| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-53页 |
| 1 昆虫蜕皮的激素调控机理 | 第16-19页 |
| ·保幼激素及其功能 | 第16-17页 |
| ·蜕皮激素及其功能 | 第17-18页 |
| ·蜕皮激素和保幼激素的协调作用 | 第18-19页 |
| ·蜕皮激素调控的分子机理 | 第19页 |
| 2.蜕皮激素受体复合体 | 第19-28页 |
| ·蜕皮激素受体(EcR) | 第20-21页 |
| ·过剩气门蛋白(USP | 第21-22页 |
| ·蜕皮激素受体复合体 | 第22页 |
| ·蜕皮激素受体复合体的激素结合功能 | 第22-27页 |
| ·蜕皮激素受体E区域中的配体结合口袋 | 第22-23页 |
| ·蜕皮激素受体E区域中和二聚化相关的界面 | 第23-24页 |
| ·ECR游离状态下和二聚化相关的界面 | 第23页 |
| ·复合体状态下E区域中和二聚化相关的界面 | 第23-24页 |
| ·USP中具有配体结合功能的区域对和二聚化相关界面的影响 | 第24页 |
| ·E区域中和辅助因子作用相关的凹槽 | 第24页 |
| ·E区域中各功能区之间的信号传导机制 | 第24-27页 |
| ·功能反应子的DNA结合功能区 | 第27页 |
| ·EcR的N—端和C—端调节区域 | 第27页 |
| ·复合体的基因调控,共激活子,辅抑制子 | 第27-28页 |
| 3 蜕皮激素受体复合体在生化方面的研究 | 第28页 |
| 4 蜕皮激素受体复合体对USP的选择性 | 第28-29页 |
| 5.蜕皮激素受体复合体的生物学功能 | 第29-31页 |
| ·昆虫蜕皮激素诱导的系列事件 | 第29-30页 |
| ·来源于果蝇EcR和USP突变的信息 | 第30-31页 |
| ·EcR突变体 | 第30-31页 |
| ·USP突变体 | 第31页 |
| 6 蜕皮激素受体复合体的组织特异性表达和反应 | 第31-37页 |
| ·表皮 | 第31-33页 |
| ·EcRs | 第32-33页 |
| ·USPs | 第33页 |
| ·翅的器官芽和翅 | 第33-34页 |
| ·唾液腺和丝腺 | 第34页 |
| ·中枢神经系统 | 第34-37页 |
| ·视觉系统 | 第37页 |
| ·卵子发生 | 第37页 |
| 7 昆虫对EcR和USP的调控 | 第37-39页 |
| ·蜕皮激素对EcR和USP的调控 | 第37-39页 |
| ·蜕皮激素对EcR的调控 | 第37-38页 |
| ·蜕皮激素对USP的调控 | 第38-39页 |
| ·保幼激素对EcR和USP的调控 | 第39页 |
| ·其它因子对EcR和USP的的调控 | 第39页 |
| 8 节肢动物中EcR和USP的进化 | 第39-42页 |
| ·节肢动物中EcR的进化 | 第39-40页 |
| ·节肢动物中EcR伴体的进化 | 第40-42页 |
| 9 蜕皮激素受体的研究与应用 | 第42-47页 |
| ·蜕皮激素受体在医学中的研究和应用 | 第42-44页 |
| ·医学中对以EcR为基础的基因转换的研究 | 第42-43页 |
| ·以EcR为基础的基因转换在医学中的应用 | 第43-44页 |
| ·治疗蛋白的表达 | 第43页 |
| ·基因治疗 | 第43页 |
| ·功能基因组 | 第43-44页 |
| ·药物发现 | 第44页 |
| ·组织工程学 | 第44页 |
| ·以EcR为基础的基因转换在农业中的研究和应用 | 第44-47页 |
| ·在农业中对以EcR为基础的基因转换的研究 | 第44-45页 |
| ·以EcR为基础的基因转换在农学中的应用 | 第45-46页 |
| ·功能基因组 | 第45页 |
| ·转基因植物 | 第45-46页 |
| ·蜕皮激素类似物:物种特异性杀虫剂 | 第46-47页 |
| 10.蜕皮激素类杀虫剂及其作用机理 | 第47-50页 |
| ·蜕皮激素类杀虫剂 | 第47页 |
