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小麦抗病基因同源序列分析及条锈菌诱导的防御酶活性研究

中文摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
缩略词第10-16页
第一章 文献综述第16-34页
 1.小麦条锈病的危害性及研究第16-17页
 2.小麦抗病相关生化特性的研究第17-20页
   ·H_2O_2与植物抗感病的关系第17-18页
   ·可溶性蛋白及防御酶系在植物抗病性中的作用第18-20页
     ·可溶性蛋白与植物的抗、感病关系第18页
     ·三种防御酶与植物的抗、感病关系第18-20页
 3.抗条锈病基因的来源、定位及分子标记技术第20-27页
   ·抗条锈病基因的来源、性质和定位第20-24页
   ·分子标记第24-27页
 4.植物抗病基因研究进展第27-32页
   ·植物抗病基因的克隆第27页
   ·R基因的结构第27-30页
     ·核苷酸结合位点(NBS)第28页
     ·亮氨酸富集重复区域(LRR)第28-29页
     ·亮氨酸拉链(LZ)第29页
     ·STK第29页
     ·TIR和CC第29-30页
     ·编码毒素还原酶(Toxin reductase)第30页
   ·植物抗病基因同源序列在候选抗病基因克隆和标记中的应用第30-32页
 研究目的和意义第32-33页
 本研究的技术路线第33-34页
第二章 不同类型条锈菌诱导下小麦抗病品种可溶性蛋白与防御酶系活性的变化第34-41页
 1 材料和方法第34-36页
   ·实验材料第34页
     ·小麦材料第34页
     ·菌种第34页
   ·实验方法第34-36页
     ·接种与取样第35页
     ·酶液的提取第35页
     ·可溶性蛋白含量的测定第35页
     ·过氧化物酶(POD)的活性第35页
     ·超氧化物歧化酶(SOD)的活性第35页
     ·过氧化氢酶(CAT)的活性第35-36页
 2 实验结果第36-39页
   ·可溶性蛋白含量的变化第36页
   ·SOD活性的变化第36-37页
   ·POD活性的变化第37页
   ·CAT活性的变化第37-39页
 3 讨论第39-41页
第三章 从小麦gDNA与cDNA中分离抗条锈病相关的RGAs第41-62页
 1 材料和方法第41-47页
   ·实验材料第41-42页
     ·小麦材料第41-42页
     ·黑麦材料第42页
     ·含抗条锈基因近等基因系材料第42页
     ·条锈菌种第42页
   ·试剂及仪器第42页
     ·主要试剂第42页
     ·主要仪器设备第42页
   ·实验方法第42-47页
     ·接种处理第42-43页
     ·条锈病抗性鉴定第43-44页
     ·总DNA提取第44页
     ·总RNA的提取第44页
     ·逆转录反应第44-45页
     ·RGA-PCR扩增第45页
     ·PCR产物检测第45-46页
     ·PCR产物的回收纯化和克隆第46-47页
       ·PCR产物的切胶回收第46页
       ·质粒DNA的转化第46-47页
       ·阳性克隆的PCR鉴定与保存第47页
   ·序列分析第47页
   ·BLAST引物设计第47页
 2 结果分析第47-57页
   ·DNA和RNA的提取第47-48页
     ·DNA的提取第47-48页
     ·RNA的提取第48页
   ·反转录PCR(RT-PCR)第48-49页
     ·反转录第48-49页
     ·RGA-PCR扩增第49页
   ·特异性片段的克隆、测序及分析第49-52页
     ·RGA_(702)和RGA_(200)的回收、克隆及测序第49-50页
     ·RGA_(702)和RGA_(200)的序列分析第50-52页
   ·RGA特殊引物设计与扩增第52-57页
     ·抗条锈病基因及其编码蛋白的检索结果与分析第52-55页
     ·RGA引物扩增结果第55页
     ·特异性条带的克隆及序列分析第55-57页
 3 讨论第57-62页
   ·抗病基因同源序列(RGA)法为植物抗病基因的克隆提供捷径第57-58页
   ·RT-(RGA)PCR的优点及不足第58-59页
   ·生物信息学在RGA分析中的应用前景第59-61页
   ·RGA法的不足及改进第61-62页
第四章 四川小麦抗病遗传材料的RGAs多样性分析第62-72页
 1 材料与方法第62-65页
   ·实验材料第62-63页
   ·实验方法第63-65页
     ·抗性鉴定第63页
     ·DNA的提取第63页
     ·引物合成和PCR扩增第63页
     ·电泳、银染及照相第63-65页
     ·聚类分析第65页
 2 结果分析第65-68页
   ·RGA-RCR第65页
   ·抗性遗传多样性分析第65-68页
 3 讨论第68-72页
第五章 结论第72-74页
参考文献第74-79页
附录 攻读学位期间发表的论文第79-80页
致谢第80页

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