| 致谢 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| 1.文献综述 哺乳动物胚胎干细胞的研究概况及应用前景 | 第12-37页 |
| ·早期胚胎来源的ES细胞研究概况 | 第12-16页 |
| ·PGCs来源的EG/ES细胞研究研究概况 | 第16-17页 |
| ·胚胎干细胞的生物学特性 | 第17-24页 |
| ·胚胎干细胞的生物学特性 | 第17-19页 |
| ·多能性或全能性 | 第17-18页 |
| ·ES细胞表面抗原 | 第18页 |
| ·自我更新能力 | 第18页 |
| ·高度增殖能力 | 第18-19页 |
| ·定向诱导分化 | 第19页 |
| ·维持胚胎干细胞生物学特性的分子机制 | 第19-21页 |
| ·LIF及其相应信号通路对ES细胞多能性的维持 | 第20页 |
| ·BMP信号通路 | 第20页 |
| ·Wnt信号转导途径 | 第20页 |
| ·Oct4对ES细胞多能性维持的作用 | 第20页 |
| ·Nanog与ES细胞多能性维持 | 第20-21页 |
| ·胚胎干细胞生物学特性检测方法 | 第21-24页 |
| ·碱性磷酸酶(AKP)活性的检测 | 第21页 |
| ·胚胎的阶段特异性细胞表面抗原(SSEA-1) | 第21-22页 |
| ·Oct-4活性 | 第22页 |
| ·萄糖磷酸异构酶(GPI)检测 | 第22页 |
| ·染色体G带技术 | 第22页 |
| ·其它分子标记技术 | 第22-23页 |
| ·体内体外分化 | 第23页 |
| ·嵌合体 | 第23页 |
| ·核移植 | 第23-24页 |
| ·ES细胞分离建系的方法 | 第24-28页 |
| ·ES细胞分离材料的获取及处理方法 | 第24-26页 |
| ·早期胚胎的处理方法 | 第24-25页 |
| ·早期胚胎的处理方法 | 第25-26页 |
| ·ES细胞的培养 | 第26-28页 |
| ·ES细胞培养的分化抑制物 | 第26页 |
| ·常用基础培养基 | 第26-27页 |
| ·常用添加物 | 第27页 |
| ·ES细胞的克隆和传代 | 第27页 |
| ·ES细胞冷冻和解冻 | 第27-28页 |
| ·影响ES细胞分离和克隆的因素 | 第28-33页 |
| ·饲养层对ES细胞分离培养的影响 | 第28页 |
| ·遗传背景对ES细胞分离培养的影响 | 第28-29页 |
| ·胚龄对ES细胞建系的影响 | 第29-30页 |
| ·分离培养方式对ES细胞建系的影响 | 第30-31页 |
| ·培养液对ES细胞分离和克隆的影响 | 第31-33页 |
| ·基础培养基的选择 | 第31-32页 |
| ·条件培养液 | 第32页 |
| ·细胞因子和生长因子 | 第32-33页 |
| ·胚胎的贴壁增殖对ES细胞分离和克隆的影响 | 第33页 |
| ·ES细胞的应用研究及存在问题 | 第33-37页 |
| ·应用研究 | 第33-35页 |
| ·存在的问题 | 第35-37页 |
| 2.引言 | 第37-38页 |
| 3.材料与方法 | 第38-44页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·试验动物 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38-39页 |
| ·主要溶液配制 | 第39页 |
| ·细胞培养液 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-44页 |
| ·小鼠胎儿的获取及处理 | 第39页 |
| ·兔胎儿的获取及处理 | 第39页 |
| ·兔胚胎获取及处理 | 第39-40页 |
| ·饲养层的制备 | 第40-41页 |
| ·兔胚胎的培养 | 第41-44页 |
| 4.结果 | 第44-47页 |
| ·不同胚龄对ES细胞分离的影响 | 第44页 |
| ·不同饲养层对兔ES细胞分离的效果 | 第44页 |
| ·不同胚胎处理方式对兔ES细胞的分离效果 | 第44-45页 |
| ·不同LIF浓度对ES细胞分离的影响 | 第45页 |
| ·胰岛素的添加对ES细胞分离的影响 | 第45页 |
| ·大鼠心肌细胞条件培养液对兔ES细胞分离、传代的影响 | 第45-46页 |
| ·兔类ES细胞的鉴定 | 第46-47页 |
| 5.讨论 | 第47-49页 |
| ·胚龄对ES细胞分离和克隆的影响 | 第47页 |
| ·饲养层对ES细胞分离和克隆的影响 | 第47页 |
| ·不同胚胎处理方法对兔ES细胞分离与克隆的影响 | 第47-48页 |
| ·培养液对ES细胞分离和克隆的影响 | 第48-49页 |
| 6.小结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| ABSTRACT | 第57-59页 |
| 附图 | 第59-60页 |