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二维差异色谱结合同位素亲和标记—质谱鉴定用于蛋白质组相对定量方法的研究与应用

前言第1-17页
第一章 基于ICAT技术和LC-MALDI-TOF-TOF质谱的蛋白质组相对定量方法的建立第17-31页
 1.前言第17-18页
 2.实验材料与方法第18-21页
   ·仪器与实验材料第18-19页
   ·BSA的实验方法第19-20页
     ·蛋白的标记和酶解第19页
     ·BSA酶解物的常压阳离子交换色谱纯化第19页
     ·BSA酶解物的常压亲和色谱纯化第19页
     ·生物素的切除第19-20页
     ·微升级一维反相毛细管液相色谱分离与在线自动收集点靶第20页
     ·质谱条件第20页
   ·五种蛋白混合物的实验方法第20-21页
 3.结果与讨论第21-30页
   ·BSA实验第21-27页
     ·蛋白的标记与酶解第21-23页
     ·一维反相毛细管液相色谱分离与在线自动收集点靶第23-25页
     ·MALDI-TOF-TOF质谱鉴定第25-26页
     ·准确度与重现性的考察第26-27页
   ·五种蛋白混合物实验——动态范围的考察第27-30页
 4.小结第30-31页
第二章 ICAT技术和LC-MALDI-TOF-TOF质谱的蛋白质组相对定量方法在肝再生研究中的初步应用第31-43页
 1 前言第31页
 2.实验部分第31-34页
   ·仪器与试剂第31页
   ·实验方法第31-34页
     ·肝脏再生动物模型的建立第31页
     ·肝脏总蛋白的提取与浓度测定第31-32页
     ·蛋白的变性、还原、标记和酶解第32页
     ·强阳离子交换色谱分离与馏分收集条件第32页
     ·生物素亲和色谱纯化、酸解第32页
     ·毛细管反相液相色谱分离第32-33页
     ·质谱条件第33-34页
 3.结果与讨论第34-42页
   ·总蛋白的提取与浓度测定第34-35页
   ·强阳离子交换色谱第35-36页
   ·纳升级毛细管液相色谱反相分离第36页
   ·蛋白定性、定量结果分析第36-41页
   ·差异蛋白的生物学意义第41页
   ·技术方法学的讨论第41-42页
 4.小结第42-43页
第三章 二维差异色谱结合ICAT技术的蛋白质相对定量方法的建立与应用第43-55页
 1.前言第43页
 2 实验部分第43-45页
   ·仪器和试剂第43-44页
   ·实验方法第44-45页
     ·大鼠肝脏总蛋白质的提取与前处理第44页
     ·整体蛋白两维色谱预分离第44-45页
     ·色谱图的差异比对分析第45页
     ·cICAT定量分析第45页
 3.结果与讨论第45-54页
   ·整体蛋白质两维色谱预分离第45-49页
   ·利用反相色谱图对差异蛋白的分析比较第49-50页
   ·针对反相馏分的cICAT定量分析第50-54页
 4 小结第54-55页
结语第55-56页
参考文献第56-60页
研究生期间发表的文章第60-61页
致谢第61-62页
附录第62-67页

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