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可溶修饰型绿色荧光蛋白(smGFP)的原核表达纯化及多克隆抗体制备

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-8页
1 引言第8-19页
   ·绿色荧光蛋白(GFP)的概述第8-9页
   ·GFP 的结构特点第9-12页
     ·GFP 的结构第9-11页
       ·一级结构第9-10页
       ·晶体结构第10-11页
     ·GFP 的生化特性第11页
     ·GFP 的发光机制第11-12页
     ·GFP 的光谱特性第12页
   ·GFP 的应用第12-14页
     ·GFP 的应用特点第12-13页
     ·GFP 的应用现状第13-14页
   ·GFP 的改进第14-15页
   ·smGFP 的获得及特点第15-16页
   ·多克隆抗体技术第16-19页
     ·抗原和抗体第16-17页
     ·多克隆抗体的制备第17页
     ·多克隆抗体与单克隆抗体的比较第17-18页
     ·多克隆抗体的应用第18-19页
2 材料与方法第19-26页
   ·实验材料第19页
     ·动物材料第19页
     ·质粒和菌种第19页
     ·化学试剂第19页
     ·引物第19页
   ·实验方法第19-26页
     ·原核表达载体pET-28a(+)-smGFP 的构建第19-22页
       ·目的基因smGFP 的制备第19-20页
       ·pET-28a(+)载体片段的制备第20-21页
       ·目的基因smGFP 片段与载体pET-28a(+)的连接第21页
       ·重组质粒pET-28a(+)-smGFP 的鉴定第21-22页
     ·smGFP 基因在大肠杆菌中的诱导表达第22页
     ·smGFP 融合蛋白的分离纯化第22-23页
     ·smGFP 融合蛋白抗体的制备及抗体效价的检测第23-26页
       ·smGFP 融合蛋白免疫BALB/c 小鼠第23页
       ·smGFP 融合蛋白抗体的ELISA 检测第23-24页
       ·smGFP 融合蛋白抗体的Western-blot 检测第24-26页
3 结果第26-32页
   ·原核表达质粒pET-28a(+)-smGFP 的构建第26-27页
   ·原核表达质粒pET-28a(+)-smGFP 的鉴定第27-28页
   ·smGFP 基因在大肠杆菌中的诱导表达第28-29页
   ·smGFP 融合蛋白的纯化第29页
   ·smGFP 融合蛋白抗体的制备及抗体效价的检测第29-32页
     ·BALB/c 小鼠的免疫效果第29-30页
     ·smGFP 融合蛋白抗体效价的ELISA 检测第30-31页
     ·smGFP 融合蛋白抗体效价的Western-blot 检测第31-32页
4 讨论第32-33页
   ·原核表达质粒pET-28a(+)-smGFP 的构建第32页
   ·smGFP 基因在大肠杆菌中的表达纯化第32页
   ·smGFP 融合蛋白抗体的效价检测第32-33页
5 结论第33-34页
参考文献第34-38页
附图:smGFP 基因序列及其编码的氨基酸序列第38-39页
致谢第39页

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