中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
缩略语/符号说明 | 第11-12页 |
前言 | 第12-17页 |
研究现状、成果 | 第12-15页 |
研究目的、方法 | 第15-17页 |
一、甲状腺激素受体新亚型TRβ△的转录活性研究 | 第17-40页 |
·对象和方法 | 第17-29页 |
·试剂 | 第17页 |
·pETDuet-TRβ1和pETDuet-TRβ△重组质粒提取 | 第17-18页 |
·pcDNA3.1-TRβ1真核表达载体构建 | 第18-22页 |
·pcDNA3.1-TRβ△真核表达载体构建 | 第22-25页 |
·含有PAL TRE的pGL3-Promoter报告基因载体构建 | 第25-27页 |
·质粒共转染COS-7细胞 | 第27-29页 |
·结果 | 第29-35页 |
·重组质粒pcDNA3.1-TRβ1的构建和鉴定 | 第29-30页 |
·重组质粒pcDNA3.1-TRβ△的构建和鉴定 | 第30-31页 |
·含有PAL TRE的pGL3-Promoter报告基因载体构建和鉴定 | 第31-33页 |
·TRβ△通过TRE对报告基因表达的增强作用及对T_3反应性 | 第33-35页 |
·讨论 | 第35-38页 |
·TRE的结构与类型 | 第35-36页 |
·pGL3-Promoter/TRE报告基因载体的构建 | 第36页 |
·pGL3-Promoter报告基因载体启动子及转染细胞的选择 | 第36-37页 |
·甲状腺激素受体通过TRE对报告基因表达的增强作用及对T3反应性 | 第37-38页 |
·小结 | 第38-40页 |
二、P-box氨基酸序列与TRβ△转录激活作用关系的研究 | 第40-60页 |
·对象和方法 | 第40-49页 |
·试剂 | 第40页 |
·pcDNA3.1-TRβ△mut1真核表达载体构建 | 第40-42页 |
·pcDNA3.1-TRβ△mut2真核表达载体构建 | 第42-44页 |
·电泳迁移率改变分析(EMSA)鉴定重组蛋白结合DNA活性 | 第44-46页 |
·质粒共转染COS-7细胞 | 第46-49页 |
·结果 | 第49-56页 |
·pcDNA3.1-TRβ1真核表达载体进行DNA序列分析 | 第49页 |
·pcDNA3.1-TRβ△真核表达载体进行DNA序列分析 | 第49-50页 |
·pcDNA3.1-TRβ△mut1真核表达载体构建和鉴定 | 第50-51页 |
·pcDNA3.1-TRβ△mut2真核表达载体构建和鉴定 | 第51页 |
·电泳迁移率改变分析(EMSA)鉴定重组蛋白结合DNA活性 | 第51-53页 |
·pcDNA3.1-TRβ△mut1和pcDNA3.1-TRβ△mut2突变质粒通过TRE对报告基因表达的作用及对T_3反应性 | 第53-56页 |
·讨论 | 第56-59页 |
·基因的定点突变 | 第56-57页 |
·TRβ△受体的DBD中P-box氨基酸代换 | 第57-58页 |
·电泳迁移率改变实验鉴定突变后蛋白的DNA结合能力 | 第58页 |
·两种突变质粒通过TRE对报告基因表达的作用及对T_3反应性 | 第58-59页 |
·小结 | 第59-60页 |
结论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第66-67页 |
附录 | 第67-76页 |
综述 甲状腺激素受体与TRE作用的研究进展 | 第76-87页 |
综述参考文献 | 第82-87页 |
致谢 | 第87页 |