前言 | 第1-17页 |
第一章 基于ICAT技术和LC-MALDI-TOF-TOF质谱的蛋白质组相对定量方法的建立 | 第17-31页 |
1.前言 | 第17-18页 |
2.实验材料与方法 | 第18-21页 |
·仪器与实验材料 | 第18-19页 |
·BSA的实验方法 | 第19-20页 |
·蛋白的标记和酶解 | 第19页 |
·BSA酶解物的常压阳离子交换色谱纯化 | 第19页 |
·BSA酶解物的常压亲和色谱纯化 | 第19页 |
·生物素的切除 | 第19-20页 |
·微升级一维反相毛细管液相色谱分离与在线自动收集点靶 | 第20页 |
·质谱条件 | 第20页 |
·五种蛋白混合物的实验方法 | 第20-21页 |
3.结果与讨论 | 第21-30页 |
·BSA实验 | 第21-27页 |
·蛋白的标记与酶解 | 第21-23页 |
·一维反相毛细管液相色谱分离与在线自动收集点靶 | 第23-25页 |
·MALDI-TOF-TOF质谱鉴定 | 第25-26页 |
·准确度与重现性的考察 | 第26-27页 |
·五种蛋白混合物实验——动态范围的考察 | 第27-30页 |
4.小结 | 第30-31页 |
第二章 ICAT技术和LC-MALDI-TOF-TOF质谱的蛋白质组相对定量方法在肝再生研究中的初步应用 | 第31-43页 |
1 前言 | 第31页 |
2.实验部分 | 第31-34页 |
·仪器与试剂 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-34页 |
·肝脏再生动物模型的建立 | 第31页 |
·肝脏总蛋白的提取与浓度测定 | 第31-32页 |
·蛋白的变性、还原、标记和酶解 | 第32页 |
·强阳离子交换色谱分离与馏分收集条件 | 第32页 |
·生物素亲和色谱纯化、酸解 | 第32页 |
·毛细管反相液相色谱分离 | 第32-33页 |
·质谱条件 | 第33-34页 |
3.结果与讨论 | 第34-42页 |
·总蛋白的提取与浓度测定 | 第34-35页 |
·强阳离子交换色谱 | 第35-36页 |
·纳升级毛细管液相色谱反相分离 | 第36页 |
·蛋白定性、定量结果分析 | 第36-41页 |
·差异蛋白的生物学意义 | 第41页 |
·技术方法学的讨论 | 第41-42页 |
4.小结 | 第42-43页 |
第三章 二维差异色谱结合ICAT技术的蛋白质相对定量方法的建立与应用 | 第43-55页 |
1.前言 | 第43页 |
2 实验部分 | 第43-45页 |
·仪器和试剂 | 第43-44页 |
·实验方法 | 第44-45页 |
·大鼠肝脏总蛋白质的提取与前处理 | 第44页 |
·整体蛋白两维色谱预分离 | 第44-45页 |
·色谱图的差异比对分析 | 第45页 |
·cICAT定量分析 | 第45页 |
3.结果与讨论 | 第45-54页 |
·整体蛋白质两维色谱预分离 | 第45-49页 |
·利用反相色谱图对差异蛋白的分析比较 | 第49-50页 |
·针对反相馏分的cICAT定量分析 | 第50-54页 |
4 小结 | 第54-55页 |
结语 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
研究生期间发表的文章 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
附录 | 第62-67页 |