| ·蜕皮激素类杀虫剂的作用机理 | 第47-48页 |
| ·蜕皮激素类杀虫剂的抗药性研究状况 | 第48-50页 |
| 11.本研究的目的意义 | 第50-53页 |
| 第二章 小菜蛾对虫酰肼的室内抗性筛选 | 第53-59页 |
| 1.材料与方法 | 第54-55页 |
| ·供试昆虫及饲养 | 第54-55页 |
| ·供试药剂 | 第55页 |
| ·毒力生物测定 | 第55页 |
| ·抗性筛选方法 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-57页 |
| ·小菜蛾对虫酰肼的抗性筛选 | 第55-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 第三章 小菜蛾虫酰肼抗性品系对不同药剂的交互抗性 | 第59-67页 |
| 1.材料与方法 | 第61-62页 |
| ·供试昆虫及饲养 | 第61页 |
| ·供试药剂 | 第61页 |
| ·毒力生物测定 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-64页 |
| 3 讨论 | 第64-67页 |
| 第四章 小菜蛾抗性和敏感品系的生物适合度 | 第67-75页 |
| 1 材料与方法 | 第69页 |
| ·供试昆虫 | 第69页 |
| ·抗感品系生物适合度的比较 | 第69页 |
| 2 结果与分析 | 第69-72页 |
| ·小菜蛾抗、感品系的生长发育和繁殖特征比较 | 第69-71页 |
| ·小菜蛾抗、感品系实验种群世代生命表 | 第71-72页 |
| 3 讨论 | 第72-75页 |
| 第五章 小菜蛾对虫酰肼抗性的代谢机理研究 | 第75-85页 |
| 1.材料与方法 | 第77-80页 |
| ·供试小菜蛾 | 第77页 |
| ·试剂 | 第77-78页 |
| ·毒力生物测定 | 第78页 |
| ·离体酶活性测定 | 第78-80页 |
| ·酶液制备 | 第78页 |
| ·酯酶活性测定 | 第78-79页 |
| ·多功能氧化酶的O-脱甲基活力测定 | 第79页 |
| ·谷胱甘肽S—转移酶(GST)活性测定 | 第79页 |
| ·几丁质酶活力测定 | 第79-80页 |
| ·胶态几丁质的制备 | 第79页 |
| ·对二甲氨基苯甲醛(DMAB)的配制 | 第79页 |
| ·四硼酸钾溶液的配制 | 第79页 |
| ·几丁质酶的活力测定 | 第79-80页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第80页 |
| ·芳基酰氨酶活性测定 | 第80页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第80页 |
| ·数据统计分析 | 第80页 |
| 2 结果与分析 | 第80-82页 |
| ·增效剂的增效作用 | 第80-81页 |
| ·小菜蛾抗、感品系的相关酶活力 | 第81-82页 |
| 3 讨论 | 第82-85页 |
| 第六章 小菜蛾对虫酰肼的抗性遗传分析 | 第85-97页 |
| 1 材料与方法 | 第86-90页 |
| ·小菜蛾亲本 | 第86-87页 |
| ·药剂 | 第87页 |
| ·毒理测定方法 | 第87页 |
| ·杂交实验组合与性连锁分析 | 第87-88页 |
| ·离体酶活性测定 | 第88-90页 |
| ·酶液制备 | 第88页 |
| ·酯酶活性测定 | 第88页 |
| ·多功能氧化酶的O-脱甲基活力测定 | 第88-89页 |
| ·谷胱甘肽S—转移酶(GST)活性测定 | 第89页 |
| ·几丁质酶活力测定 | 第89-90页 |
| ·胶态几丁质的制备 | 第89页 |
| ·对二甲氨基苯甲醛(DMAB)的配制 | 第89页 |
| ·四硼酸钾溶液的配制 | 第89页 |
| ·几丁质酶的活力测定 | 第89页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第89-90页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第90页 |
