| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-28页 |
| ·食品级表达系统 | 第11-16页 |
| ·食品级微生物简介 | 第11页 |
| ·食品级表达系统概念的提出 | 第11-13页 |
| ·食品级表达系统研究进展 | 第13-16页 |
| ·食品级表达系统的应用 | 第16页 |
| ·枯草芽孢杆菌表达系统 | 第16-20页 |
| ·芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌 | 第16-17页 |
| ·枯草芽孢杆菌的基因工程和表达系统 | 第17-19页 |
| ·枯草芽孢杆菌的蛋白质分泌 | 第19-20页 |
| ·本文的立题背景与研究内容 | 第20-22页 |
| ·课题的立题背景与意义 | 第20-21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-28页 |
| 第二章 染色体整合型枯草芽孢杆菌食品级表达系统的构建 | 第28-47页 |
| ·引言 | 第28-29页 |
| ·材料与方法 | 第29-36页 |
| ·实验材料 | 第29-31页 |
| ·实验方法 | 第31-36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-44页 |
| ·野生型枯草芽孢杆菌DAL 表达单元的克隆和整合质粒PXY2 的构建 | 第38页 |
| ·质粒PXY2 对D-丙氨酸缺陷型枯草芽孢杆菌宿主Q8928 的互补 | 第38页 |
| ·耐热-半乳糖苷酶（BGAB）基因BGAB 的克隆和质粒PY020-BGAB 的构建 | 第38-41页 |
| ·食品级整合载体和食品级表达系统的构建 | 第41页 |
| ·食品级重组表达菌株的生长曲线 | 第41页 |
| ·食品级重组表达菌株的遗传稳定性 | 第41-43页 |
| ·BGAB 在食品级表达系统中的表达 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-47页 |
| 第三章 基于THETA 型复制子质粒的枯草芽孢杆菌食品级表达系统的构建* | 第47-75页 |
| ·引言 | 第47-48页 |
| ·材料与方法 | 第48-52页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-52页 |
| ·结果与讨论 | 第52-72页 |
| ·新型亚克隆载体的构建 | 第52页 |
| ·整合型敲除质粒PXCMR1 的构建 | 第52-57页 |
| ·枯草芽孢杆菌食品级D-丙氨酸缺陷型宿主菌株的构建 | 第57-59页 |
| ·食品级表达质粒的构建 | 第59-63页 |
| ·BGAB 表达质粒的构建及其在食品级表达系统中的表达 | 第63-66页 |
| ·重组质粒的稳定性研究 | 第66-68页 |
| ·基于RCM 类型复制子的食品级表达质粒的构建和稳定性研究简述 | 第68-71页 |
| ·讨论 | 第71-72页 |
| ·本章小结 | 第72页 |
| 参考文献 | 第72-75页 |
| 第四章 耐热-半乳糖苷酶在枯草芽孢杆菌中的分泌表达 | 第75-98页 |
| ·引言 | 第75-76页 |
| ·材料与方法 | 第76-80页 |
| ·实验材料 | 第76-79页 |
| ·实验方法 | 第79-80页 |
| ·结果与讨论 | 第80-95页 |
| ·SEC 分泌途径信号肽的克隆和分泌表达质粒PMKSIGBGA801 的构建 | 第80-82页 |
| ·BGAB 在枯草芽孢杆菌168 (PMKSIGBGA801)中的分泌表达尝试 | 第82-86页 |
| ·TAT 分泌途径信号肽的克隆和分泌表达质粒PMKSIGBGA803 的构建 | 第86-89页 |
| ·BGAB 在枯草芽孢杆菌168 (PMKSIGBGA803)中的分泌表达 | 第89-90页 |
| ·分泌表达质粒PMASIGBGA805 的构建 | 第90页 |
| ·BGAB 在枯草芽孢杆菌168 (PMKSIGBGA805)中的分泌表达 | 第90-94页 |
| ·讨论 | 第94-95页 |
| ·本章小结 | 第95页 |
| 参考文献 | 第95-98页 |
| 第五章 枯草芽孢杆菌蛋白质分泌途径改造初探 | 第98-113页 |
| ·引言 | 第98-99页 |
| ·材料与方法 | 第99-102页 |
| ·实验材料 | 第99-101页 |
| ·实验方法 | 第101-102页 |
| ·结果与讨论 | 第102-113页 |
| ·大肠杆菌PGA 表达质粒PMAEPGA 的构建 | 第102页 |
| ·大肠杆菌PGA 在枯草芽孢杆菌中的分泌表达 | 第102-103页 |
| ·大肠杆菌SEC 分泌途径分子马达蛋白SECA 编码基因的克隆 | 第103-104页 |
| ·大肠杆菌SECA 在BL21(DE3)中的过量表达和纯化 | 第104-105页 |
| ·枯草芽孢杆菌168 株中引入大肠杆菌SECA 以及PGA 在重组菌株中的分泌表达研究 | 第105-108页 |
| ·枯草芽孢杆菌168 株中引入大肠杆菌SECA 和SECB 以及PGA 在重组菌株中的分泌表达研究 | 第108-111页 |
| ·讨论 | 第111-113页 |
| ·本章小结 | 第113页 |
| 参考文献 | 第113-116页 |
| 主要结论 | 第116-118页 |
| 创新点 | 第118-119页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
