| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-19页 |
| ·微生物与重金属的相互作用 | 第10-15页 |
| ·微生物的生长代谢 | 第10页 |
| ·重金属对微生物的毒害性 | 第10-11页 |
| ·微生物对重金属的抗性机制 | 第11-15页 |
| ·微量元素铜的胞内代谢 | 第15-16页 |
| ·细胞对铜的摄入 | 第15页 |
| ·铜在细胞内的分配 | 第15页 |
| ·细胞内铜的排出 | 第15页 |
| ·铜为多种酶的辅酶 | 第15-16页 |
| ·细胞色素C氧化酶 | 第16页 |
| ·金属硫蛋白 | 第16页 |
| ·蛋白的鉴定技术 | 第16-18页 |
| ·测定蛋白质氨基酸序列 | 第17页 |
| ·氨基酸组成分析 | 第17页 |
| ·肽质量指纹谱鉴定蛋白质 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-36页 |
| ·材料 | 第19-23页 |
| ·菌株和载体质粒 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19-20页 |
| ·使用的试剂 | 第20页 |
| ·仪器与设备 | 第20-21页 |
| ·试剂配制 | 第21-23页 |
| ·方法 | 第23-36页 |
| ·Penicillium janthinillum GXCR诱导型铜结合蛋白的提取 | 第23-25页 |
| ·Sephadex G-75柱层析 | 第25-27页 |
| ·DEAE—52纤维素柱层析 | 第27-30页 |
| ·Penicillium janthinillum GXCR非诱导型铜结合蛋白的提取及纯化——金属亲和柱柱层析 | 第30-32页 |
| ·不同CuSO_4浓度胞内蛋白铜含量测定 | 第32页 |
| ·不同诱导时间细胞内蛋白铜含量测定 | 第32-33页 |
| ·GXCR铜结合蛋白的分析与鉴定 | 第33-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-58页 |
| ·Penicillium janthinillum GXCR非诱导型铜结合蛋白的分离纯化 | 第36页 |
| ·非诱导型铜结合蛋白的鉴定 | 第36-52页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析铜结合蛋白 | 第36-38页 |
| ·MALDI-TOF-MS鉴定 | 第38-43页 |
| ·蛋白质数据库同源性检索 | 第43-52页 |
| ·Penicillium janthinillum GXCR诱导型铜结合蛋白的分离纯化 | 第52-56页 |
| ·诱导时间与胞内铜含量的关系 | 第52页 |
| ·诱导浓度与胞内铜含量的关系 | 第52-53页 |
| ·Sephadex G-75柱层析分离 | 第53-55页 |
| ·DEAE-52柱层析分离 | 第55-56页 |
| ·诱导型铜结合蛋白的鉴定 | 第56-58页 |
| ·蛋白标准曲线的测定 | 第56页 |
| ·SDS-PAGE电泳测定铜结合蛋白的表观分子量 | 第56-57页 |
| ·MALDI-TOF-MS鉴定 | 第57-58页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第58-62页 |
| ·青霉真菌胞内粗蛋白的提取 | 第58页 |
| ·诱导条件 | 第58-59页 |
| ·葡聚糖凝胶的处理 | 第59页 |
| ·离子交换层析的阶段式洗脱 | 第59-60页 |
| ·原子吸收样品的处理 | 第60页 |
| ·质谱分析 | 第60-61页 |
| ·结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间论文发表情况 | 第69页 |
