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我国新分离乙型脑炎病毒基因组cDNA克隆的研究

中文摘要第1-14页
ABSTRACT第14-16页
第一章 综述第16-22页
 1 乙型脑炎病毒的流行特征及病毒基因组全长的分子特征第16-17页
 2 乙脑病毒反向遗传系统研究状况第17-18页
   ·国外研究状况第17页
   ·国内研究状况第17-18页
 3 乙脑病毒感染性克隆构建的限制因素第18-20页
   ·载体选择第18-19页
   ·其它因素第19-20页
 4 乙脑病毒反向遗传技术的研究意义与目的第20-21页
   ·基础研究第20页
   ·载体开发第20页
   ·重组疫苗研发第20-21页
 5 小结第21页
 Introduction第21-22页
第二章 乙型脑炎病毒GZ56毒株的扩增纯化及全基因组序列特征研究第22-43页
 摘要第22页
 1 前言第22-23页
 2 材料与方法第23-33页
   ·毒株及细胞第23页
   ·主要试剂及工具酶第23页
   ·主要仪器及器材第23-24页
   ·实验方法第24-33页
     ·取毒JEV GZ56第24页
     ·传毒JEV GZ56第24-25页
     ·JEV GZ56毒株滴度测定第25页
     ·JEV GZ56毒株空斑纯化第25-26页
     ·JEV GZ56毒株单斑纯化第26页
     ·JEV GZ56毒株总RNA的提取第26-27页
     ·JEV GZ56毒株cDNA的合成第27页
     ·JEV GZ56毒株全基因组扩增与测序第27-31页
     ·JEV GZ56毒株全基因组序列比对、同源性分析及系统进化分析第31-33页
 3 结果第33-39页
   ·JEV GZ56毒株引起的细胞病变第33页
   ·JEV GZ56毒株的病毒滴度测定及其产生的空斑形态第33-34页
   ·JEV GZ56毒株16个片段的扩增第34-35页
   ·JEV GZ56毒株全基因组序列特征第35页
   ·JEV GZ56毒株全基因组序列同源性分析第35-36页
   ·JEV GZ56毒株E蛋白位点分析第36页
   ·JEV GZ56毒株全基因组序列系统进化分析第36-39页
 4 讨论第39-42页
 Abstract第42-43页
第三章 乙型脑炎病毒XZ0934毒株的扩增纯化及全基因组序列特征研究第43-59页
 摘要第43页
 1 前言第43-44页
 2 材料与方法第44-49页
   ·毒株及细胞第44页
   ·主要试剂及工具酶第44页
   ·主要仪器及器材第44页
   ·实验方法第44-49页
     ·取毒JEV XZ0934第44页
     ·传毒JEV XZ0934第44页
     ·JEV XZ0934毒株滴度测定第44-45页
     ·JEV XZ0934毒株空斑纯化第45页
     ·JEV XZ0934毒株单斑纯化第45页
     ·JEV XZ0934毒株总RNA的提取第45页
     ·JEV XZ0934毒株cDNA的合成第45页
     ·JEV XZ0934毒株全基因组扩增与测序第45-47页
     ·JEV XZ0934毒株全基因组序列比对、同源性分析及系统进化分析第47-49页
 3 结果第49-56页
   ·JEV XZ0934毒株引起的细胞病变第49页
   ·JEV XZ0934毒株的病毒滴度测定及其产生的空斑形态第49-50页
   ·JEV GZ56毒株16个片段的扩增第50-51页
   ·JEV XZ0934毒株全基因组序列特征第51页
   ·JEV XZ0934毒株全基因组序列同源性分析第51-52页
   ·JEV XZ0934毒株E蛋白位点分析第52页
   ·JEV XZ0934毒株全基因组序列系统进化分析第52-56页
 4 讨论第56-58页
 Abstract第58-59页
第四章 克隆载体构建及JEV XZ0934毒株基因组CDNA克隆第59-80页
 摘要第59页
 1 前言第59页
 2 材料与方法第59-70页
   ·主要试剂及工具酶第59-60页
   ·主要试剂配制第60页
   ·主要仪器及器材第60-61页
   ·实验方法第61-70页
     ·多克隆基因片段MCS的提取及双酶切第61-62页
     ·商品化质粒pACYC177的提取及双酶切第62页
     ·连接改造后的pACYC与多克隆基因片段MCS第62-63页
     ·鉴定连接载体pACYC-MCS第63-64页
     ·JEV XZ0934毒株4个大片段的扩增第64-65页
     ·双酶切载体pACYC-MCS及JEV XZ0934毒株4大片段第65-68页
     ·将JEV XZ0934毒株的基因组全长分四段连接至载体pACYC-MCS上第68-70页
 3 结果第70-76页
   ·多克隆基因片段MCS的设计第70页
   ·双酶切pACYC177及多克隆基因片段MCS第70-71页
   ·载体pACYC-MCS的鉴定第71页
   ·JEV XZ0934毒株4个大片段扩增第71-74页
   ·JEV XZ0934毒株全基因组连接至改造载体pACYC-MCS上第74-76页
 4. 讨论第76-79页
 Abstract第79-80页
参考文献第80-83页
在读期间发表论文目录第83-84页
致谢第84-85页
个人简况及联系方式第85-87页

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