| 摘 要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-27页 |
| 1 褐藻胶 | 第11-14页 |
| ·褐藻胶的结构 | 第11页 |
| ·褐藻胶的来源 | 第11-12页 |
| ·褐藻胶的生物活性 | 第12-14页 |
| ·褐藻胶多糖的生物活性 | 第12-14页 |
| ·褐藻胶低聚糖的生物活性 | 第14页 |
| 2 细菌褐藻胶的生物合成 | 第14-18页 |
| ·细菌褐藻胶的合成过程 | 第14页 |
| ·细菌褐藻胶生物合成的相关基因 | 第14-18页 |
| 3 褐藻胶裂解酶 | 第18-23页 |
| ·褐藻胶裂解酶研究进展 | 第18-20页 |
| ·褐藻胶裂解酶对假单孢菌生物被膜的影响 | 第20-23页 |
| ·细菌生物膜结构与耐药性机制 | 第21-22页 |
| ·褐藻胶裂解酶对假单孢菌生物被膜的作用 | 第22-23页 |
| 4 甘露糖醛酸C-5 差向异构酶 | 第23-27页 |
| 第二章 AlgL 的过量表达与结果分析 | 第27-41页 |
| 1 实验材料 | 第28-29页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·仪器 | 第28-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-34页 |
| ·pMF36ka 载体的构建 | 第29-30页 |
| ·algL 基因的获得 | 第30-31页 |
| ·Pseudomonas sp. QDA 菌株高分子量基因组 DNA 的制备 | 第30页 |
| ·algL 基因的克隆 | 第30-31页 |
| ·pMF36-Ka-algL载体的构建 | 第31页 |
| ·pMF36-Ka与pMF36-Ka-algL的转化 | 第31页 |
| ·诱导表达 | 第31-32页 |
| ·胞外褐藻胶的提取与分析 | 第32-33页 |
| ·胞外褐藻胶含量测定 | 第32页 |
| ·胞外褐藻胶的提取 | 第32-33页 |
| ·胞外褐藻胶的PAGE 分析 | 第33页 |
| ·抗生素敏感性实验 | 第33页 |
| ·细菌生物膜分析 | 第33-34页 |
| 3 实验结果 | 第34-40页 |
| ·重组质粒pMF36-Ka、pMF36-Ka-algL 的构建 | 第34-35页 |
| ·algL 基因的诱导表达 | 第35-37页 |
| ·胞外褐藻胶分析 | 第37-38页 |
| ·algL 基因的过量表达对菌体抗生素敏感性的影响 | 第38-39页 |
| ·细菌生物膜分析结果 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-41页 |
| 第三章 检测甘露糖醛酸 C-5差向异构酶活性方法的确立 | 第41-47页 |
| 1 实验材料 | 第41-42页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·试剂 | 第41-42页 |
| ·仪器 | 第42页 |
| 2 实验方法 | 第42-43页 |
| ·试剂配置 | 第42页 |
| ·硫酸咔唑法测定糖醛酸含量 | 第42页 |
| ·苯酚硫酸法测定糖醛酸含量 | 第42页 |
| ·~1H-NMR 测定甘露糖醛酸-古罗糖醛酸混合嵌段 | 第42页 |
| ·苯酚硫酸法对甘露糖醛酸C-5 差向异构酶活性的检测 | 第42-43页 |
| 3 结果 | 第43-45页 |
| ·硫酸咔唑法测定聚甘露糖醛酸与聚古罗糖醛酸含量 | 第43页 |
| ·苯酚硫酸法测定聚甘露糖醛酸与聚古罗糖醛酸含量 | 第43-44页 |
| ·苯酚硫酸法测定甘露糖醛酸-古罗糖醛酸混合嵌段 | 第44页 |
| ·~1H-NMR 测定甘露糖醛酸-古罗糖醛酸混合嵌段 | 第44-45页 |
| ·苯酚硫酸法检测甘露糖醛酸C-5 差向异构酶活性 | 第45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 AlgG 的克隆表达与结果分析 | 第47-58页 |
| 1 实验材料 | 第47-48页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·仪器 | 第47-48页 |
| 2 实验方法 | 第48-51页 |
| ·Pseudomonas sp. QDA 菌株高分子量基因组DNA 的制备 | 第48页 |
| ·PCR 扩增目的基因algG | 第48页 |
| ·T-A 克隆 | 第48-49页 |
| ·pET24a-algG 表达载体与工程菌构建 | 第49页 |
| ·重组甘露糖醛酸C-5差向异构酶AlgG的诱导表达条件优化 | 第49-50页 |
| ·重组甘露糖醛酸C-5差向异构酶AlgG的大量表达与纯化 | 第50页 |
| ·苯酚硫酸法对甘露糖醛酸C-5 差向异构酶活性的检测 | 第50-51页 |
| ·序列分析 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-56页 |
| ·PCR 扩增目的基因algG | 第51页 |
| ·T-A 克隆阳性筛选与鉴定 | 第51-53页 |
| ·重组质粒pET24a-algG的鉴定 | 第53-54页 |
| ·重组甘露糖醛酸C-5差向异构酶AlgG的诱导表达条件优化 | 第54页 |
| ·重组甘露糖醛酸C-5差向异构酶AlgG的大量表达与纯化 | 第54-55页 |
| ·甘露糖醛酸C-5 差向异构酶活性的初步分析 | 第55页 |
| ·序列分析结果 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| 小结与展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
