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甲状腺激素受体新亚型TRβ△的转录活性以及P-box氨基酸序列与TRβ△转录激活作用关系的研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-11页
缩略语/符号说明第11-12页
前言第12-17页
 研究现状、成果第12-15页
 研究目的、方法第15-17页
一、甲状腺激素受体新亚型TRβ△的转录活性研究第17-40页
   ·对象和方法第17-29页
     ·试剂第17页
     ·pETDuet-TRβ1和pETDuet-TRβ△重组质粒提取第17-18页
     ·pcDNA3.1-TRβ1真核表达载体构建第18-22页
     ·pcDNA3.1-TRβ△真核表达载体构建第22-25页
     ·含有PAL TRE的pGL3-Promoter报告基因载体构建第25-27页
     ·质粒共转染COS-7细胞第27-29页
   ·结果第29-35页
     ·重组质粒pcDNA3.1-TRβ1的构建和鉴定第29-30页
     ·重组质粒pcDNA3.1-TRβ△的构建和鉴定第30-31页
     ·含有PAL TRE的pGL3-Promoter报告基因载体构建和鉴定第31-33页
     ·TRβ△通过TRE对报告基因表达的增强作用及对T_3反应性第33-35页
   ·讨论第35-38页
     ·TRE的结构与类型第35-36页
     ·pGL3-Promoter/TRE报告基因载体的构建第36页
     ·pGL3-Promoter报告基因载体启动子及转染细胞的选择第36-37页
     ·甲状腺激素受体通过TRE对报告基因表达的增强作用及对T3反应性第37-38页
   ·小结第38-40页
二、P-box氨基酸序列与TRβ△转录激活作用关系的研究第40-60页
   ·对象和方法第40-49页
     ·试剂第40页
     ·pcDNA3.1-TRβ△mut1真核表达载体构建第40-42页
     ·pcDNA3.1-TRβ△mut2真核表达载体构建第42-44页
     ·电泳迁移率改变分析(EMSA)鉴定重组蛋白结合DNA活性第44-46页
     ·质粒共转染COS-7细胞第46-49页
   ·结果第49-56页
     ·pcDNA3.1-TRβ1真核表达载体进行DNA序列分析第49页
     ·pcDNA3.1-TRβ△真核表达载体进行DNA序列分析第49-50页
     ·pcDNA3.1-TRβ△mut1真核表达载体构建和鉴定第50-51页
     ·pcDNA3.1-TRβ△mut2真核表达载体构建和鉴定第51页
     ·电泳迁移率改变分析(EMSA)鉴定重组蛋白结合DNA活性第51-53页
     ·pcDNA3.1-TRβ△mut1和pcDNA3.1-TRβ△mut2突变质粒通过TRE对报告基因表达的作用及对T_3反应性第53-56页
   ·讨论第56-59页
     ·基因的定点突变第56-57页
     ·TRβ△受体的DBD中P-box氨基酸代换第57-58页
     ·电泳迁移率改变实验鉴定突变后蛋白的DNA结合能力第58页
     ·两种突变质粒通过TRE对报告基因表达的作用及对T_3反应性第58-59页
   ·小结第59-60页
结论第60-62页
参考文献第62-66页
发表论文和参加科研情况说明第66-67页
附录第67-76页
综述 甲状腺激素受体与TRE作用的研究进展第76-87页
 综述参考文献第82-87页
致谢第87页

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