| ·数据统计分析 | 第90页 |
| 2 结果 | 第90-95页 |
| ·小菜蛾对虫酰肼抗性的遗传分析 | 第90-94页 |
| ·虫酰肼对小菜蛾抗、感品系雌雄个体的毒力比较 | 第94页 |
| ·小菜蛾抗、感品系雌雄个体不同酶活力的比较 | 第94-95页 |
| 3 讨论 | 第95-97页 |
| 第七章 小菜蛾对虫酰肼抗性相关基因的克隆和序列分析 | 第97-117页 |
| 1 材料与方法 | 第98-105页 |
| ·供试昆虫 | 第98页 |
| ·总RNA的制备 | 第98-99页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第99页 |
| ·引物设计及抗性相关基因cDNA片段的PCR扩增 | 第99-101页 |
| ·PCR产物的纯化、克隆及测序测定 | 第101-103页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第101页 |
| ·连接反应 | 第101-102页 |
| ·转化 | 第102页 |
| ·单克隆的挑选 | 第102页 |
| ·小量质粒DNA的提取与酶切检测 | 第102页 |
| ·序列测定 | 第102-103页 |
| ·蜕皮激素受体基因全长的克隆 | 第103-105页 |
| ·总RNA的提取 | 第103页 |
| ·RACE cDNA模板的合成 | 第103-104页 |
| ·蜕皮激素受体的5’-RACE和3’-RACE引物 | 第104页 |
| ·3’-RACE体系 | 第104页 |
| ·5’-RACE扩增体系 | 第104-105页 |
| ·小菜蛾EcR基因分子树的构建和系统发育分析 | 第105页 |
| 2 结果 | 第105-115页 |
| ·小菜蛾相关基因的克隆 | 第105-109页 |
| ·小菜蛾延长因子的cDNA片段克隆和基因对比 | 第105-106页 |
| ·小菜蛾体内蜕皮激素受体cNDA片段的克隆和序列对比 | 第106-107页 |
| ·小菜蛾体内过剩气门蛋cDNA片段的克隆和序列比较 | 第107-108页 |
| ·小菜蛾体内多巴脱羧酶cDNA片段的克隆和序列比较 | 第108-109页 |
| ·小菜蛾体内幼虫表皮蛋白cDNA片段的克隆和序列对比 | 第109页 |
| ·小菜蛾体内蜕皮激素受体基因全长的克隆和氨基酸序列对比 | 第109-113页 |
| ·小菜蛾EcR基因分子树的构建和系统发育分析 | 第113-115页 |
| 3.讨论 | 第115-117页 |
| 第八章 小菜蛾蜕皮激素受体功能点突变的发现 | 第117-128页 |
| 1.材料与方法 | 第118-119页 |
| ·供试昆虫 | 第118页 |
| ·RNA的提取 | 第118页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第118页 |
| ·引物设计及全长序列的克隆 | 第118-119页 |
| ·PCR产物的纯化、克隆及测序测定 | 第119页 |
| ·氨基酸替换的进一步验证 | 第119页 |
| ·氨基酸替换与小菜蛾对虫酰肼的抗性连锁的验证 | 第119页 |
| ·三维结构模拟 | 第119页 |
| 2.结果 | 第119-127页 |
| ·小菜蛾抗、感品系EcR全长的序列比较 | 第119-122页 |
| ·P512S氨基酸替换的进一步验证 | 第122-125页 |
| ·氨基酸替换与小菜蛾对虫酰肼的抗性连锁的验证 | 第125-126页 |
| ·小菜蛾对虫酰肼抗感品系蜕皮激素受体三维结构比较 | 第126-127页 |
| 3.讨论 | 第127-128页 |
| 全文总结 | 第128-129页 |
| 参考文献 | 第129-163页 |
| 附录:攻读博士学位期间学术论文的发表情况 | 第163-164页 |
| 致谢 | 第164页 |
