| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 一、引言 | 第7-26页 |
| 1 鼻咽癌的研究进展 | 第7-16页 |
| ·非遗传因素 | 第7-8页 |
| ·遗传因素 | 第8-16页 |
| ·鼻咽癌中常见的癌基因的改变 | 第9-12页 |
| ·鼻咽癌中常见抑癌基因的改变 | 第12-14页 |
| ·抑癌基因在鼻咽癌发生过程中的相互影响 | 第14页 |
| ·与鼻咽癌发生相关的酶基因改变 | 第14-16页 |
| 2 NM23 基因研究进展 | 第16-25页 |
| ·nm23 基因结构及功能 | 第16-20页 |
| ·nm23 基因的发现 | 第16-17页 |
| ·nm23-H1 基因结构 | 第17-18页 |
| ·nm23 基因功能 | 第18-20页 |
| ·nm23 基因表达,缺失和突变与肿瘤关系的研究 | 第20-25页 |
| ·nm23 基因蛋白表达与肿瘤关系 | 第20-24页 |
| ·nm23 基因突变或缺失与肿瘤关系的研究 | 第24-25页 |
| ·nm23 基因与细胞凋亡 | 第25页 |
| ·问题与展望 | 第25页 |
| 3 研究目的与意义 | 第25-26页 |
| 二、材料和方法 | 第26-42页 |
| 1 鼻咽癌病例与对照组标本来源 | 第26页 |
| 2 免疫组织化学检测分析 | 第26-29页 |
| ·实验材料与仪器 | 第26-27页 |
| ·试剂盒 | 第26-27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·仪器设备 | 第27页 |
| ·实验方法与步骤 | 第27-29页 |
| 3 荧光定量RT-PCR 分析 | 第29-35页 |
| ·实验材料与仪器 | 第29-31页 |
| ·试剂盒 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29-30页 |
| ·引物 | 第30页 |
| ·仪器设备 | 第30-31页 |
| ·实验方法与步骤 | 第31-35页 |
| ·鼻咽癌组织及慢性咽炎鼻咽组织RNA 提取 | 第31-32页 |
| ·RNA 含量测定 | 第32页 |
| ·RNA 电泳检测 | 第32页 |
| ·两步法荧光定量RT-PCR | 第32-34页 |
| ·荧光定量RT-PCR 产物电泳 | 第34-35页 |
| 4 NM23-H1 基因外显子PCR-SSCP 检测 | 第35-42页 |
| ·实验材料与仪器 | 第35-37页 |
| ·试剂盒 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35-36页 |
| ·引物 | 第36页 |
| ·仪器设备 | 第36-37页 |
| ·实验方法与步骤 | 第37-42页 |
| ·鼻咽癌组织及慢性咽炎鼻咽部组织DNA 提取 | 第37页 |
| ·DNA 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第37-38页 |
| ·PCR 扩增nm23-H1 基因外显子 | 第38页 |
| ·PCR 产物电泳 | 第38-39页 |
| ·PCR 产物回收 | 第39页 |
| ·不对称PCR 扩增各外显子 | 第39页 |
| ·不对称PCR 产物非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染 | 第39-42页 |
| 三、结果 | 第42-54页 |
| 1 免疫组织化学检测结果 | 第42-45页 |
| ·nm23-H1 免疫组化结果观察 | 第42-44页 |
| ·鼻咽癌组织与慢性咽炎鼻咽部组织nm23-H1 蛋白表达水平比较 | 第44页 |
| ·鼻咽癌患者nm23-H1 基因表达与年龄、性别和转移的关系 | 第44-45页 |
| 2 荧光定量RT-PCR 分析 | 第45-50页 |
| ·RNA 含量测定 | 第45-46页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR 结果 | 第46-47页 |
| ·荧光定量RT-PCR 产物电泳 | 第47-48页 |
| ·nm23-H1 mRNA 相对定量检测结果 | 第48-50页 |
| ·nm23-H1 mRNA 表达分析 | 第50页 |
| 3 NM23-H1 基因外显子PCR-SSCP 突变检测 | 第50-54页 |
| ·nm23-H1 基因组织标本DNA 提取电泳结果 | 第50-51页 |
| ·PCR 扩增nm23-H1 基因各外显子情况 | 第51-52页 |
| ·nm23-H1 外显子单链多态性分析(SSCP) | 第52-54页 |
| 四、讨论 | 第54-60页 |
| 1 应用免疫组化技术观察鼻咽癌NM23-H1 蛋白表达情况 | 第54-55页 |
| 2 实时荧光定量RT-PCR 分析鼻咽癌NM23-H1 MRNA 转录水平 | 第55-57页 |
| 3 鼻咽癌NM23-H1 基因外显子PCR-SSCP 突变检测 | 第57-60页 |
| 五、总结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 中文详细摘要 | 第70-73页 |