| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 缩写词 | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-46页 |
| 第一节 Cyt b-559 的结构与功能及其研究进展 | 第13-27页 |
| 一、Cyt b-559 的结构与性质 | 第13-20页 |
| 1、蛋白和基因 | 第13-16页 |
| 2、 Cyt b-559 的其它组分 | 第16-18页 |
| 3、物理化学特性 | 第18-19页 |
| 4、Cyt b-559 的生物进化特征 | 第19页 |
| 5、Cyt b-559 在PSII 反应中心内的位置 | 第19-20页 |
| 二、Cyt b-559 的功能 | 第20-24页 |
| 1、Cyt b-559 在PSII 电子传递中的作用 | 第20-22页 |
| 2、Cyt b-559 在水氧化中的作用 | 第22页 |
| 3、Cyt b-559 的FQR 功能 | 第22-23页 |
| 4、Cyt b-559 的超氧化物歧化酶活性 | 第23页 |
| 5、Cyt b-559在PSII组装中的作用 | 第23-24页 |
| 6、Cyt b-559 的质体醌氧化酶的作用 | 第24页 |
| 三、研究Cyt b-559 的热门方法 | 第24-27页 |
| 1、EPR 谱 | 第24页 |
| 2、共振拉曼光谱和傅立叶变换红外光谱 | 第24-25页 |
| 3、穆斯堡尔谱 | 第25页 |
| 4、时间分辨光谱技术 | 第25页 |
| 5、分子生物学方法 | 第25-27页 |
| 第二节 衣藻及其叶绿体遗传转化研究 | 第27-34页 |
| 一、衣藻的基本结构及其功能 | 第27-29页 |
| 1. 细胞壁 | 第27-28页 |
| 2. 细胞核和核基因组 | 第28页 |
| 3. 叶绿体和叶绿体基因组 | 第28-29页 |
| 4、其它结构 | 第29页 |
| 二、衣藻的叶绿体转化研究 | 第29-32页 |
| 1、叶绿体转化 | 第30-31页 |
| 2、衣藻叶绿体转化 | 第31-32页 |
| 三、衣藻的光合研究进展 | 第32-34页 |
| 第三节 定点突变技术及其在Cyt b-559 研究中的应用 | 第34-46页 |
| 一、基于PCR的点突变 | 第35-38页 |
| 二、PCR介导的随机突变 | 第38-39页 |
| 三、PCR诱变法与其他诱变法的比较 | 第39-40页 |
| 四、点突变所用寡核苷酸的设计特点 | 第40页 |
| 五、通过突变研究蛋白质功能的原则 | 第40-42页 |
| 六、结论 | 第42页 |
| 七、突变技术在Cyt b-559功能研究中的应用 | 第42-46页 |
| 第二章 本论文的立题依据、目的和意义及拟采取的技术路线 | 第46-48页 |
| 一、立题依据、目的及意义 | 第46-47页 |
| 二、拟采取的技术路线 | 第47-48页 |
| 第三章 材料与方法 | 第48-72页 |
| 第一节 实验材料 | 第48-53页 |
| 一、植物材料 | 第48页 |
| 二、菌株和质粒 | 第48页 |
| 三、使用的药品和常用试剂 | 第48-53页 |
| 第二节 实验方法 | 第53-72页 |
| 一、质粒DNA 的小量提取（碱裂解法 ） | 第53页 |
| 二、质粒的大量提取 | 第53-55页 |
| 三、酶切，连接反应 | 第55-56页 |
| 四、DNA 的回收纯化 | 第56-57页 |
| 五、大肠杆菌感受态的制备 | 第57-58页 |
| 六、质粒DNA 的转化 | 第58页 |
| 七、利用大引物突变法进行定点突变 | 第58-61页 |
| 八、基因枪微弹轰击衣藻叶绿体转化 | 第61-63页 |
| 九、转化后衣藻的过渡培养 | 第63页 |
| 十、基因转化后衣藻的筛选培养 | 第63页 |
| 十一、衣藻DNA的提取 | 第63-64页 |
| 十二、Southern 杂交（地高辛标记法） | 第64-66页 |
| 十三、衣藻类囊体膜蛋白多肽组分的样品处理 | 第66页 |
| 十四、衣藻类囊体膜蛋白多肽组分的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第66-68页 |
| 十五、Western 杂交 | 第68-69页 |
| 十六、衣藻突变体的生长速率的测定 | 第69页 |
| 十七、叶绿素含量测定 | 第69-70页 |
| 1、衣藻细胞中的叶绿素测定 | 第69-70页 |
| 2、类囊体膜蛋白的叶绿素测定 | 第70页 |
| 十八、吸收光谱的测定 | 第70页 |
| 十九、放氧速率的测定 | 第70页 |
| 二十、衣藻荧光动力学参数的测定 | 第70-71页 |
| 二十一、强光照射的实验方法 | 第71-72页 |
| 第四章 结果与分析 | 第72-105页 |
| 第一节 突变载体构建前的准备 | 第72-77页 |
| 第二节 衣藻Cytb-559α链的定点突变 | 第77-84页 |
| 一、突变体R18G的载体构建 | 第77-79页 |
| 二、突变体R18E 的载体构建 | 第79-81页 |
| 三、突变体S24F的载体构建 | 第81-84页 |
| 第三节 衣藻Cyt b-559α链突变体R18G 和R18E 的筛选、分子鉴定和生理生化分析 | 第84-92页 |
| 一、衣藻突变体R18G 和R18E 的抗生素筛选 | 第84-85页 |
| 二、衣藻突变体R18G 和R18E 的分子鉴定 | 第85-86页 |
| 三、衣藻突变体R18G 和R18E 类囊体膜蛋白多肽组分的SDS-PAGE、Western blotting和吸收光谱 | 第86-88页 |
| 四、衣藻野生型和突变体R18G 和R18E 生长速度比较 | 第88-89页 |
| 五、衣藻突变体R18G和R18E的荧光参数的测定 | 第89页 |
| 六、衣藻突变体R18G和R18E的PSII放氧活性的测定 | 第89-91页 |
| 七、衣藻突变体R18G 和R18E 对强光的敏感性 | 第91-92页 |
| 第四节 衣藻Cyt b-559α链突变体524F 的筛选、分子鉴定和生理生化分析 | 第92-98页 |
| 一、衣藻突变体524F的抗生素筛选 | 第92页 |
| 二、衣藻突变体524F的分子鉴定 | 第92-93页 |
| 三、衣藻突变体524F 类囊体膜蛋白多肽组分的SDS-PAGE、Western blotting 和吸收光谱 | 第93-94页 |
| 四、衣藻野生型和突变体524F生长速度的比较 | 第94-96页 |
| 五、衣藻突变体524F 的荧光参数和PSII 放氧活性的测定 | 第96页 |
| 六、衣藻突变体524F对强光的敏感性 | 第96-98页 |
| 第五节 讨论 | 第98-105页 |
| 一、Cyt b-559 α链中Arg~(18) 和Ser~(24)的突变对衣藻细胞生长的影响 | 第99页 |
| 二、Cyt b-559 α链中Arg~(18) 和Ser~(24)的突变对PSII活性的影响 | 第99-100页 |
| 三、Cyt b-559 α链中Arg~(18) 和Ser~(24)的突变对其光保护功能的影响 | 第100-102页 |
| 四、Cyt b-559 α链中Arg~(18) 和Ser~(24)的突变影响其功能的机理推测 | 第102-105页 |
| 第五章 结论及未来工作展望 | 第105-108页 |
| 一、结论 | 第105-106页 |
| 二、今后工作的设想 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 个人简历 | 第118-120页 |
