根癌农杆菌介导的中国石竹遗传转化体系的建立及几丁质酶基因的导入
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第8-18页 |
| ·石竹属植物概述 | 第8页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第8-13页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化的机理 | 第9-10页 |
| ·影响农杆菌转化效率的因素 | 第10-13页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化研究进展 | 第13页 |
| ·几丁质酶基因的研究和应用 | 第13-16页 |
| ·植物几丁质酶的生物学特性 | 第14页 |
| ·转几丁质酶基因抗病研究 | 第14-15页 |
| ·几丁质酶的研究前景及存在问题 | 第15-16页 |
| ·石竹属植物基因工程研究进展 | 第16-18页 |
| ·石竹属植物组织培养的研究 | 第16-17页 |
| ·石竹属植物遗传转化研究 | 第17-18页 |
| 第2章 引言 | 第18-19页 |
| 第3章 材料与方法 | 第19-27页 |
| ·实验材料 | 第19-21页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·菌株和质粒 | 第19页 |
| ·主要仪器设备及试剂 | 第19页 |
| ·常用试剂 | 第19-21页 |
| ·基本培养基 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-27页 |
| ·培养条件 | 第21页 |
| ·无菌材料的获得与培养 | 第21页 |
| ·再生体系的建立 | 第21-22页 |
| ·转化方法和转化条件的研究 | 第22-24页 |
| ·转基因植株的检测 | 第24-27页 |
| 第4章 结果与分析 | 第27-40页 |
| ·石竹高频再生体系的优化 | 第27-31页 |
| ·外植体在培养基上的摆放位置对芽的诱导的影响 | 第27页 |
| ·不同激素浓度配比对叶片再生频率的影响 | 第27-28页 |
| ·预培养对石竹分化的影响 | 第28-29页 |
| ·再生植株的继代增殖 | 第29-30页 |
| ·根的诱导 | 第30-31页 |
| ·遗传转化体系的建立 | 第31-38页 |
| ·Km筛选压的确定 | 第31-32页 |
| ·Cef抑菌浓度的确定 | 第32页 |
| ·Cef对外植体再生影响 | 第32-33页 |
| ·Km对生根的影响 | 第33-34页 |
| ·不同共培养基对转化的影响 | 第34页 |
| ·乙酰丁香酮对转化的影响 | 第34-35页 |
| ·侵染液对转化的影响 | 第35页 |
| ·预培养时间对转化的影响 | 第35-36页 |
| ·农杆菌浓度和侵染时间对转化的影响 | 第36页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第36-37页 |
| ·延迟筛选培养对转化的影响 | 第37页 |
| ·gus基因瞬时表达的检测 | 第37-38页 |
| ·几丁质酶基因的导入和转基因植株的检测 | 第38-40页 |
| ·转几丁质酶基因植株的获得 | 第38页 |
| ·生根检测 | 第38页 |
| ·PCR检测 | 第38-39页 |
| ·田间性状检测 | 第39-40页 |
| 第5章 讨论 | 第40-44页 |
| ·外植体的选择 | 第40页 |
| ·建立高频再生体系对转化研究的重要性 | 第40-41页 |
| ·玻璃化和离体开花现象 | 第41页 |
| ·影响转化频率的因素探讨 | 第41-44页 |
| ·预培养对转化的影响 | 第41-42页 |
| ·共培养基对转化的影响 | 第42页 |
| ·乙酰丁香酮的使用 | 第42页 |
| ·延迟筛选培养对转化的影响 | 第42-43页 |
| ·侵染后对Km抗性的增强 | 第43-44页 |
| 第6章 小结 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 附录 | 第53页 |
