中文摘要 | 第1-14页 |
ABSTRACT | 第14-16页 |
第一章 综述 | 第16-22页 |
1 乙型脑炎病毒的流行特征及病毒基因组全长的分子特征 | 第16-17页 |
2 乙脑病毒反向遗传系统研究状况 | 第17-18页 |
·国外研究状况 | 第17页 |
·国内研究状况 | 第17-18页 |
3 乙脑病毒感染性克隆构建的限制因素 | 第18-20页 |
·载体选择 | 第18-19页 |
·其它因素 | 第19-20页 |
4 乙脑病毒反向遗传技术的研究意义与目的 | 第20-21页 |
·基础研究 | 第20页 |
·载体开发 | 第20页 |
·重组疫苗研发 | 第20-21页 |
5 小结 | 第21页 |
Introduction | 第21-22页 |
第二章 乙型脑炎病毒GZ56毒株的扩增纯化及全基因组序列特征研究 | 第22-43页 |
摘要 | 第22页 |
1 前言 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-33页 |
·毒株及细胞 | 第23页 |
·主要试剂及工具酶 | 第23页 |
·主要仪器及器材 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-33页 |
·取毒JEV GZ56 | 第24页 |
·传毒JEV GZ56 | 第24-25页 |
·JEV GZ56毒株滴度测定 | 第25页 |
·JEV GZ56毒株空斑纯化 | 第25-26页 |
·JEV GZ56毒株单斑纯化 | 第26页 |
·JEV GZ56毒株总RNA的提取 | 第26-27页 |
·JEV GZ56毒株cDNA的合成 | 第27页 |
·JEV GZ56毒株全基因组扩增与测序 | 第27-31页 |
·JEV GZ56毒株全基因组序列比对、同源性分析及系统进化分析 | 第31-33页 |
3 结果 | 第33-39页 |
·JEV GZ56毒株引起的细胞病变 | 第33页 |
·JEV GZ56毒株的病毒滴度测定及其产生的空斑形态 | 第33-34页 |
·JEV GZ56毒株16个片段的扩增 | 第34-35页 |
·JEV GZ56毒株全基因组序列特征 | 第35页 |
·JEV GZ56毒株全基因组序列同源性分析 | 第35-36页 |
·JEV GZ56毒株E蛋白位点分析 | 第36页 |
·JEV GZ56毒株全基因组序列系统进化分析 | 第36-39页 |
4 讨论 | 第39-42页 |
Abstract | 第42-43页 |
第三章 乙型脑炎病毒XZ0934毒株的扩增纯化及全基因组序列特征研究 | 第43-59页 |
摘要 | 第43页 |
1 前言 | 第43-44页 |
2 材料与方法 | 第44-49页 |
·毒株及细胞 | 第44页 |
·主要试剂及工具酶 | 第44页 |
·主要仪器及器材 | 第44页 |
·实验方法 | 第44-49页 |
·取毒JEV XZ0934 | 第44页 |
·传毒JEV XZ0934 | 第44页 |
·JEV XZ0934毒株滴度测定 | 第44-45页 |
·JEV XZ0934毒株空斑纯化 | 第45页 |
·JEV XZ0934毒株单斑纯化 | 第45页 |
·JEV XZ0934毒株总RNA的提取 | 第45页 |
·JEV XZ0934毒株cDNA的合成 | 第45页 |
·JEV XZ0934毒株全基因组扩增与测序 | 第45-47页 |
·JEV XZ0934毒株全基因组序列比对、同源性分析及系统进化分析 | 第47-49页 |
3 结果 | 第49-56页 |
·JEV XZ0934毒株引起的细胞病变 | 第49页 |
·JEV XZ0934毒株的病毒滴度测定及其产生的空斑形态 | 第49-50页 |
·JEV GZ56毒株16个片段的扩增 | 第50-51页 |
·JEV XZ0934毒株全基因组序列特征 | 第51页 |
·JEV XZ0934毒株全基因组序列同源性分析 | 第51-52页 |
·JEV XZ0934毒株E蛋白位点分析 | 第52页 |
·JEV XZ0934毒株全基因组序列系统进化分析 | 第52-56页 |
4 讨论 | 第56-58页 |
Abstract | 第58-59页 |
第四章 克隆载体构建及JEV XZ0934毒株基因组CDNA克隆 | 第59-80页 |
摘要 | 第59页 |
1 前言 | 第59页 |
2 材料与方法 | 第59-70页 |
·主要试剂及工具酶 | 第59-60页 |
·主要试剂配制 | 第60页 |
·主要仪器及器材 | 第60-61页 |
·实验方法 | 第61-70页 |
·多克隆基因片段MCS的提取及双酶切 | 第61-62页 |
·商品化质粒pACYC177的提取及双酶切 | 第62页 |
·连接改造后的pACYC与多克隆基因片段MCS | 第62-63页 |
·鉴定连接载体pACYC-MCS | 第63-64页 |
·JEV XZ0934毒株4个大片段的扩增 | 第64-65页 |
·双酶切载体pACYC-MCS及JEV XZ0934毒株4大片段 | 第65-68页 |
·将JEV XZ0934毒株的基因组全长分四段连接至载体pACYC-MCS上 | 第68-70页 |
3 结果 | 第70-76页 |
·多克隆基因片段MCS的设计 | 第70页 |
·双酶切pACYC177及多克隆基因片段MCS | 第70-71页 |
·载体pACYC-MCS的鉴定 | 第71页 |
·JEV XZ0934毒株4个大片段扩增 | 第71-74页 |
·JEV XZ0934毒株全基因组连接至改造载体pACYC-MCS上 | 第74-76页 |
4. 讨论 | 第76-79页 |
Abstract | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-83页 |
在读期间发表论文目录 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
个人简况及联系方式 | 第85-87页 |