63页 |
| 3 INS-1 细胞中 Synaptotagmin I 的功能研究 | 第63-80页 |
| ·摘要 | 第63页 |
| ·引言 | 第63-64页 |
| ·实验材料和方法 | 第64-70页 |
| ·材料 | 第64-65页 |
| ·编码shRNA 质粒的构建 | 第65-67页 |
| ·细胞的培养和转染 | 第67-68页 |
| ·量子点免疫荧光标记 | 第68页 |
| ·Western 印迹 | 第68-69页 |
| ·免疫荧光检测 | 第69页 |
| ·膜电容检测 | 第69-70页 |
| ·数据分析 | 第70页 |
| ·实验结论 | 第70-78页 |
| ·在INS-1 细胞中Syt I 存在于胰岛素分泌囊泡上并且其表达被Syt I-shRNA 所抑制 | 第70-74页 |
| ·Syt I 基因表达的沉默降低了囊泡融合的钙离子敏感性导致分泌减少 | 第74-76页 |
| ·Syt I 在INS-1 细胞的快速胞吞过程中扮演了重要角色 | 第76-78页 |
| ·讨论 | 第78-80页 |
| 4 GTP 刺激和Ca~(2＋)刺激的致密核心囊泡分泌特性的研究 | 第80-113页 |
| ·摘要 | 第80页 |
| ·引言 | 第80-82页 |
| ·实验材料和方法 | 第82-87页 |
| ·质粒的构建 | 第82页 |
| ·细胞的复苏及冻存保种 | 第82-83页 |
| ·细胞的培养及转染 | 第83页 |
| ·溶液成分 | 第83-84页 |
| ·图像的采集 | 第84-85页 |
| ·数据分析 | 第85-86页 |
| ·钙离子光解释放和胞内钙离子浓度的测定 | 第86页 |
| ·膜电容测量 | 第86页 |
| ·儿茶酚胺释放的安培测量 | 第86-87页 |
| ·数据统计 | 第87页 |
| ·实验结论 | 第87-107页 |
| ·VAMP2-pHluorin 和NPY-DsRed 共定位于致密核心大囊泡 | 第87-91页 |
| ·Mastoparan 导致的LDCV 分泌事件的监测 | 第91-98页 |
| ·Mas对钙离子光解释放技术实验中的胞吐簇发成分没有影响 | 第98-100页 |
| ·Ca~(2＋)依赖的和GTP 依赖的胞吐的差异性比较 | 第100-107页 |
| ·讨论 | 第107-113页 |
| 5 总结展望 | 第113-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-135页 |
| 附录1 攻读学位期间发表的论文目录 | 第135-136页 |
| 附录2 主要缩略词 | 第136-137页 |
